不同容量左旋布比卡因腋路三点注射臂丛神经阻滞的效应比较

腋路臂丛神经阻滞操作简便、并发症少，为上肢手术常用的麻醉方法。但是，传统的腋动脉旁单点注射阻滞法(简称单点法)易出现阻滞不完善现象。本研究据臂丛神经的解剖特点，设计了腋动脉周围三点注射臂丛神经阻滞法(简称三点法)，观察等剂量、不同容量左旋布比卡因的阻滞效果，并与单点法进行对比，以评价此方法的可行性。     

Effect of Inhalational Anesthetics on Cytotoxicity and Intracellular Calcium Differently in Rat Pheochromocytoma Cells （PC12）

Isoflurane, a commonly used inhaled anesthetic, induces apoptosis in rat pheochromocytoma cells （PC12） in a concentration- and time-dependent manner with unknown mechanism. We hypothesized that isoflurane induced apoptosis by causing abnormal calcium release from the endoplasmic reticulum （ER） via activation of inositol 1,4,5-trisphosphate （IP3） receptors. Alzheimer＇s presenilin-1 （PS 1） mutation increased activity of IP3 receptors and therefore rendered cells vulnerable to isoflurane-induced cytotoxicity. Sevoflurane and desflurane had less ability to disrupt intracellular calcium homeostasis and thus being less potent pared the cytotoxic effects of various inhaled to cause cytotoxicity. This study examined and com-anesthetics on PC12 cells transfected with the Alzheimer＇s mutated PS 1 （L286V） and the disruption of intracellular calcium homeostasis. PC 12 cells transfected with wild type （WT） and mutated PS 1 （L286V） were treated with equivalent of 1 MAC of isoflurane, sevoflurane and desflurane for 12 h. MTT reduction and LDH release assays were performed to evaluate cell viability. Changes of calcium concentration in cytosolic space （[Ca^2＋]c） were determined after exposing different types of cells to various inhalational anesthetics. The effects of IP3 receptor antagonist xestospongin C on isoflurane-induced cytotoxicity and calcium release from the ER in L286V PC12 cells were also determined. The results showed that isoflurane at 1 MAC for 12 h induced cytoxicity in L286V but not WT PC12 cells, which was also associated with greater and faster elevation of peak [Ca^2＋]c in L286V than in the WT cells. Xestospongin C significantly ameliorated isoflurane cytotoxicity in L286V cells, as well as inhibited the calcium release from the ER in L286V cells. Sevoflurane and desflurane at equivalent exposure to isoflurane did not induce similar cytotoxicity or elevation of peak [Ca^2＋]c in L286V PC 12 cells. These results suggested that isoflurane induced cytoxicity by partially     

异氟醚预处理对谷氨酸诱导大鼠神经元样PC12细胞凋亡的影响

目的 探讨异氟醚预处理对谷氨酸诱导大鼠神经元样PC12细胞凋亡的影响.方法 神经生长因子孵育5d的神经元样PC12细胞,以5×104个/ml密度接种于6 cm培养皿(3 ml/皿)或6孔板(2ml/孔),采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=18):正常对照组(C组)、谷氨酸组(G组)、谷氨酸+异氟醚组(GI组)和谷氨酸+异氟醚+三磷酸肌醇受体拮抗剂光溜海绵素组(GIX组).C组不做任何处理;G组、GI组和GIX组均加入500 μmol/L谷氨酸,GI组和GIX组通入1.2％异氟醚2h,停止通入后10 min加入谷氨酸,GIX组通入异氟醚前即刻加入光溜海绵素100 nmol/L.于谷氨酸孵育20 min时,每组取6皿和6孔,收集细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位(MMP),采用显微荧光测量技术检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i).结果 与C组比较,G组和GIX组细胞凋亡率和[Ca2+]i升高,MMP降低(P＜0.01),GI组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与G组比较,GI组和GIX组细胞凋亡率和[Ca2+]i降低,MMP升高(P＜0.05或0.01);与GI组比较,GIX组细胞凋亡率和[Ca2+]i升高,MMP降低(P＜0.01).结论 异氟醚预处理可抑制大鼠神经元样PC12细胞凋亡,其机制与激活内质网三磷酸肌醇受体,抑制内质网释放Ca2+,提高MMP有关.     

阿魏酸钠对家兔创伤失血性休克复苏胃黏膜损伤的保护作用

目的 探讨阿魏酸钠对创伤失血性休克复苏胃黏膜损伤的保护作用及机制.方法 家兔100只,按随机数字表法分为4组:A组为正常对照组、B组为模型组、C组和D组分别为复苏前及复苏后应用阿魏酸钠组,每组25只.以股骨粉碎性骨折及放血法建立家兔创伤失血性休克复苏胃黏膜损伤模型,复苏前20 min C组及复苏30 min时D组缓慢静注阿魏酸钠30 mg/kg.复苏90 min取胃黏膜组织,光镜下观察胃黏膜病理学改变,测定胃黏膜组织一氧化氮(NO)、内皮素(ET)和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与A组比较,余3组MDA、ET和NO含量升高及SOD活性降低(P<0.01),胃黏膜有不同程度损伤.与B组比较,C、D两组MDA、ET和NO含量降低,而SOD活性升高 (P<0.05或0.01),胃黏膜损伤程度减轻.与C组比较,D组MDA、ET和NO含量升高及SOD活性降低(P<0.05).结论 阿魏酸钠对家兔创伤失血性休克复苏胃黏膜损伤具有保护作用,且复苏前应用效果较佳.其机制与阿魏酸钠清除氧自由基、降低ET水平及抑制NO过量产生有关.     

阿魏酸钠对家兔创伤失血性休克复苏胃黏膜损伤的影响

目的 探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对创伤失血性休克复苏胃黏膜损伤(traumatic hemorrhagic shock resuscitation-gastric mucosal injury,THSR-GMI)的作用及机制.方法 本实验于河北医科大学生理实验室完成.家兔100只,按随机数字表法分为4组:对照组(A组)、模型组(B组)、复苏前(C组)及复苏后(D组)应用SF组,每组25只.除A组外均以股骨粉碎骨折并放血法复制家兔THSR-GMI模型.复苏前20 min C组及复苏30 min时D组由耳缘静脉缓慢静注SF 30 mg/kg,其余各组均给予等容量生理盐水替代.复苏90 min取胃黏膜标本,按Guth方法计算胃黏膜损伤指数(DI),电子显微镜下观察胃黏膜壁细胞超微结构改变,用放射免疫法测定胃黏膜组织血栓素B2( TXB2)、6-酮-前列环素F1α(6-Keto-PGF1α)含量,计算TXB2/6-Keto-PGF1α比值.组间比较采用单因素方差分析(LSD-t检验),以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 ①电镜下:A组壁细胞分泌小管紧闭,呈明显静息状态;B组分泌小管增多、管腔明显扩张;C组较B组分泌小管减少、扩张不明显;D组分泌小管情况介于B、C两组之间.②与A组比,其余3组的DI值[(81.5±13.6)、 (61.3±18.2)、 (70.5±17.2)vs.(4.2±2.7)]、TXB2含量[ (4.95±0.51)、(3.75±0.64)、(4.39±0.69) vs. (2.76±0.44)]及TXB2/6-Keto-PGF1α比值[ (0.064±0.002)、(0.037±0.005)、(0.049 ±0.002) vs.(0.027 ±0.002)]均升高(P＜0.01),而6-Keto-PGF1α[(77.9±8.9)、(96.4±11.2)、(89.2±11.4) vs.(109.3±7.6)]降低(P＜0.05或P＜0.01).与B组比,C、D两组DI值[(61.3±18.2)、 (70.5±17.2) vs.(81.5±13.6)]、TXB2含量[(3.75 ±0.64)、(4.39±0.69) vs.(4.95±0.51)]及TXB2/6-Keto-PGF1α比值[ (0.037 ±0.005)、(0.049±0.002) vs.(0.064±0.002)]均降低(P＜0.05或P＜0.01),而6-Keto-PGF1α含量[(96.4±11.2)、 (89.2±11.4) vs.(77.9±8.9)]升高(P＜0.05或P＜0.01).与C组比,D组DI值[(70.5±17.2) vs.(61.3±18.2)]、TXB2含量[(4.39±0.69) vs.(3.75±0.64)]及TXB2/6-Keto-PGF1α比值[(0.049±0.002) vs.(0.037±0.005)]均升高(P＜0.05或P＜0.01),而6-Keto-PGF1α含量[(89.2±11.4) vs.(96.4±11.2)]降低(P＜0.05).结论 SF可减轻家兔HTSR-GM1,且复苏前应用效果较佳,其机制可能与SF防治或改善TXA2/PGI2平衡紊乱、抑制壁细胞的分泌功能有关.     

七氟醚控制性降压对脑代谢的影响

目的 观察七氟醚控制性降压的效果及对脑氧供需平衡、脑能量代谢的影响,并与硝普钠（ＳＮＰ）降压进行对比。方法 择期手术病人４０例随机分为三组：Ｉ组七氟醚降压组,Ⅱ组七氟醚常压组和Ⅲ组ＳＮＰ降压组。Ｉ组增加七氟醚吸入浓度,Ⅲ组静滴ＳＮＰ溶液,降至基础值的５０％～６０％持续４０ｍｉｎ,连续监测ＭＡＰ、ＨＲ、及ＥＣＧ,并同步采集桡动脉和颈内静脉血行血气分析,计算动－颈内静脉氧含量差（Ｄａ－ｊｖＯ２）;测定     

尼莫地平复合7.5%高渗盐水对七氟醚诱导老龄大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨尼莫地平复合7.5%高渗盐水对七氟醚诱导老龄大鼠海马神经元凋亡的影响。方法健康雄性Wistar大鼠96只,18月龄,体重450~500g,采用随机数字表法将其分为四组(n=24):对照组(C组)、尼莫地平组(N组)、高渗盐水组(HS组)和尼莫地平+高渗盐水组(NHS组)。C组腹腔和尾静脉注射生理盐水;N组腹腔注射尼莫地平1 mg/kg,尾静脉注射生理盐水;HS组尾静脉注射7.5%高渗盐水4 ml/kg,腹腔注射生理盐水;NHS组腹腔注射尼莫地平1mg/kg,尾静脉注射7.5%高渗盐水4ml/kg。30min后四组大鼠吸入3%七氟醚2h。于麻醉前1d、麻醉后1、3、7d行Morris水迷宫实验,实验结束后每组随机处死8只大鼠,取海马组织,采用流式细胞术测定海马神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度;采用RT-PCR法测定海马Bcl-2、Bax的mRNA表达量。结果与C组比较,N、HS、NHS组大鼠麻醉后1、3、7d逃避潜伏期明显缩短,穿越原平台次数明显增加,麻醉后1、7d海马神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度明显减低,Bcl-2 mRNA表达量明显上调,Bax mRNA表达量明显下调,Bax/Bcl-2比值明显降低(P0.05);与NHS组比较,N和HS组大鼠麻醉后1、3、7d逃避潜伏期明显延长,穿越原平台次数明显减少,麻醉后1、7d海马神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度明显增高,Bcl-2 mRNA表达量明显下调,Bax mRNA表达量明显上调,Bax/Bcl-2比值明显升高(P0.05)。结论尼莫地平复合7.5%高渗盐水可抑制钙超载,降低七氟醚诱导老龄大鼠海马神经元凋亡率,且其作用优于单独给药。     

七氟醚对神经元缺氧损伤的保护及其作用机制

目的 观察七氟醚对大鼠海马神经元缺氧损伤的保护作用及其机制.方法 用原代培养的新生大鼠海马神经细胞建立缺氧模型,用MTT法测定神经元存活率.采用激光扫描共聚焦显微镜动态监测单个海马神经元[Ca2 ]i随缺氧或加入KCl前后的实时变化.结果 七氟醚在2MAC(肺泡气最小有效浓度),可降低神经元缺氧损伤时的细胞死亡率(P＜0.05).0.5～2MAC七氟醚能抑制缺氧及50 mmol/L KCl引起的[Ca2 ]i升高(P＜0.05).结论 七氟醚对离体大鼠海马神经元缺氧性损伤具有保护作用,其机制可能与七氟醚抑制缺氧引起[Ca2 ]i异常升高有关.     

激活γ-氨基丁酸B受体对糖尿病神经痛大鼠脊髓背角神经元谷氨酸递质释放的影响

目的 探讨激活γ-氨基丁酸B(γ-aminobutyric acid B,GABAB)受体对糖尿病神经痛大鼠脊髓背角谷氨酸能神经元递质释放中的影响.方法 30只(4周龄,150 g～170 g)雄性Sprague-Dawley( SD)大鼠,采用随机数字表法随机分为2组(每组15只):正常对照组(N组)、糖尿病神经痛组(D组).D组通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)50 mg/kg制备糖尿病神经痛模型,N组腹腔给予等量生理盐水,两组分别于腹腔注射后第3～4周测定空腹血糖、机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);然后处死大鼠取腰1～5脊髓,制备脊髓薄片,采用全细胞膜片钳技术,记录脊髓Ⅱ板层单突触神经元谷氨酸能诱发兴奋性突触后电流(evoked excitatory postsynaptic currents,eEPSCs).细胞封接后稳定5 min开始记录,灌流液中加入终浓度为1、10、20、50μmol/L的Baclofen(GABAB受体特异性激动剂),于给药前对照、给予上述浓度药后各时点及洗脱后5 min,记录上述各时点eEPSCs的波幅变化,比较Baclofen对两组大鼠eEPSCs波幅的抑制率,并观察CGP55845 (GABAB 受体特异性阻断剂,1 μmol/L)对Baclofen(50 μmol/L)eEPSCs作用的影响.结果 与N组比较,D组大鼠血糖显著增高,PWT明显降低(P＜0.05).电生理共记录30个神经元(每组15个),1 μmol/L～50 μmol/L的Baclofen均以剂量依赖方式降低两组大鼠eEPSCs波幅(P＜0.05),N、D两组在1、10、20、50 μmol/L Baclofen时点波幅抑制率均明显下降(P＜0.05),两组上述时点比较,D组显著低于N组(P＜0.05),分别为:(47±7)vs(21±7),(55±6)vs(50±6),(92±6)vs(72±9),(95±8)vs(88±8),1μmol/LCGP55845可完全去除50 μmol/L Baclofen对两组神经元(每组12个)eEPSCs的作用.结论 激活GABAB受体可明显抑制脊髓背角神经元谷氨酸递质释放,但对糖尿病神经痛大鼠其抑制作用减弱.     

异氟醚对转染APPsw基因SH-SY5Y细胞凋亡的影响和IP3受体在其中的作用

目的 评价异氟醚对转染APPsw基因SH-SY5Y细胞凋亡的影响和1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)受体在其中的作用.方法 将转染APPsw基因的SH-SY5Y细胞以1.2×104个/cm2密度接种于培养瓶中,采用随机数字表法,将其分为4组(n=6):对照组(C组)、IP3受体拮抗剂组(Ⅹ组)、异氟醚组(Ⅰ组)和异氟醚+ IP3受体拮抗剂组(Ⅰ+Ⅹ组).继续培养24h细胞贴壁后,C组常规培养;Ⅹ组和Ⅰ+Ⅹ组加入IP3受体拮抗剂Xestospongin C 100 nmol/L; 30 min后Ⅰ组和Ⅰ+Ⅹ组给予1.2％异氟醚处理8h.收集细胞,电镜下观察超微结构,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和胞浆内游离钙离子浓度([Ca2+]i),采用Western blot法测定IP3受体蛋白表达.结果 与C组比较,Ⅹ组细胞凋亡率、[Ca2+]i和IP3受体蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),Ⅰ组和Ⅰ+Ⅹ组细胞凋亡率增加,[Ca2+]i升高,IP3受体蛋白表达上调(P ＜0.05或0.01);与Ⅰ组比较,Ⅰ+Ⅹ组细胞凋亡率和[Ca2+]i降低,IP3受体蛋白表达下调(P＜0.01).Ⅰ组和Ⅰ+Ⅹ组细胞出现病理学损伤,Ⅰ组损伤重于Ⅰ+Ⅹ组.结论 异氟醚可通过升高胞浆内游离Ca2+浓度、上调IP3受体蛋白表达,引起转染APPsw基因的SH-SY5Y细胞凋亡.