胰腺癌组织中BRAF表达的初步研究

目的:了解BRAF基因在正常胰腺和胰腺癌组织中的表达水平。方法:6例胰腺癌标本取自胰腺癌手术患者,3例正常胰腺组织取自外伤性胰腺损伤需切除部分胰腺者。用Trizol法抽提每份组织的总RNA,分别进行紫外分光光度计测定、琼脂糖凝胶电泳及Lab on ch ip检测,对总RNA进行质控;应用实时定量PCR技术检测正常胰腺和胰腺癌组织BRAF的mRNA水平;应用W estern b lot检测BRAF的蛋白表达水平。结果:BRAF mRNA水平在正常胰腺组织中为0.001 016 7±0.000 25,胰腺癌组织中为0.002 606 2±0.001 09,上调2.56倍;W estern b lot显示,正常胰腺组织BRAF蛋白表达为6.70±2.50,胰腺癌组织为21.23±5.60,上调3.17倍。结论:胰腺癌组织中BRAF mRNA和蛋白表达水平均明显上调,其可能的调控机制及生物学效应还有待进一步研究。     

P物质及其受体在慢性胰腺炎组织的表达和临床意义

目的 了解P物质及其受体NK－1R在正常胰腺和慢性胰腺炎中的表达，探讨它们与慢性胰腺炎时疼痛发生的关系。方法 25个慢性胰腺炎标本取自慢性胰腺炎手术，男性18例，女性7例，正常胰腺组织取自20个器官捐献者，男性11例，女性9例。应用实时定量逆转录整合酶链反应（RT－PCR）技术，检测正常胰腺和慢性胰腺炎组织中P物质和NK－1R的mRNA水平，应用Western blot技术检测NK－1R的蛋白水平，应用免疫组织化学方法进行NK－1R的组织学定位。将P物质及其受体NK－1R mRNA水平与疼痛的程度，发作频率和病程进行分析，寻找其中的相关性。结果 与正常胰腺相比，慢性胰腺炎组织中P物质和NK－1R mRNA和蛋白都过度表达，NK－1RmRNA水平与疼痛的程度，发作频率和病程明显相关。免疫组化检查显示，NK－1R的表达主要位于胰腺腺泡，胰腺导管，神经纤维和炎性细胞。结论 慢性胰腺炎组织中P物质和NK－1R的表达水平都明显上调，扰乱了神经激肽的作用环节，NK－1R的过度表达与疼痛发生有关。     

神经激肽-2受体的过度表达与慢性胰腺炎的疼痛相关

目的:了解神经激肽-2受体(NK-2R)在正常胰腺和慢性胰腺炎组织中的表达, 探讨其表达与慢性胰腺炎疼痛发生的关系。方法:25个慢性胰腺炎标本取自慢性胰腺炎手术, 男性18例, 女性7例, 正常胰腺组织取自20个器官捐献者, 男性11例, 女性9例。应用实时定量逆转录聚合酶链反应技术, 检测正常胰腺和慢性胰腺炎组织NK-2R的mRNA水平, 应用Western blot技术检测NK-2R的蛋白水平, 应用免疫组织化学方法进行NK-2R的组织学定位。将NK-2R mRNA水平与疼痛的程度、发作频率和持续时间进行分析, 寻找其中的相关性。结果:与正常胰腺相比, 慢性胰腺炎组织中NK-2R mRNA和蛋白都过度表达, NK-2R mRNA水平与疼痛的程度(r=0.59, P＜0.01)、发作频率(r＝0.51, P＜0.05)和持续时间(r=0.53, P＜0.05)明显相关。免疫组化检查显示, NK-2R的表达主要位于胰腺腺泡、胰腺导管、神经纤维和炎性细胞。结论：慢性胰腺炎组织中NK-2R的mRNA和蛋白表达水平都明显上调, 扰乱了神经激肽的作用环节;NK-2R的过度表达与疼痛发生有关。     

白塞综合征合并肠外瘘的诊治

目的探讨白塞综合征合并肠外瘘的诊治。方法对1例2次手术后均合并肠瘘的白塞综合征患者行回盲部、末端回肠切除并回肠造瘘术的资料进行总结。结果患者术后未再出现肠瘘,恢复良好,待二期手术。结论白塞综合征合并肠外瘘应进行以手术为主的综合治疗。     

胰体癌63例临床分析

目的探讨如何提高胰体癌手术切除率和手术效果。方法对1980年以来收治的63例胰体癌手术病人进行回顾性分析。以1992年为界，将病例分为前期组和后期组。结果两组在中位年龄、性别比、临床表现、病理类型等方面，无显性差别。术前检查：B超检查率，前期组为50％，后期组为100％。CT检查率，前期组为12．5％，后期组为58．1％。CA-199检查率，前期组为0，后期组为64．5％。两组比较均有显性差异。手术切除率：前期组32例，行胰体尾切除术2例，切除率为6．3％。后期组31例，行胰体尾切除术18例，切除率为58．1％，根治性切除12例，根治性切除率为38．7％，前后组比较具有显性差异。结论及早诊断、手术态度积极、娴熟的手术技巧是提高胰体癌手术切除率的重要原因。防止术中癌细胞经血行转移、保证胰腺断面无癌细胞残留、廓清胰周淋巴结和腹膜后神经丛是提高手术效果的重要途径。     

S100PshRNA慢病毒载体的构建及其对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响

目的：：构建针对S100P基因的shRNA慢病毒载体,并在胃癌MGC-803细胞上鉴定沉默效率,观察其对细胞生物学行为的影响。方法：筛选的S100P基因特异性siRNA靶点,合成短发卡结构shRNA,并与GV115-GFP慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,与pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共转染293T细胞,产生慢病毒。用病毒感染MGC-803细胞,RT-PCR和Western blot检测靶基因的沉默效率、克隆形成情况、细胞周期变化和凋亡实验观察靶基因沉默对MGC-803的影响。结果：构建的重组shRNA慢病毒载体,经293T细胞包装获得病毒颗粒,和阴性对照相比,慢病毒感染组S100 P mRNA表达下降了83.4%,蛋白表达也明显受到抑制。 S100 P沉默后MGC-803的克隆形成能力明显减弱,细胞周期发生S期阻滞,细胞凋亡明显增加。结论：成功地构建了S100P基因shRNA慢病毒表达载体,该载体能够在MGC-803细胞中沉默S100P基因的表达,导致胃癌细胞克隆形成能力降低,细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,表明S100 P基因有可能具有影响胃癌发生发展的作用。     

联合应用激光微切和实时定量RT-PCR检测单个胰岛的基因表达

在显微镜下用紫外激光微切机将单个胰岛从胰腺切片中切下，提取RNA后逆转录成cDNA并在实时定量RY—PCR中得到有效的扩增，其表达量与细胞数量成正比。     

新冠肺炎疫情下中医风湿科治疗策略

以结缔组织病为主体的风湿病都是慢性疾病,需要长期持续性治疗。新型冠状病毒肺炎(COVID-19)流行期间,为了控制传染源,切断传播途径,全国各地均实行交通管制,风湿病患者复诊困难。医师无法判断患者病情控制的水平,无法了解服药后是否已产生不良反应,故而难以为患者提供全面的治疗建议。作为补救措施,可通过加患者微信开展网络咨询服务,开展函诊,快递药物。风湿病患者大都是新型冠状病毒的易感人群,医师需要为患者做更多的健康教育工作。虽然不能当面指导,但可以通过电话、微信等途径向患者反复宣教如何防范病毒感染。已经感染新型冠状病毒肺炎的风湿病患者,要在呼吸科和风湿科医师的协同指导下开展治疗。     

缺血预处理对肝血流阻断肝切除影响的荟萃分析

目的通过荟萃(Meta)分析,探讨缺血预处理(IP)对肝血流阻断肝切除术后肝功能、并发症及住院天数的影响。方法计算机检索PUBMED,EMBASE,Cochrane图书馆和重庆维普、中国期刊网、万方数据库,依据纳入和排除标准收集相关随机对照试验(RCT),进行文献筛选、数据提取及质量评价,采用RevMan 4.2.2软件进行Meta分析。结果纳入8个RCT研究共5 1 1例患者,文献质量评价均为B级。Meta分析结果表明:肝血流阻断肝切除术后IP组的ALT峰值(加权均数差=-1 7 6.3 7;9 5%CI为-3 2 0.6 7~-3 0.0 6;P=0.0 2)及并发症发生率(比值比=0.6 4;9 5%CI为0.4 1~0.9 8;P=0.0 4)均低于对照组。但两组术中出血、手术时间、肝血流阻断时间、术后AST峰值、术后总胆红素峰值及住院天数无统计学差异。结论IP可降低肝血流阻断肝切除术后ALT峰值及并发症的发生率,但其对肝脏缺血/再灌注损伤的保护作用尚缺乏充足的证据。     

胆囊癌的手术治疗体会(附66例临床分析)

目的：总结我院近10年来手术治疗的66例胆囊癌的治疗情况，探讨如何提高胆囊癌的手术治疗效果。方法：对66例胆囊癌的手术治疗病例作一回顾性分析，根据病情将手术分为意外胆囊癌、肝脏型、胆道型、肝胆型和其他型5种类型。结果：本组共行根治性切除术18例，包括胆囊、肝脏楔型切除术9例，半肝切除术／肝三叶切除术6例，胰十二指肠切除术3例，均进行了相应淋巴结清扫。活检包括单纯活检、活检加胆囊造瘘或胆管T管引流术，姑息性切除包括单纯胆囊切除、胆囊切除加胆管T管引流术或胆肠吻合术。结论：对胆囊癌患者根据肿瘤累及范围，可以采取规范的根治术、积极的扩大根治术和及时的再手术。