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目的:构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库.方法:15只成年家猫随机分为正常对照组、视神经压迫4周组和视神经压迫8周组(n=5),压迫4周组和压迫8周组猫利用球囊植入法建立慢性视神经损伤模型.取各组动物视神经,TRIzol法提取总RNA,SMART技术合成cDNA,随后利用抑制消减杂交方法分离受压4周和8周视神经中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行文库扩增和蓝白斑筛选,随机挑取300个白色克隆进行菌落PCR鉴定.结果:菌落PCR扩增显示每个文库80%的克隆中均有200~800 bp的插入片段.结论:成功构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆慢性视神经损伤相关差异表达基因奠定了基础. 相似文献
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目的:探讨胼胝体胶质瘤的临床特点、显微手术可行性和术后综合治疗策略以改善预后。方法:回顾性分析1995年1月至2007年12月我院收治的82例胼胝体胶质瘤患者的临床特点、诊治经过及预后。术前根据影像特点选择最佳手术入路和切除的策略。术中应用神经导航8例,B超监测4例,超声吸引手术刀(CUSA) 辅助切除肿瘤5例。术后病理学证实为胶质瘤且级别Ⅱ级以上者行放化疗。化疗方案:替尼泊苷(VM-26)+甲环亚硝脲(Me-CCNU)和(或)替莫唑胺。放疗方案:根据病理级别和胶质瘤范围,以普通外照射为主要方式进行个体化设定。采用门诊、电话及邮件等方式进行随访。结果:82例患者临床表现为头痛、呕吐44例,癫16例,精神症状12例,记忆力减退10例,轻偏瘫20例。显微手术经纵裂入路44例,经皮质入路24例,经纵裂-皮质联合入路5例,活检7例,仅放化疗2例。术中见肿瘤主体位于胼胝体嘴部6例,膝部36例,体部30例,压部10例;镜下全切除45例,次全切除13例,部分切除15例,活检7例。病理证实为星形胶质细胞瘤48例,少突胶质细胞瘤11例,室管膜瘤2例,胶质母细胞瘤19例。获得随访61例,临床症状改善45例,无明显变化9例,加重7例;1年生存率为89%,2年71%,3年62%,5年39%,最长生存期140个月,中位生存时间47个月。COX生存分析提示年龄大、肿瘤病理级别高、切除不完全是预后较差的相关因素。结论:胼胝体胶质瘤是位置特殊的肿瘤,术前应充分了解肿瘤解剖位置、毗邻关系、血供等,正确的手术入路和策略可降低致残率并取得良好疗效,经纵裂入路是常用入路,神经导航、术中超声监测结合显微技术可提高肿瘤切除程度和减少损伤及改善预后。 相似文献
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ThemortalityofsevereTBIisstillhighatpresent.Howtodecreaseitisanimportanttaskthatmanyneurosurgicalresearchersarepayingcloseattentionto .1Acuteintracranialhematomaanddiffusecontusionandlacerationofthebrainwillleadtosuddenstepping upofintracranialpressureandcerebralherniaformationwhichareoneofthemostimportantcausesofdeathinpatientswithsevereTBI.SurgicaldecompressionisacommonmethodtreatingsevereTBI .Accordingtoreports ,SLTCexcelsroutinecraniotomyintreatingsevereTBI ,butdisputesstillexist .2… 相似文献
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SECs是肝脏内一种具有特殊形态结构和生理功能的内皮细胞,在门静脉高压形成和发展过程中起重要作用。SECs参与肝纤维化和肝窦毛细血管化,SECs形态和功能异常,导致肝内血管收缩和舒张因子之间平衡失调。肝内血管阻力增加,是门静脉高压形成和发展的重要因素之一。本文简要概述肝窦内皮细胞参与门静脉高压形成过程的机制。 相似文献
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目的探讨CBL教学模式在军队医学生临床教学中的优势、意义、难点及局限性,以期对后续临床教学提供经验借鉴。方法结合我科的教学实践经验,以"开放性颅脑战创伤清创"为例,在我校八年制学员中实施CBL讨论,评价CBL在军队医学生教学的实施方法以及效果。结果通过调查问卷结果显示,CBL课程更易调动医学生主动学习的积极性,且能培养军校医学生的军队实战思维能力,有助于军校医学生对神经外科学的学习,培养了其主动学习能力和团队合作精神。结论 CBL形式的神经外科授课方式教学效果较好,可以用于军校医学生教学。 相似文献
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步态是指行走、站立的运动形式与姿势,是一种基本的生物特性。步态障碍/异常是常见的临床症候群,主要表现为行走不稳、活动障碍、安全性降低及疼痛,在老年人群中较为常见,是造成生活质量下降的重要原因。步态障碍涉及神经科、骨科、老年科、康复科等相关学科。脊髓病变(如颈椎病)是引起步态障碍的常见原因,患者可表现为单纯的步态异常,亦可合并有其他神经脊髓症状。硬脊膜动静脉瘘(spinal dural arteriovenous fistula,SDAVF)是引起步态异常的少见原因。颈椎病合并SDAVF并不少见,但临床上报道较少,容易造成误诊、漏诊。我们遇到1例以单纯行走不稳为主要症状的颈椎病合并胸髓SDAVF患者,并对其相应的临床特点及治疗进行分析,以减少漏诊、误诊。 相似文献
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背景:胶质原纤维酸性蛋白在神经损伤的发生发展过程中具有重要作用.目的:对胶质纤维酸性蛋白进行基因克隆,构建原核表达质粒并加以鉴定.设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-09/1 1在上海市长征医院神经外科实验室完成.材料:中间载体pGEM-T Easy质粒购于Promega公司,原核表达质粒pGEX-4T-2由上海市长征医院神经外科实验室保存.方法:从人脑胶质瘤组织提取mRNA,采用反转录一聚合酶链反应的方法扩增胶质纤维酸性蛋白序列并表达,然后与载体pGEX-4T-2连接,转化宿主菌BL21构建重组质粒,诱导表达后纯化,Westem-blot鉴定.主要观察指标:总RNA鉴定结果,聚合酶链反应扩增产物分子质量的鉴定,重组表达载体的酶切鉴定,Western-blot鉴定.结果:抽提肿瘤组织总RNA后,电泳清晰可见rRNA28S、18S、5S 3条带.且总RNA的A260nm/A280nm值为1.903.聚合酶链反应结果显示,在约1 300 bp左右有一条特异性条带,与预期的胶质原纤维酸性蛋白基因大小一致.重组表达载体的酶切鉴定及测序结果与GenBank的胶质原纤维酸性蛋白序列一致,经Western-blot验证为目的蛋白.结论:用双酶切、DNA测序与Western.blot的方法证实原核表达载体构建成功. 相似文献
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目的 探讨脑脊液漏的规范化诊断和治疗方法以改善患者预后.方法 回顾性分析我院自1994年1月-2007年3月收治的75例脑脊液漏的病例资料,其中鼻漏51例,耳漏9例,切口或伤口漏15例;外伤性漏39例,手术后漏32例,自发性漏4例.23例通过体位休息和药物治疗治愈,16例通过脑脊液引流和(或)伤口局部处理获愈;手术治疗36例,其中开颅修补17例,颅外修补17例,分流5例(其中3例为修补术后再行分流).结果 治愈64例,好转10例,死亡1例.结论 规范化的诊断、治疗方案有助于提高脑脊液漏的治愈率,减少并发症. 相似文献
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背景:胶质原纤维酸性蛋白在神经损伤的发生发展过程中具有重要作用。
目的:对胶质纤维酸性蛋白进行基因克隆,构建原核表达质粒并加以鉴定。
设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-09/11在上海市长征医院神经外科实验室完成。
材料:中间载体pGEM-T Easy质粒购于Promega 公司,原核表达质粒pGEX-4T-2由上海市长征医院神经外科实验室保存。
方法:从人脑胶质瘤组织提取mRNA, 采用反转录-聚合酶链反应的方法扩增胶质纤维酸性蛋白序列并表达,然后与载体pGEX-4T-2连接,转化宿主菌BL21构建重组质粒,诱导表达后纯化,Western-blot鉴定。
主要观察指标:总RNA鉴定结果,聚合酶链反应扩增产物分子质量的鉴定,重组表达载体的酶切鉴定,Western-blot鉴定。
结果:抽提肿瘤组织总RNA后,电泳清晰可见rRNA28S、18S、5S 3条带。且总RNA的A260nm/A280 nm值为1.903。聚合酶链反应结果显示,在约1 300 bp左右有一条特异性条带,与预期的胶质原纤维酸性蛋白基因大小一致。重组表达载体的酶切鉴定及测序结果与GenBank的胶质原纤维酸性蛋白序列一致,经Western-blot验证为目的蛋白。
结论:用双酶切、DNA测序与Western-blot的方法证实原核表达载体构建成功。 相似文献
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目的 观察猫视神经慢性受压后视网膜神经节细胞(RGCs)的动态变化.方法 30只成年家猫按随机数字表法等分为正常对照组、假手术组、压迫1周组、压迫2周组、压迫4周组和压迫8周组,每组5只.利用球囊植入法建立慢性视神经损伤模型.所有动物在术前2周用Dil逆行标记RGCs.取各组动物视网膜进行光镜、电镜观察,并在荧光显微镜下对RGCs进行计数.结果 正常成年猫视网膜HE染色可见三层细胞核,各层间界限较为清楚,从玻璃体腔向巩膜依次为神经节细胞层、双极细胞层和感光细胞层;视神经慢性受压4周时视网膜变化仍不明显:受压8周时可见RGCs核明显稀疏,大而染色浅的细胞核基本消失,视网膜总厚度变薄,胶质细胞增生.电镜下正常猫RGCs核呈卵圆形、核大、核质均匀,有时可见核仁,胞浆占细胞比例小,但细胞器丰富;受压2周时视网膜无明显改变;受压4周和8周时可见RGCs胞浆成分疏松、内质网扩张、线粒体肿胀、质膜下出现空泡、核膜皱缩内陷、胞浆空化、染色质边聚.正常组DiI逆行标记的RGCs的密度在406~527个/mm2之间,平均为(465±38)个/mm2,中央区密度高于周边区;视神经受压后前4周RGCs数量无明显改变;受压8周时RGCs数量有显著下降,平均密度为(293±32)个/mm2.下降约37%.结论 视神经慢性受压后RCJCs将出现延迟的变性.为视神经受压后RGCs的保护提供了时机. 相似文献