KAI-1和nm23-H1的表达与结直肠癌侵袭转移的关系研究

目的 检测结直肠癌组织中KAI-1、nm23-H1基因及蛋白的表达,探讨其在结直肠癌浸润转移中的作用及临床意义.方法 以45例结直肠癌手术标本为研究对象,分别采用荧光实时定量PCR和免疫组织化学方法检测肿瘤组织和切端组织中KAI-1、nm23-H1的mRNA及蛋白表达水平,并结合临床病理资料进行统计学分析.结果 结直肠癌组织中KAI-1和nm23-H1的mRNA表达水平及蛋白表达阳性率均显著低于切端组织,差异有统计学意义(P＜0.01);淋巴结转移者KAI-1、nm23-H1的mRNA表达水平及蛋白表达阳性率均显著低于不伴淋巴结转移者,且二者会随着浸润深度及Dukes分期的增加而表达下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结直肠癌组织中KAI-1 mRNA的表达均与nm23-H1的表达呈正相关(rs值分别为0.583和0.327,P＜0.05).结论 KAI-1和nm23-H1低表达均与结直肠癌的侵袭转移有关,联合检测这两项指标有助于指导临床治疗和预测肿瘤进展.     

大鼠肠系膜血管吻合式小肠移植模型建立及其意义

报告采用大鼠系膜血管吻合式小肠移植模型的制作方法，依此法共施小肠移植手术96只，模型稳定后的51只手术成功率达87.4％。该方法所建立大鼠自体移植模型不仅为利用远交系大鼠研究小肠移植免疫反应提供可靠的阴性对照，而且可做为移植小肠保存、缺血后再灌注损伤等多方面研究的较好模型。     

抗膀胱癌J82及丝裂霉素C单链抗体基因的研究

目的 研制单链抗体,以减少鼠源抗体的异源性,为寻找合理的导向治疗方案提供工具。方法 将经抗原刺激的BALB／C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞合制备杂交瘤,用多聚酶链反应（PCR）方法克隆其抗体可变区基因,并用重叠延伸拼接法（SOE）构建相应的单链可变区抗体片段（ScFv）基因。结果 获得杂交瘤细胞株D10及1C8,酶联免疫吸附法及免疫组织化学证实所分泌的抗体可分别与人膀胱癌细胞及丝裂霉素C特异性结合。获得两种抗体的可变区基因（320bp及340bp片段）及ScFv基因（750bp片段）。结论 应用PCR－SOE方法可快速便捷地获得目的抗体的ScFv基因,为进一步研制双特异性ScFv提供了实验基础。     

大肠癌C-myc基因转录水平及细胞动力学研究

我们采用定量逆转录多聚酶链式反应、免疫组织化学和流式细胞计等方法对大肠癌标本进行检测 ,探索大肠癌发生的细胞分子生物学机制 ,为指导大肠癌的切端提供依据。材料与方法1.实验标本 :大肠癌手术切除标本 30例 ,结肠癌 2 1例 ,直肠癌 9例 ,其中ＤｕｋｅｓＢ期 17例 ,Ｃ期 13例。每例标本分别取材于肿瘤组织 (Ｔ)、癌旁 2ｃｍ(Ｐ2 )、癌旁 5ｃｍ(Ｐ5)及切端正常结肠组织 (Ｎ)。2 .定量逆转录多聚酶链式反应 (Ｑ ＲＴ ＰＣＲ)检测转录水平 :ＴＲＩｚｏｌ提取细胞总ＲＮＡ ,逆转录合成ｃＤＮＡ。以 β ａｃｔｉｎ为内参照 ,其上游引物 :5’…     

中华眼镜蛇蛇毒及复方丹参抑制异种移植免疫排斥的实验研究

目的：研究中华眼睛蛇蛇毒因子（CCV）及复方丹参在异种移植中的作用。方法;采用颈部套袖法建立豚鼠对大鼠心脏异种移植模型。于术前24h按0.5mg/kg ip CCV,术中以复方丹参注射液灌注供心并iv复方丹参。研究对照组,CCV组和CCV 丹参组供心存活时间,复跳时间及血清补体水平的变化。结果：CCV可明显降低血清补体水平,延长供心存活时间,复方丹参注射液可缩短供心复跳时间。二者合用可进一步延长供心存活时间。结论：在异种移植中补体起着关键的作用,CCV通过降低血清补体水平抑制超急性排斥反应（HAR）的发生,复方丹参可减少供心缺血损伤,并改善微循环,CCV和复方丹参合用对HAR有良好的抑制效果。     

胃癌组织中游离氨基酸变化与肿瘤进展程度的关系

目的：探讨胃恶性肿瘤病人氨基酸代谢变化与肿瘤进展程度之间的关系,为胃恶性肿瘤氨基酸失衡疗法提供理论依据。方法：采用Beckman-6300高效氨基酸自动分析仪,检测41例胃恶性肿瘤组织和癌旁胃粘膜组织中19种游离氨基酸的含量,对不同分期肿瘤组织氨基酸进行比较分析。结果：与癌旁胃粘膜组织比较,胃恶性肿瘤组织中牛磺酸、苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸含量升高（P＜0.05)。进展期肿瘤与早期肿瘤相比,脯氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸升高（P＜0.05)。结论：胃癌组织多种游离氨基酸含量显著高于癌旁胃粘膜组织,进展期胃恶性肿瘤组织某些氨基酸含量显著高于早期肿瘤组织。     

大鼠原位肝移植与异位阶段性小肠移植细胞凋亡的差异

目的：将具有免疫特穗性质的移植肝脏与免疫排斥最强度的移植小肠相比较,探讨肝脏移植的特点,方法：对接受肝移植和小肠移植大鼠移植物内凋亡细胞进行观察。结果：移植肝脏内以间质细胞凋亡为主,移植小肠内以实验质细胞凋亡为主,结论：小肠腺上皮调亡在小肠排斥反应中起重要作用。移植肝脏通过浸润细胞凋亡得到保护。     

胰岛素瘤的定位与外科治疗

目的：评价胰岛素瘤影像学定位价值和外科治疗方式。方法：对1995年5月－2000年10月外科治疗的26例胰岛素瘤进行回顾分析。结果：BUS术前定位准确率23．1％，CT定位准确率55％，DSA定位准确率50％，手术探查准确率96．2％，行肿瘤剜除术21例，切除肿瘤21枚，行胰体尾部及脾切除4例，切除肿瘤7枚，其中1例为多发胰岛素瘤伴胰岛细胞增生，胰岛素瘤多达4枚，恶性胰岛素瘤伴肝转移1例，结论：胰岛素瘤影像学术前定位率很低，手术首选胰岛素瘤剜除术。     

结直肠癌中Ets-1和整合素α6β4的表达及临床意义

目的:检测结直肠癌中转录因子Ets-1和整合素α6β4的表达,探讨其在结直肠癌浸润转移中的作用及临床意义.方法:选取2007年6月至2008年6月间天津医科大学总医院外科40例结直肠癌手术标本为研究对象,分别采用荧光实时定量PCR和免疫组织化学方法检测肿瘤和切端组织中Ets-1和整合素α6β4的mRNA和蛋白表达水平,并结合临床病理资料进行统计学分析.结果:Ets-1和整合素α6β4在肿瘤组织中的mRNA表达水平和蛋白表达水平均高于切端组织(P<0.05);Ets-1 mRNA的表达与肿瘤的组织学类型、肿瘤部位、大小及分化程度未见相关性(P>0.05),伴淋巴结转移者Ets-1 mRNA的表达明显高于不伴淋巴结转移者,其差异具有统计学意义(P<0.05),Ets-1 mRNA表达与大肠癌浸润深度及Dukes分期存在正相关,伴随肿瘤浸润深度和临床分期的增加,Ets-1 mRNA表达明显增加,其差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移者的Ets-1蛋白阳性率为91.3%(21/23),无淋巴结转移者为58.8%(10/17),两者差异具有统计学意义(P<0.05),伴随肿瘤浸润深度和Dukes分期的增加,肿瘤组织中Ets-1蛋白阳性率也显著增加(P<0.05),而Ets-1蛋白表达水平与病理类型及分化程度未见相关性(P>0.05);结直肠癌中Ets-1的表达与整合素α6β4的表达呈正相关(P<0.05).结论:检测结直肠癌内Ets-1和整合素α6β4的表达可作为评价肿瘤侵袭转移、判断预后的重要指标,Ets-1可能成为结直肠癌基因治疗新的靶点.     

高表达IDO的树突状细胞抑制T细胞增殖的实验研究

目的:研究基因转染后高表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的树突状细胞(DC)对T细胞增殖的抑制作用,以探讨其在器官移植中排斥反应的作用.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从腹膜炎小鼠的小肠组织中获取IDO全长cDNA片段,将其克隆至真核表达质粒pTracer中.构建真核表达质粒IDO-pTracer,随后用LipofectamineTM 2000介导转染小鼠脾脏DC,分为未转染组、空载体转染组、IDO基因转染组和IDO基因转染并添加1-甲基色氨酸(1-MT)组,以混合淋巴细胞反应的方法检测转染后DC对同种异系T细胞增殖的作用.结果:克隆的小鼠IDO基因全长cDNA大小约1.3 kb,无碱摹突变,以构建的重组真核表达质粒IDO-pTracer转染DC后,混合淋巴细胞反应结果显示IDO基因转染组的刺激指数(SI)低于未转染组、空载体转染组及IDO基因转染并添加1-MT组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:成功构建了IDO基因的真核表达载体IDO-pTracer,且IDO基因转染DC具有抑制异系T细胞增殖的作用.