利用CRISPR/Cas9系统构建HeLa细胞Cdc25C基因敲除稳定细胞株

目的 使用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除人类宫颈癌细胞HeLa中的细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cell division cycle 25 homolog C,Cdc25C)基因,构建Cdc25C基因稳定敲除细胞株.方法 根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特异性识别Cdc25C基因第一外显子相关序列的上下游小向导RNA(small guide RNA,sgRNA),构建真核重组表达质粒.测序鉴定后,将重组质粒转染至HeLa细胞中,用嘌呤霉素(puromycin)抗性筛选稳定敲除Cdc25C基因细胞株,再用免疫印迹方法鉴定细胞Cdc25C敲除效果.最后用流式细胞仪检测基因敲除对细胞周期的影响.结果 筛选出稳定敲除Cdc25C基因细胞株,且Cdc25C敲除显著影响G2/M期进程.结论 利用CRISPR/Cas9技术成功获得了内源Cdc25C基因敲除细胞株,为研究Cdc25C在细胞周期进程的功能以及相关癌症的发生奠定了基础.     

新型冠状病毒Omicron变异株感染患者血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶水平与年龄的相关性

目的 探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)Omicron变异株感染患者血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶与年龄的相关性。方法 选取2022年10月16日-12月31日联勤保障部队第九八八医院确诊的226例COVID-19 Omicron变异株感染患者为感染组,以同期住院同科室有感染征象但未感染Omicron变异株的新冠核酸阴性患者247例为对照组,分别收集两组患者的临床资料和实验室检测指标。对两组患者从性别、年龄分布等临床特点及实验室指标肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)进行分析。结果 两组患者性别构成和年龄分布比较差异均无统计学意义;与对照组比较,感染组总人群的肌酸激酶CK水平及异常增高比例均升高(P<0.05),其中CK水平升高以老年人(≥60岁)、刚成年(16岁～)以及幼儿(1岁～)最为显著(P<0.05),LDH水平增高及异常增高比例以幼儿(1岁～)最为显著(P<0.05)。结论 COVID-19 Omicron感染患者的肌酸激酶CK升高以成年患者为主,而在婴儿中LDH升高更为常见,上述结果可为针对性制定治疗方案提供参考。