ras-MAPK信号通路在骨肉瘤中的表达及其意义

目的探讨骨肉瘤中ras—MAPK信号传导通路的相互关系，观察它们在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法选取我科自2000年至2006年40例骨肉瘤手术标本，标本在切下后转入深低温保存。分别应用免疫组织化学和Westernblot检测在骨肉瘤和正常骨组织中的raS基因产物p21和MAPK信号通路标志蛋白p38的表达，并分析在ras p21不同表达的骨肉瘤组织中的p38的表达，探讨两者之间的相关性。结果免疫组织化学和蛋白检测结果显示，所有40例标本中ras p21、p38在骨肉瘤组织中的蛋白表达量与正常骨组织之间差异有统计学意义，骨肉瘤中的表达均明显高于正常骨（P〈0、05）；rasp21与p38的表达呈现明显的正相关：在ras p21含量较高的骨肉瘤组织中p38的含量较高，在ras p21含量较低的骨肉瘤组织中p38的含量较低（P〈0．05）。结论骨肉瘤中存在着ras—MAPK信号传导通路的表达，该传导通路的激活在骨肉瘤的发生、发展中起到一定作用。     

用斑点杂交法检测干扰素制剂中的EBV-DNA

类淋巴母细胞(Namalwa)干扰素(IFN)在理化特性和抗原性方面与人白细胞相似,是目前自然干扰素的主要来源之一,但Namalwa细胞是个瘤株,每个细胞中含1～2个EBV基因组,用这种细胞产生的干扰素制剂可能存在一定的致癌危险性。本文采用分子杂交法检测,报道如下。     

人鼻咽癌DNA与EBV-W片段探针的核酸分子杂交研究

20例人鼻咽部组织DNA,经酶切后,与EBV-W(Bam H Ⅰ)片段探针作核酸分子杂交。Southern印迹杂交发现鼻咽低分化癌组织DNA,经Bam H Ⅰ酶切后出现6.7、5.3、3.1、2.0Kb的4条杂交带,呈现了与W片段相同顺序的阳性区带,而鼻咽良性疾患和胎儿鼻咽组织DNA均为阴性,此结果提示在人鼻咽癌组织中,确实存在EB病毒基因组。     

EBV基因片段在鼻咽癌病人外周血白细胞DNA中存在的意义

14例鼻咽癌病人和18例正常人外周血的白细胞DNA各30μg,用限制性内切酶消化后,分别与探针EBV—W和K片段(BamHI)进行Southern印迹杂交,以了解这些病毒片段的存在状态。当用BamHI酶切后与EBV—W片段杂交时,出现杂交带的病例为52％(8/14);当与EBV—K片段杂交时,发现14例样品(100％)均在相当于6.1Kb处出现了深浅不一的杂交带。正常人的白细胞DNA与W和K片段杂交时,均未出现杂交带。 结果提示在人鼻咽癌病人外周血的白细胞DNA中,存在着EBV的基因片段,这对进一步研究EBV在癌变中的作用将是非常重要的。     

人鼻咽癌癌基因:Ha—ras

本文首次报道了对人鼻咽癌癌基因的研究结果。 人鼻咽癌活检组织DNA经二次体外转染N1H/3T3细胞及软琼脂生长,可得到典型生长的转化细胞灶,注射裸鼠后可形成肿瘤。转化细胞DNA经分子杂交可检测到人的顺序,提示人的转化顺序已进入小鼠纤维细胞内。 将上述具有肿瘤形成能力的30μg转化细胞DNA及其诱发肿瘤DNA分别经限制性内切酶ECoR1,BamHl和HindⅢ酶解后,与已知各种癌基因的~(32)p标记探针杂交,可发现它们具有癌基因Ha-ras的特性,经BamHl酶切后。Ha-ras呈现6.6kb大小的专一条带,经HpaⅡ酶切后呈现0.7kb的条带。其它癌基因如N-ras,ki-ras,Met等都呈阴性。在某些转化细胞中,还可看到Ha-ras杂交片段的长度呈现出多态性,可能反映了转化活性的强弱。     

前交叉韧带重建移植物的固定

移植物的固定是前交叉韧带重建中最重要的环节,也是最薄弱的环节.移植物与骨连接部位的主要生物力学特性是强度和钢度.固定方法有多种,可以因选择不同的移植物或手术方法而不同.界面螺钉固定是目前骨-髌腱-骨（bone-patelar tendon-bone,BPTB）移植物重建前交叉韧带的标准技术.关于肌腱移植物的最佳固定方法并无统一的观点.     

关节镜下重建前交叉韧带移植物的选择

关节镜下重建前交叉韧带的移植物有十几种可供选取,但目前尚无一种理想的移植物可以适应所有的患者。自体骨-髌腱-骨,腘绳肌腱,异体骨-髌腱-骨是关节镜医生最常选用的三种移植物。因受供端并发症的影响,自体骨-髌腱-骨的应用已呈减少趋势,而后两者因不存在供端并发症,创伤更小,也足以恢复膝关节的稳定性,应用呈增多趋势。     

EB病毒在人鼻咽癌组织中存在状态

30例人鼻咽癌组织DNA和1例人鼻咽癌组织移植于裸鼠的肿瘤DNA,分别经酶切后与EBV—“W”片段(BamHI)探针作分子杂交。以pstⅠ酶切后,发现人鼻咽癌组织DNA、移植瘤DNA及Raji细胞DNA中呈现几乎完全一致的杂交图谱类型。出现6.1、2.8、2.1和1.0kb的四条带。30例人鼻咽癌组织中有25例(80.3％)含有EB病毒基因组。对上述阳性的DNA样品,经用BamHI酶切后,再杂交出巩6.7。3.1和2.0kb几乎完全相似的三条特征性杂交带,而各1例正常胎鼻组织、肝癌和乳腺癌組织DNA均不能和EBV—“W”片段杂交。此结果提示在人鼻咽癌组织中存在BEV的基因组,从杂交结果存在一定的规律性来看,EBV致鼻咽癌可能存在着严格的条件控制。