重组结核分支杆菌16000蛋白抗原(rPA16)的免疫原性研究

目的：研究结核分枝杆菌重组16000蛋白（rPA16)诱发家兔产生抗体的能力并评价其血清学诊断的价值。方法：家兔按注射的抗原及佐剂的不同分组，皮下多点注射分别进行免疫，6次免疫后采血，双向琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验（ELISA）跟踪兔血清抗体效价的时间效应并检测兔血清与所试各类分支杆菌PPD有无交叉反应；同时检测rPA16与各分支杆菌PPD的免疫羊血清的反应，并用rPA16抗原检测人血标本，分析该抗原的临床检测的敏感性和特异性。结果：兔血清抗体效价结果显示：5个月后，加佐剂的抗原组的兔免疫血清仍能检测到抗体，不加佐剂组2个月后血清抗体检测即为阴性，ELISA检测兔免疫血清比双向琼脂扩散方法要更敏感，rPA16抗原加佐剂引起的兔血清抗体滴度最高可达1：6400，不加佐剂组的血清抗体滴度仅为1：400，ELISA法分析抗rPA16的兔血清的特异性表明其特异笥较好，仅与牛、人型结核分支杆菌的PPD呈阳性反应，与其他所试分支杆菌PPD反应均为阴性，同时又分析了rPA16抗原的特异性，与人型PPD相比，该抗原只与所试各类分支杆菌，BCG、牛分支杆菌免疫的血清呈阳性反应，而人型PPD则基本上与结核分支杆菌免疫的血清均呈阳性反应，ELISA检测血清标本结果：肺结核病组中rPA16和PPD检测敏感性分别为64.8%和75.2%；健康组，卡介苗接种阳转健康组，rPA16和PPD检测特异性分别为96.2%,88.5%和94.3%,66.7%。结论：rPA16具有较强的免疫原性和一定的特异性，可能成为结核病血清学诊断试剂之一。     

结核分枝杆菌耐药基因快速检测

目的 探讨结核分枝杆菌耐链霉素(SM)和利福平(RFP)的耐药分子机制，采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)同时检测rpsL基因、rpoB基因突变在结核分枝杆菌耐链霉素(SM)和利福平(RFP)耐药性测定中的应用价值。方法 采用PCR-SSCP技术对122株结核分枝杆菌临床分离株rpsL基因、rpoB基因突变同时进行检测，即首先用PCR方法同时扩增RFP、SM的rpoB基因和rpsL基因，然后进行SSCP分析。结果 以结核分枝杆菌H37RV为对照，48株药物敏感株的rpsL基因、rpoB基因均未见SSCP图谱异常。特异性为100.0％，74株同时耐链霉素和利福平的耐药株中，59株(79.7％)有rpsL基因图谱异常；69株(93.2％)有ropB基因图谱异常。结论 ropB基因突变和rpsL基因突变分别是结核分枝杆菌耐利福平和链霉素的主要分子机制。应用PCR-SSCP技术可同时快速检测结核分枝杆菌链霉素和利福平耐药性。     

重组结核分枝杆菌16000蛋白抗原(rPA16)豚鼠皮肤试验效果的研究

目的 :以豚鼠为动物模型 ,分析重组 16 0 0 0蛋白抗原rPA16能否引起迟发型超敏反应 (DTH)。方法 :连续 3次皮下注射结核分枝杆菌H37Rv热灭活菌体 ,使豚鼠致敏后进行皮肤试验。以生理盐水为阴性对照 ,PPD为阳性对照组 ,重组蛋白则设置 0 .1,0 .2 ,0 .4μg三个剂量 ,分别进行背部皮内注射 ,注射后 2 4～ 72h观察豚鼠注射局部皮肤的皮痘、硬结程度。结果 :0 .1～ 0 .4μg/ 0 .2ml的重组蛋白抗原rPA16在 48～ 72h阳性反应平均直径与PPD相比均无显著差异 (均P >0 .1) ,3种浓度的重组蛋白豚鼠皮肤反应的阳性率之间也无显著差异 (P >0 .1)。 48h为rPA16引起豚鼠皮肤反应的较佳测量时间。结论 :重组结核分枝杆菌 16 0 0 0蛋白抗原与PPD相比 ,所引起的豚鼠皮肤DTH的反应能力基本相似 ,具有皮肤试验的潜在应用价值     

浅谈运用护理程序对烧伤患儿进行心理护理

在烧伤患者中儿童占有很大的比例,因其具有年龄小,心理、生理上尚未成熟,心理活动易随情境迅速变化,注意力转移较快,情感比较直率、外露、单纯等特点,传统的心理护理执行时不易准确把握患儿心理问题。我科2005年运用护理程序对烧伤患儿进行系统化护理,及时有效地解决了患儿存在的心理问题,报告如下。1临床资料我科2005年收住患者139例,儿童达75例,占54%,75例患儿中52例在不同疾病阶段出现过心理问题。其中恐惧44例,抑郁4例,孤独感2例,绝望1例,对52例患儿运用整体护理中护理程序进行护理。2方法与结果2.1评估心理问题准确收集患儿的有关心理…     

聚合酶链反应－单链构象多态性用于耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变的研究

目的研究结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变及其与利福平（ＲＦＰ）耐药性的关系。方法以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析了４０株结核分支杆菌临床分离株。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法由ＰＣＲ扩增和扩增产物ＤＮＡ单链多态性分析组成。结果两对引物ＰＣＲ扩增产物分别为４１１和２５８ｂｐ，其敏感性分别为５ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ和１ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ；均为属特异性。４０株结核分支杆菌临床分离株２５８ｂｐ扩增片段ＳＳＣＰ图谱的特点：以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，１０株敏感株均无区别；单耐ＲＦＰ或包括ＲＦＰ多种抗结核药３０株，除３株外，其余２７株ＳＳＣＰ图谱有明显的区别；检测阳性率为９０％，特异性为１００％。结论ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法可检测出耐ＲＦＰ结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变；该基因是ＲＦＰ的药物靶编码基因，它的突变与ＲＦＰ耐药性有密切关系，这有助于结核分支杆菌耐药性的快速检测和研究     

先天性Ⅲ型食管闭锁新生儿的术后护理

目的研究先天性III型食管闭锁新生儿的术后护理。方法本文采用回顾性分析的方法,选取2012年1月-2012年12月我院收治的先天性III型食管闭锁新生儿并手术的患儿40例,对患儿术后进行精心的护理,并且随访患儿1年。结果经过精心护理,死亡3例,死亡率为7．5％,其余患儿均治愈出院,治疗成功率为92．5％,术后随访1年,1例患儿出现吻合口瘘,2例患儿吻合口狭窄,并发症发生率为7．5％。结论术后对患儿进行精心的护理是手术成功的关键,能够促进患儿的康复,具有较好的临床效果。     

神经轴突导向因子 netrin-1及其受体对肾脏功能的影响

神经导向因子在神经系统发育和修复中起着重要的作用。netrins家族是一种结构高度保守、可溶性的神经轴突导向因子,其家族成员有：UNC-6（线虫）、netrin-A与B （果蝇）、netrin-1-4和netrin-G1与G2（哺乳动物）。进化系统树显示,netrins家族成员与层黏连蛋白家族成员关系密切（图1）。netrin蛋白一般可分为6个功能区,N端到C端依次为信号肽、层粘连蛋白Ⅵ结构域LamNT、3个类似层粘连蛋白Ⅴ结构域的表皮生长因子重复序列（Ⅴ1-Ⅴ3）和肝素结合羧基端NTR结构域,Ⅵ区和Ⅴ1-Ⅴ3区与层黏连蛋白高度同源［1］。Ⅵ参与神经轴突生长方向和组织特异性的导向,也是受体结合部位［2］。netrins与不同受体结合对中枢和外周神经细胞迁移产生双重作用,与受体结肠癌缺失蛋白结合产生吸引作用,而与受体UNC5同源物蛋白家族结合产生排斥作用［3］。人类UNC5同源物蛋白家族有4个成员,即 UNC5A、UNC5B、UNC5C 和 UNC5D。netrin-1是在分析突变线虫缺陷UNC-6基因过程中被发现的［2］,除在神经系统表达外,netrin-1在心、肺、肾等组织中也有表达,并参与肿瘤发生、急性损伤、炎症等生理过程。本文着重阐述 netrin-1对肾脏功能的影响。     

结核分支杆菌重组38KDa蛋白质抗原免疫学特性的研究

目的研究重组结核分支杆菌蛋白38KDa(rTPA38)的免疫学特性,以寻找特异性的诊断制剂。方法皮肤试验轮圈法:分别以HRV全菌体、卡介苗、堪萨斯、偶发、瘰疬分支杆菌致敏豚鼠备用;以5IU国际37标准品PPD为阳性对照,0.2μg重组rTPA38抗原分别于背部皮内注射48h观察红肿、硬结反应的纵横径。以rTPA为抗原,PPD为对照,用ELISA法检测血清中的特异性抗结核抗体。结果rTPA与PPD均可诱发豚3838鼠迟发型超敏反应(DTH),所产生的DTH反应与PPD相似,而对堪萨斯、偶发、瘰疬分支杆菌致敏的豚鼠不产生DTH反应。238例肺结核病组、rTPA和PPD检测的灵敏度分别为65.1%、72.7%。健康献血员组、非结核38呼吸疾病组和卡介苗接种阳转者血清同时用rTPA和PPD检测,rTPA的特异性分别为95.6%、95.9%、383888.5%;PPD的特异性分别为91.8%、85.4%、68.7%。统计结果表明rTPA蛋白和PPD检测非结核呼吸疾病组,其38阳性率差异有显著性(P<0.05)。两者检测卡介苗接种阳转组的阳性率和血清抗体滴度差异有显著性(P<0.05)。结论rTPA38诱发豚鼠的DTH反应与PPD相似。rTPA蛋白抗原有较高的特异性和灵敏度,是ELISA法的38可靠抗原,可替代PPD成为一种新的特异性诊断制剂。     

重组结核分支杆菌38000蛋白的理化特征与细胞免疫功能

目的：探讨重组38000蛋白在结核病流行病调查和亚单位疫苗研制中的应用前景。方法：等电点测定，肽图分析和圆二色光谱分析研究重组38000蛋白的理化性质；豚鼠皮试，MTT法测外周血单核细胞增殖和巨噬细胞吞噬探讨重组38000蛋白在细胞免疫中所起的作用。结果：重组38000蛋白是酸性蛋白，其等电点为4．67，肽图分析表明其碱性氨基酸的数量与理论一致；重组38000蛋白的二级结构由α－螺旋（32．6％），β-转角（31．6％）和无规则卷曲（35．8％）组成，它能诱发致敏豚鼠产生DTH反应；增强小鼠巨噬细胞吞噬功能；刺激30．8％健康者和25％所试结核病人的外周血单核细胞增殖。结论：重组38000蛋白可能在结核病流调中具有应用前景，并可作为亚单位疫苗候选者之一。     

颅内血肿微创清除术的护理

我国是脑出血病高发国家之一。颅内血肿微创清除术是目前治疗脑出血的最先进的医疗技术，该手术无需特殊麻醉，局麻下能以最快最短的时间完成手术操作，最大限度的降低了脑出血病人的死亡率，而且手术不开颅，痛苦小，费用低，易于患者家属接受。1 临床资料1．１ 一般资料 手术患者６０例，男４２例，女１８例，最大年龄８０岁，最小４３岁，经头颅ＣＴ检查示：基底节区出血３２例，丘脑出血１６例，脑叶出血１２例，出血量按多田氏公式计算血肿量４０～8０ｍｌ。６０例患者术后复查头颅ＣＴ：血肿完全清除者１６例（残余血量小于１０ｍｌ）…