PMT和H6H双基因共转化颠茄发根的植株再生

目的获得1,4-丁二胺-氮-甲基转移酶(putrescine N-methyltransferase,PMT)和莨菪碱-6β-羟化酶(hyoscyamine6β-hydroxylase,H6H)双基因共转化的颠茄发根的再生植株。方法选用PMT和H6H双基因共转化的东莨菪碱高产发根单克隆T4,用1/2MS 1.0mg/LNAA固体培养基培养1、5、10d后,转入1/2MS固体培养基中诱导不定芽和不定根,培养条件均为(25±1)℃,55μmol/(m2.s),12h/d。采用PCR扩增检测再生植株的PMT、H6H和NPT-。结果发根在1/2MS 1.0mg/LNAA固体培养基上培养5d后,转入1/2MS固体培养基上培养,60%的外植体能自发长出不定芽,1/2MS 0.1mg/LIBA固体培养基中诱导生根较1/2MS固体培养基强,15d产生的条数平均为9条,形成了完整的再生植株。PCR检测表明所有再生植株均为颠茄的转基因再生植株。结论建立了颠茄转化发根再生体系,为实现颠茄托品烷类生物碱的代谢工程及开展分子育种奠定了基础。     

足三里穴电针治疗对不全性肠梗阻大鼠血清细胞因子的影响

目的 观察足三里穴电针治疗对不全性肠梗阻大鼠血清细胞因子的影响.方法 成年SD大鼠70只按随机数字表法分为:正常对照组、假手术组、不全性肠梗阻组、足三里穴组、阴陵泉穴组,每组8只大鼠(实验大鼠死亡后取健康大鼠制作模型补齐).正常对照组:不做任何处理;假手术组:仅做开腹处理;不全性肠梗阻组:采用回肠末端套环法建立大鼠不完全肠梗阻模型;足三里穴组:不全性肠梗阻模型大鼠术后1个月取左后肢足三里穴,辅以悬钟穴进行电针30 min,每天1次,连续7d;阴陵泉穴组:为非治疗穴对照,不全性肠梗阻模型大鼠术后1个月取左后肢内侧阴凌泉穴,辅以三阴焦穴进行电针刺激.ELISA方法检测血清TNF-α、IL- 10、NO含量.组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小显著差数法.结果正常对照组和假手术组大鼠血清TNF-α水平分别为(28 ±5) μg/L和(28±6)μg/L.建立模型后,不全性肠梗阻组大鼠血清TNF-α水平达到(39±11) μg/L,较其余几组显著升高(F =2.344,P ＜0.05);足三里穴组大鼠血清TNF-α水平为(34±11) μg/L,较阴凌泉穴组降低了17.1％,但差异无统计学意义(P＞0.05).各组大鼠血清IL-10变化不大,差异无统计学意义(F=0.176,P ＞0.05).正常对照组和假手术组大鼠NO分别为(136 ±9) μmol/L和(135±7)μmol/L,不全性肠梗阻组大鼠NO较正常对照组降低达到(123±11)μmol/L,足三里穴组NO则相对较高为( 130±11) μmol/L,几组比较,差异有统计学意义(F =4.086P＜0.05).结论 电针足三里穴可激发大鼠ICC释放NO降低细胞因子水平,减轻不全性肠梗阻所致炎症反应.     

护士在护理工作中发生针刺伤的原因及防护对策

针刺伤是一种意外伤害,可导致患者损伤局部出血,同时被病原体污染的血液或体液会由此接种到受伤者体内.大量研究证实护士是发生针刺伤及感染经血液传播疾病的高危职业群体.而我国又是肝炎的高发区,乙肝总感染率高达60%左右,乙肝病毒(HBV)携带者已有1.3亿,艾滋病毒(HIV)的感染流行在我国也已经进入快速增长期,故护士特定的工作性质,使护理人员面临着严峻的职业暴露的危险.而由此引发的职业伤害没有引起护理人员的足够重视.因此,加强护理人员对针刺伤的认识与防护尤为迫切.     

黄花蒿HDS基因的克隆与功能分析

目的克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因(HDS),并进行生物信息学分析和功能互补分析研究。方法对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对,选取保守区域设计简并引物,利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因;利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,并用MEGA3.0中的临位相联法构建进化树。结果得到1条长2 324 bp的HDS cDNA序列,其ORF框长1 854 bp,编码617个氨基酸残基的蛋白;生物信息学分析显示,黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源;功能互补分析表明,AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara<>HDS中缺失的HDS功能,使突变菌株恢复生长,证明AaHDS具有典型的HDS基因功能。结论首次克隆获得黄花蒿HDS基因,为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础。     

川芎嗪,无环鸟苷联合治疗小儿毛细支气管炎50例疗效观察

毛细支气管炎主要是由呼吸道合胞病毒引起的毛细支气管炎症 ,多见于 6个月～ 2岁的婴幼儿 ,临床以喘憋、呼吸困难、紫绀为特征 ,发病急、病情重 ,如治疗不及时常引起严重的并发症 ,危及小儿生命。近两年来我们采用川芎嗪、无环鸟苷联合治疗小儿毛细支气管炎取得较好疗效 ,现报告如下。资料与方法1 　资料　 1 997年 3月— 1 999年 3月在我科住院治疗的病例。治疗组 50例 ,男性为 30例 ,女性为 2 0例 ,年龄 5个月～ 9个月的患儿 ,其中 6个月患儿 4 0例 ;对照组 4 5例 ,其中男性 2 5例 ,女性 2 0例 ,两组男女发病比例各占 60 %、4 0 % ,其年龄…     

难置性胃管的置管对策

目的：提出解决难置性胃管的对策。方法：使用F6-脑血管造影介入导丝保护套放入胃管内，增加胃管的硬度。结果：通过对16例脑外伤等意识障碍、无吞咽反射、球神经麻痹等难置性胃管病人进行临床应用，一次插管成功率达93．8％。结论：使用脑血管造影介入导丝保护套，增加胃管的硬度，可提高对难置性胃管病人的置管成功率。     

黄花蒿HDS基因的克隆与功能分析

目的 克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因（HDS）,并进行生物信息学分析和功能互补分析研究。方法 对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对,选取保守区域设计简并引物,利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因;利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,并用MEGA3.0中的临位相联法构建进化树。结果 得到1条长2 324 bp的HDS cDNA序列,其ORF框长1 854 bp,编码617个氨基酸残基的蛋白;生物信息学分析显示,黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源;功能互补分析表明,AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara＜＞HDS中缺失的HDS功能,使突变菌株恢复生长,证明AaHDS具有典型的HDS基因功能。结论 首次克隆获得黄花蒿HDS基因,为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础。     

电针足三里穴对不全性肠梗阻模型大鼠小肠Cajal间质细胞数目和网络结构的影响

目的 观察电针足三里穴对不全性肠梗阻模型大鼠小肠Cajal间质细胞(ICCs)数目和网络结构的影响,为进一步研究电针足三里穴对ICCs表型变化的影响奠定基础.方法 采用末端回肠套环法建立大鼠不全性肠梗阻模型,将大鼠随机分为:正常对照组、假手术组、未电针组、电针足三里穴(ST36)组(简称足三里组)、电针阴陵泉穴(GB34)组(简称阴陵泉组).造模成功后,足三里组和阴陵泉组给予电针干预治疗7d后,冰冻切片和全层铺片免疫细胞化学染色观察各组大鼠结肠ICCs的数目及分布变化情况.结果 未电针组与正常对照组和假手术组比较,小肠梗阻前端和梗阻处ICCs呈现不连续分布,网络结构被破坏,数目显著减少(P＜0.05).足三里组较未电针组,ICCs分布呈连续性,网络结构有所修复且数目显著增加(P＜0.05);而阴陵泉组与未电针组比较,变化不显著(P＞0.05).结论 采用末端回肠套环法能有效建立大鼠不全性肠梗阻模型,电针足三里穴能在一定程度上刺激ICCs再生和恢复成正常的细胞网络结构,从而促进回肠功能恢复.     

电针足三里穴对不全肠梗阻大鼠小肠Cajal间质细胞影响的免疫组化观察

目的初步观察电针足三里穴对不全肠梗阻大鼠小肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)数量变化的影响,为进一步探讨电针足三里穴对ICC表型变化的影响奠定基础。方法采用圈套法造成不全肠梗阻从而建立ICC数目减少的SD大鼠模型。取20只雌性大鼠采用简单随机法均分成正常对照组、不全肠梗阻30 d未电针足三里穴组(梗阻组)、不全肠梗组30 d电针足三里穴组(足三里组)和不全肠梗阻30 d电针阴陵泉穴组(阴陵泉组)4组。其中足三里组和阴陵泉组分别连续电针足三里穴或阴陵泉穴7 d后,取小肠组织采用免疫组化方法以及免疫荧光观察ICC数量的变化。结果正常对照组、足三里组、梗阻组及阴陵泉组ICC阳性面积分别为(102 051.00±16 969.38)μm2、(92 642.12±14 854.49)μm2、(45 221.33±6 230.20)μm2和(63 136.16±8 863.91)μm2,各组间差异有统计学意义(F=21.240,P<0.001),其中足三里组的ICC阳性面积较梗阻组高(P<0.05)。结论电针足三里穴可使不全肠梗阻大鼠小肠受损的ICC数量得到部分恢复,但其具体机理有待进一步研究。