青蒿琥酯抑制人食管癌Eca-109细胞系的CDC25A表达

目的观察青蒿琥酯（artesunate，Art）对人食管癌Eca-109细胞系的抑瘤作用，并进一步探讨ATt诱导肿瘤细胞周期阻滞与CDC25A、TGF-β表达的关系。方法体外培养人食管癌Eca-109细胞系及正常人外周血单个核细胞（hPBMC），利用MTT法测定细胞增殖；采用流式细胞术（FCM）测定细胞周期；应用RT．PCR方法检测CDC25AmRNA表达，应用Western blot方法检测蛋白表达。结果Art能显著抑制Eca-109细胞的增殖，ICS0为（68．80±0．76）μmol／L，而对hPBMC的增殖则没有明显抑制作用。低浓度Art可将细胞阻滞于G0／G1期，S期细胞显著减少，当浓度达到100μmol／L时，细胞阻滞于G2／M期。Art可显著抑制Eca-109细胞CDC25AmRNA及蛋白表达，同时显著上调TGF-β的蛋白表达水平。结论Art可抑制肿瘤细胞生长，上调TGF-β表达，抑制CDC25A表达。     

食管上皮癌变过程中DNA 含量及细胞周期调控因子表达的定量检测

 目的 探讨食管上皮癌变过程中DNA含量、细胞周期分布的变化及多个相关的细胞周期调控因子的表达状况及其意义. 方法 应用碘化丙啶染色和间接免疫荧光标记方法,采用流式细胞仪对30例食管癌组织及相应的癌旁组织进行定量检测. 结果 与正常黏膜和非典型增生组织相比,癌组织中DNA含量明显增高,异倍体细胞显著增加;G0/G1期细胞明显减少,而S期和G2/M期细胞显著增多,增殖指数（PI）高于癌旁组织;cyclinE、cdk2、p53、E2F基因蛋白过表达,两两之间皆有显著性正相关关系,抑癌基因p21^WAF1基因蛋白表达水平明显降低,与其余基因蛋白之间有明显的负相关. 结论 食管上皮癌变过程中,DNA含量及异倍体率增加,细胞周期分布发生了明显的改变,细胞周期相关基因蛋白表达异常.     

肾癌中EphA2/EphrinA1和E-cadherin的表达及其意义

目的：探讨EphA2/EphrinA1和E—cadherin在肾癌组织中的表达及与肾癌临床病理特征的关系．方法：利用免疫组织化学法检测68例肾癌组织、24例正常肾组织中EphA2、EphrinA1和E—cadherin的表达；并采用流式细胞术对上述三种蛋白进行定量分析，采用SPSS13．0进行统计学处理。结果：肾癌组织中EphA2、EphrinA1的表达明显高于正常肾组织（P〈0．01）；E-cadhetin的表达明显低于正常肾组织（P〈0．01）。在肾癌组织中，肿瘤高分级组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平（IHC、FCM）显著高于低分级组（P〈0．01，P〈0．05），而E—eadherin蛋白的表达（IHC）显著低于低分级组（P〈0．01）；肿瘤高分期组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平（IHC、FCM）显著高于低分期组（P〈0．01，P〈0．05），而E—cadherin蛋白的表达（IHC）显著低于低分期组（P〈0．01），淋巴结转移组EphA2、EphrinA1蛋白的表达（IHC、FCM）显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。而E—cadherin蛋白的表达（IHC）显著低于无淋巴结转移组（P〈0．05）。免疫组织化学显示EphA2与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（r=-0．483，P〈0．01），EphrinA1与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（E-0．414，P〈0．01）．EphA2与EphrinA1蛋白的表达呈显著正相关（r=-0．906，P〈0．01）。结论：EphA2／EphrinA1与E—cadherin蛋白表达异常可能共同参与了肾癌的发生、发展与转移；联合检测三种蛋白对于评价肾癌的恶性程度、判断其转移潜能具有一定的参考价值。     

尼美舒利对食管癌Eca-109细胞生长的影响及其可能机制

目的:探讨尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞生长和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用MTT比色法检测尼美舒利对Eca-109细胞体外生长的抑制作用;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,琼脂糖凝胶电泳法进一步观察细胞凋亡;RT-PCR法检测COX-2、PPARγmRNA表达变化,Western blot检测PPARγ蛋白表达变化。结果:尼美舒利(50~400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长作用增强,呈剂量-时间效应关系;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,凋亡细胞增多并出现典型的凋亡细胞DNA ladder。此外,尼美舒利可下调COX-2表达并上调PPARγ表达。结论:尼美舒利能抑制Eca-109细胞的生长,其机制可能是通过抑制Eca-109细胞增殖、诱导细胞周期G0/G1期阻滞、细胞凋亡、下调COX-2表达、上调PPARγ表达而实现的。     

肾上腺髓质素在乳腺癌组织的表达及与临床病理特征的关系

目的:探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)在乳腺癌组织中的表达情况及其与临床病理指标的关系。方法:采用流式细胞术对32例乳腺癌组织、癌旁2cm及癌旁5cm乳腺组织和10例乳腺纤维腺瘤组织的ADM蛋白表达进行定量检测。结果:乳腺癌组织的ADM表达水平(1.234±0.456)高于癌旁2cm乳腺组织(1.011±0.336,P<0.05)和癌旁5cm乳腺组织(0.981±0.397,P<0.05),而癌旁2cm和癌旁5cm组织之间比较差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组织的ADM表达水平也明显高于乳腺纤维腺瘤(0.930±0.141,P<0.01)。ADM在乳腺癌组织的表达水平与肿瘤的组织学分级相关(rs=0.552,P<0.01),组织学Ⅲ级的ADM表达水平(1.516±0.579)明显高于Ⅱ级(1.072±0.186,P<0.01)和Ⅰ级(0.956±0.223,P<0.05),Ⅱ级和Ⅰ级比较差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组织的ADM表达水平与肿瘤大小、TNM分期、病理类型、淋巴结转移状况、ER/PR和C-erbB-2等临床病理指标无关联(P>0.05)。结论:ADM在乳腺癌组织的表达明显增高,肿瘤的组织学分化差者表达增强。     

主要组织相容性复合体在卵巢上皮性肿瘤中表达及对预后的影响

目的:探讨主要组织相容性复合体(MHCIb,HLA-DR)、血管内皮生长因子(VEGF)、共刺激分子(hB7-1)在人卵巢上皮性肿瘤组织中的表达与卵巢上皮性肿瘤发生、发展、预后及肿瘤免疫逃逸的关系,为卵巢癌的生物、基因治疗以及预后的评价提供理论依据。方法:选择1999-01/2003-12本院手术切除的人卵巢上皮癌存档标本52块。选择交界性卵巢上皮肿瘤10块,良性卵巢肿瘤10块,正常卵巢组织10块作为对照。采用SP免疫组化技术检测MHCIb,HLA-DR,hB7-1,VEGF在卵巢上皮性肿瘤中的表达。结果:MHCIb,HLA-DR在卵巢上皮癌中的表达分别为14%,59%,与正常卵巢组织及良性肿瘤比较差异均具有显著性意义(P<0.01或P<0.05),其中HLA-DR表达与组织学类型、临床分期有关,低分化腺癌和宫内膜样癌以及I～II期和III～IV期的表达强度相比差异均有明显意义(P<0.01或P<0.05);VEGF抗原在52例卵巢上皮癌的表达阳性率为75%,与正常卵巢组织及良性肿瘤比较差异有显著性意义(P<0.01),且与临床分期有关,I～II期和III～IV期的表达强度相比差异有明显意义(P<0.01);hB7-1抗原在52例卵巢上皮癌的表达阳性率为20%,较正常卵巢组织及良性肿瘤差异均具有显著性意义(P<0.01或P<0.05)。结论:,卵巢上皮癌组织中MHCIb,HLA-DR,hB7-1,VEGF表达的变化在机体自身抗卵巢肿瘤免     

头孢克肟颗粒在健康受试者体内血浓度测定及相对生物利用度研究

目的:建立头孢克肟血浓度的HPLC测定法,用于人体生物等效性研究。方法:采用随机双交叉实验设计,20名健康受试者口服受试制剂和参比制剂200 mg,用HPLC法测定血浆中的头孢克肟浓度。结果:受试制剂和参比制剂的AUC_0～24分别为（27.96±7.34）mg·h·L^-1、（28.44±9.24）mg·h·L^-1;AUC_0～∞分别为（28.95±7.50）mg·h·L^-1、（29.36±9.47）mg·h·L^-1;C_max分别为（3.27±0.76）mg·L^-1、（3.34±0.83）mg·L^-1;l_max分别为（4.0±0.7）h、（4.2±0.7）h;t_1/2分别为（4.06±1.01）h、（4.08±0.93）h。受试制剂的相对生物利用度为（100.50±11.60）%。两制剂的AUC_0～∞,C_max,t_max,t_1/2差异无统计学意义（P>0.05）。结论:两制剂具有生物等效性。     

流式细胞术测定血小板纤维蛋白原受体活性

正常人周围血中血小板表面纤维蛋白原活化率很低（2%左右）。心脑血管疾病患者却明显增加，ADP刺激后，血小板表面纤维蛋白原受体活性明显增高。     

rasp21和p53基因蛋白在乳腺癌和乳腺良性病变细胞表达的定量研究

ｒａｓｐ２１和ｐ５３基因蛋白在乳腺癌和乳腺良性病变细胞表达的定量研究左连富，齐风英，胡俊兰，郭建文，刘江惠本文应用流式免疫分析技术对乳腺良性病变和癌细胞ｐ２１蛋白和ｐ５３蛋白表达进行定量研究，探讨其与病理学分级、ＤＮＡ倍体和预后的关系。１．材料和方法...