远缘链球菌中葡萄糖基转移酶催化活性区基因的克隆和初步表达

目的 :构建一株高效表达Streptococcussobrinus 6715中GTF -I催化活性区 (含有B细胞表位 )多肽的菌株 ,为抗GTF -I的单克隆抗体的检测和防治龋病亚单位疫苗的研究奠定基础。方法 :提取基因组DNA ,然后用PCR技术扩增出中目的肽段的约 1.1kb编码基因 ,并将其克隆至表达载体 pGEX -4T -1中构建 pGEX -gtf表达质粒。该质粒转化大肠杆菌JM 10 9后获得重组表达菌株。PCR筛选阳性克隆子。异丙基-β -D -硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,确定含有 pGEX -gtf的大肠杆菌JM 10 9的表达情况。 结果 :含有质粒pGEX -gtf的大肠杆菌JM 10 9能够表达GST -GTF融合蛋白。 结论 :成功扩增目的基因 ,并且把它定向克隆到表达载体pGEX -4T -1中构建表达质粒 ,并且该表达质粒能在大肠杆菌中进行表达     

输尿管镜钬激光治疗尿道内尖锐湿疣(附5例报告)

目的探讨输尿管镜钬激光治疗尿道内尖锐湿疣的安全性和有效性。方法在输尿管镜下用钬激光汽化或切除疣体。结果本组5例手术时间20～50分钟,平均30分钟,术中无尿道穿孔,导尿管留置时间5天,随访半年无尿道狭窄,1例复发经再次钬激光治疗,随访半年未再复发。结论钬激光经尿道治疗尿道内尖锐湿疣是一种安全、高效的方法。     

腹腔镜辅助胃癌D2根治术的临床研究

目的 探讨腹腔镜辅助下胃癌D2根治术治疗胃癌的可行性、安全性和根治性.方法 回顾性分析2011年5月~2012年9月进行的112例胃癌根治术,由患者选择手术方式,腹腔镜组50例,开腹组62例.比较2组手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数量、术后肛门排气时间、术后住院时间和术后并发症.结果 腹腔镜组均在腹腔镜辅助下完成根治性胃切除和淋巴结清扫,无中转开腹.腹腔镜组手术时间[（231.8±44.2）min]、清扫淋巴结数[（18.4±5.5）枚]与开腹组[（223.6±36.9）min、（20.5±5.9）枚]比较,差异无显著性（t=1.070,P=0.287;t=-1.930,P=0.056）.腹腔镜组术中出血量[（160.5±136.4）ml]、术后肛门排气时间[（3.0±1.4）d]、术后住院时间[（11.5±2.3）d]均小于开腹组[（231.6±121.7）ml、（4.8±2.3）d、（14.3±3.9）d],差异有显著性（t=-2.912,P=0.004;t=-4.854,P=0.000;t=-4.484,P=0.000）.腹腔镜组术后并发症发生率为12.0%（6/50）,低于开腹组（21.0%,13/62）,但差异无显著性（χ2=1.580,P=0.209）.两组均无围手术期死亡,术后病理分期差异无显著性（χ2=2.064,P=0.356）.结论 熟悉局部解剖与淋巴结清扫技巧,腹腔镜辅助下胃癌D2根治手术是安全可行的,且具有创伤小、并发症少、恢复快等优点.     

刮吸切割法在腹腔镜胆囊切除术治疗急性胆囊炎中的应用体会

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)治疗急性胆囊炎的手术方法及刮吸切割法在术中的应用价值。方法:回顾分析2007年11月至2013年10月为64例急性胆囊炎患者行LC的临床资料,术中采用吸引器刮吸分离与超声刀切割相结合的方法完成操作。结果:62例(96.9%)手术获得成功,1例因术中出血、1例因术前怀疑Mirizzi综合征中转开腹。手术时间平均(127±31)min,术中出血量平均(115±34)ml,术后下床活动时间平均(17.2±3.8)h,术后胃肠功能恢复时间平均(23.5±8.2)h,手术后胆漏2例(3.2%),术中放置引流管引流46例(74.2%),引流时间平均(4.7±2.3)d,术后平均住院(6.6±2.3)d。术后平均随访(8.2±2.5)个月,无黄疸、膈下感染、"小胆囊"、肝外胆管狭窄等并发症发生。结论:刮吸切割法应用于急性胆囊炎LC术中是安全、可行的。手术成功的关键是术前对病情进行充分讨论与评估,术中使用吸引器刮吸分离与超声刀切割相结合的方法,可较好地解剖Calot三角,有效避免术中大出血、胆管损伤,降低术中并发症发生率及中转开腹率。     

神经轴突导向因子 netrin-1及其受体对肾脏功能的影响

神经导向因子在神经系统发育和修复中起着重要的作用。netrins家族是一种结构高度保守、可溶性的神经轴突导向因子,其家族成员有：UNC-6（线虫）、netrin-A与B （果蝇）、netrin-1-4和netrin-G1与G2（哺乳动物）。进化系统树显示,netrins家族成员与层黏连蛋白家族成员关系密切（图1）。netrin蛋白一般可分为6个功能区,N端到C端依次为信号肽、层粘连蛋白Ⅵ结构域LamNT、3个类似层粘连蛋白Ⅴ结构域的表皮生长因子重复序列（Ⅴ1-Ⅴ3）和肝素结合羧基端NTR结构域,Ⅵ区和Ⅴ1-Ⅴ3区与层黏连蛋白高度同源［1］。Ⅵ参与神经轴突生长方向和组织特异性的导向,也是受体结合部位［2］。netrins与不同受体结合对中枢和外周神经细胞迁移产生双重作用,与受体结肠癌缺失蛋白结合产生吸引作用,而与受体UNC5同源物蛋白家族结合产生排斥作用［3］。人类UNC5同源物蛋白家族有4个成员,即 UNC5A、UNC5B、UNC5C 和 UNC5D。netrin-1是在分析突变线虫缺陷UNC-6基因过程中被发现的［2］,除在神经系统表达外,netrin-1在心、肺、肾等组织中也有表达,并参与肿瘤发生、急性损伤、炎症等生理过程。本文着重阐述 netrin-1对肾脏功能的影响。     

综合手术联合中医辨证治疗腰椎间盘突出疗效及对血清TNF-α和IL-6水平的影响

目的探讨综合手术联合中医辨证治疗对腰椎间盘突出症患者临床疗效及血清TNF-α和IL-6水平的影响。方法将208例腰椎间盘突出症患者随机分为试验组和对照组,每组104例。试验组给予小切口椎板开窗结合自制环锯联合中医辨证治疗,对照组给予传统全椎板切除术联合中医辨证治疗,观察2组疗效及治疗后血清TNF-α和IL-6水平的差异。结果试验组治疗有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后试验组血清IL-6、TNF-α水平均显著低于对照组(P均<0.05),患者SF-36评分显著高于对照组(P<0.05)。试验组并发症发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论小切口椎板开窗结合自制环锯联合中医辨证治疗腰椎间盘突出症具有较好的临床疗效,能够有效调节血清IL-6、TNF-α水平,改善患者生活质量,减少并发症,安全可靠。     

家族性嗜铬细胞瘤一家系诊疗及文献复习

目的探讨家族性嗜铬细胞瘤的遗传特征、临床表现及治疗方法。方法结合文献回顾性分析一家系家族性嗜铬细胞瘤患者的临床资料。结果该家系两代人中有4例肾上腺嗜铬细胞瘤患者,均在青少年期发病,其中1例为双侧发病。采用肾上腺肿瘤切除术治疗。病理诊断为良性嗜铬细胞瘤,随访6个月至28年无复发。结论家族性嗜铬细胞瘤符合常染色体显性遗传特点,多在青少年期发病。目前尚无预防手段,早期诊断和长期随访是提高治愈率的唯一方法。     

血清胱抑素C检测在冠心病诊断中的应用价值

目的探讨血清胱抑素C(Cys C)检测在冠心病诊断中的应用价值。方法 96例急性冠状动脉综合征(ACS)患者随机分为三组,急性心肌梗死组、不稳定型心绞痛组、稳定型心绞痛,各32例,对照组32例来源于体检正常的人群。对患者血清中的Cys C水平进行检查,并对各组结果进行比较。结果急性心肌梗死组的平均Cys C值为(2.26±0.46)mg/L,Cys C异常28例(87.5%),不稳定型心绞痛组的平均Cys C值为(1.56±0.57)mg/L,Cys C异常17例(53.1%),稳定型心绞痛组的平均Cys C值为(1.04±0.29)mg/L,Cys C异常7例(21.9%),对照组的平均Cys C值为(0.72±0.18)mg/L,Cys C异常为0例,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清Cys C水平与急性冠状动脉综合征的发生有密切的关系,能够为急性冠状动脉综合征的发生、发展、预后提供可靠的依据。     

薄层CT引导支气管灌洗提高结核菌涂片和培养的阳性率

目的:评价以薄层CT为引导的支气管灌洗液结核菌涂片和培养的阳性率。方法:127例痰涂片阴性肺结核患者接受经薄层CT为引导的支气管灌洗检查,分析薄层CT征象和结核菌涂片和(或)培养的结果之间的关系。结果:经薄层CT为引导的支气管灌洗液涂片和(或)培养的阳性率为51.2%(65/127)。以薄层CT征象微结节、结节、磨玻璃影及薄壁空洞、支气管扩张以及支气管规则狭窄引导下的肺叶纤维支气管镜灌洗液沉渣抗酸杆菌涂片和(或)培养阳性结果低于阴性结果,其差异有统计学意义(x2=94.76,x2=8.54,x2=29.32,x2=45.12;P<0.001);以薄层CT征象树芽征、实变、厚壁空洞、虫蚀样空洞、支气管不规则狭窄以及支气管黏液嵌塞引导下的肺叶纤维支气管镜灌洗液沉渣抗酸杆菌涂片和(或)培养阳性结果高于阴性结果,其差异有统计学意义(x2=11.93,x2=8.90,x2=18.87,x2=8.90,x2=10.78;P<0.05)。多因素回归分析显示只有厚壁空洞是灌洗阳性的独立预测因子。结论:薄层CT引导支气管灌洗可以提高结核菌涂片和培养的阳性率。     

miR-145抑制c-Myc基因表达对鼻咽癌细胞增殖的影响

目的：探究miR-145影响鼻咽癌细胞增殖可能的机制。方法：采用Real-time PCR法检测鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、CNE-2Z和鼻咽部永生化上皮细胞株NP69中miR-145和c-Myc的mRNA表达水平,Western blotting法检测c-Myc的蛋白表达水平,双萤光素酶报告基因实验检测miR-145与基因c-Myc的关系。分别将miR-Negative control、miR-145 mimics和si-NC、si-c-Myc转染进入CNE-1细胞,采用Real-time PCR及Western blotting法检测转染效果,CCK-8法检测转染后细胞的增殖情况,以及碘化丙啶（IP）染色流式细胞术检测细胞周期情况。结果： miR-145在鼻咽癌细胞系中明显低表达。转染miR-145后明显抑制CNE-1细胞的增殖\[3 d: （1.03±0.02） vs （1.21 ± 0.02）, P<0.05\];\[ 4 d: （1.79±0.02） vs （2.09±0.07）, P<0.01\]和导致G1期阻滞\[（79.57±1.47）% vs （69.98±1.16）%,P<0.05\]。miR-145可以直接作用于c-Myc的3’UTR区域,抑制c-Myc的转录和表达。c-Myc下调可明显抑制CNE-1细胞的增殖\[3 d: （0.80±0.02） vs （1.02±0.01）, P<0.01\];\[4 d: （1.68±0.4） vs （1.92±0.07）, P<0.01\],并致G1期阻滞\[（63.73± 1.81）% vs （54.10±2.26）%,P<0.05\]。结论： miR-145通过靶向作用于c-Myc的3’UTR区来抑制鼻咽癌细胞的增殖,对更深入探索鼻咽癌的诊断和治疗有着重要意义。