美金刚对过氧化氢诱导多巴胺能神经元氧化应激损伤的保护作用

目的探讨美金刚对过氧化氢(H2O2)诱导的多巴胺能神经元氧化应激损伤的保护作用。方法用400μmol/L H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y损伤建立多巴胺能神经元氧化应激损伤模型,随机分为美金刚10、20、30μmol/L组和空白对照组,分别加入相应试剂(空白对照组加入等体积PBS);倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,比色法测定LDH释放率。结果 10、20、30μmol/L美金刚干预24 h后,SH-SY5Y细胞的吸光度值(A570)分别为0.936 5±0.033 2、0.974 9±0.030 0和0.948 7±0.033 6,空白对照组为0.924 7±0.039 8;组间比较无统计学差异(P=0.160)。经10、20、30μmol/L美金刚预处理2 h后,SH-SY5Y细胞的存活率分别为(59.92±3.64)%、(65.40±5.07)%和(62.63±5.01)%,与H2O2处理组比较有统计学差异(P<0.05或<0.01)。此外,10、20、30μmol/L美金刚预处理组SH-SY5Y细胞的LDH释放率分别为(38.70±7.88)%、(34.10±6.75)%、(35.58±8.68)%,与H2O2处理组比较均有统计学差异(P<0.05或<0.01)。结论美金刚对H2O2诱导的多巴胺能神经元氧化应激损伤具有保护作用。     

乙醇对人神经母细胞瘤细胞凋亡和半胱氨酸蛋白酶-3活性的影响

目的 探讨乙醇对入神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞调亡和半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3活性的影响.方法 使用不同浓度乙醇(50、100、200、400和800 mmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h,噻唑蓝比色法检测乙醇对细胞增殖的抑制作用;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态学变化;比色法检测细胞caspase-3相对活性.结果 与空白对照组比较,乙醇50 mmol/L组、100 mmol/L组、200 mmol/L组、400 mmoVL组和800mmol/L组的吸光度值(A570)显著降低(P＜0.05 ～0.01),SH-SY5Y细胞凋亡率及caspase-3活性显著增高(均P＜0.01);各组间比较,差异亦有统计学意义(均P＜0.001).空白对照组SH-SY5Y细胞核较大,染色质均匀;50 mmol/L乙醇组细胞核有少许固缩,少量染色质边聚、浓缩;100 mmol/L乙醇组致密的颗粒状或条状强蓝色荧光的细胞核轻度增多;200 mmol/L乙醇组细胞核固缩增加,染色质边聚、浓染;400 mmoL/L乙醇组细胞核固缩明显增加,染色质边聚、致密浓染,出现核碎裂和凋亡小体;800 mmol/L乙醇组大量细胞凋亡,碎裂的细胞核增多,出现较多的凋亡小体.结论 乙醇呈剂量依赖性诱导SH-SY5Y细胞凋亡,其机制可能与caspase-3的活性增高有关.     

丰富环境对局灶性脑梗死大鼠旷场和水迷宫行为学及Nogo-A蛋白表达的影响

目的探讨丰富环境对局灶性脑梗死大鼠运动功能、学习记忆及Nogo-A蛋白表达的影响。方法手术组予线栓法制作SD大鼠右侧大脑中动脉缺血模型,术后24 h随机分为丰富环境组和标准环境组,分别饲养于普通鼠笼及丰富环境鼠笼;另设假手术组,不线栓大脑中动脉,其余步骤与手术组相同。各组分别在术后7、14、28 d分别用旷场实验、水迷宫实验进行行为学分析。术后28 d行为学分析后取脑,行免疫组化观察各组Nogo-A阳性细胞表达情况。结果术后28 d丰富环境组的运动总路程[(4 360±854)cm]与标准环境组[(2 362±694)cm]比较,差异有统计学意义(P<0.001)。定位航行实验,丰富环境组在术后14、28 d的潜伏期[分别为(33.0±5.8)s、(24.5±3.1)s]与标准环境组[分别为(46.6±6.0)s、(35.6±4.7)s]比较,差异有统计学意义(P<0.001)。空间探索实验,丰富环境组在术后28 d的穿越平台次数[(6.6±1.9)次]与标准环境组[(3.2±1.5)次]比较,差异有统计学意义(P<0.001)。丰富环境组梗死灶周围Nogo-A阳性细胞数(86.7±6.7)与标准环境组(117.5±8.3)比较,差异有统计学意义(P<0.001)。结论丰富环境能促进脑梗死大鼠的运动能力、记忆力的恢复。丰富环境能降低脑梗死大鼠梗死灶周围Nogo-A蛋白表达,从而促进神经再生。     

转笼康复训练对局灶性脑梗死大鼠旷场行为学和梗死灶周围Nogo-A表达的影响

目的 研究转笼康复训练对局灶性脑梗死大鼠旷场行为学和脑梗死灶周围皮质Nogo-A表达的影响。方法 将64只采用Longa颈外动脉线栓法制备的大脑中动脉闭塞SD大鼠随机分为康复训练组和造模对照组,每组32只。康复训练组大鼠每天进行滚筒训练40min;造模对照组置于普通笼中自由活动。康复训练组、造模对照组分别于造模后7,14,21和28d4个时间点随机选取8只大鼠进行旷场实验行为学分析后处死,取脑组织进行免疫组织化学方法观察脑梗死灶周围皮质Nogo-A的表达。结果 康复训练组术后21d,28d旷场运动路程与造模对照组同时点相比差异具有统计学意义(P<0.05)。术后14d,21d,28d康复训练组大鼠脑梗死灶周围皮质Nogo-A阳性细胞数与造模对照组同时点比较,差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论 转笼康复训练能降低大鼠脑梗死灶周围Nogo-A的表达,减少其对神经轴突的抑制,促进脑梗死后的神经再生,增加中枢神经系统的修复能力。     

微创锥颅置管引流术中硬通道与脑动脉血管网关系的探讨

目的 探讨应用硬通道微创锥颅置管术治疗脑出血时，穿刺路径与脑动脉血管网构筑的关系。方法 本研究对2012年4月至2014年3月在福建省晋江市医院神经内科住院的60例脑出血患者行简易立体定向电驱动锥颅置管术治疗，术后待血肿引流量＞90%后，拔管前行脑血管造影成像（CTA），以了解穿刺针及血肿穿刺路径与脑动脉血管网构筑的关系。结果 对所有脑出血患者在微创锥颅置管术后CTA分析发现，穿刺针在穿刺血肿靶点的路径中均可安全滑过相关颅脑动脉，标点穿刺针位置准确；未见置管及引流过程中穿刺针明显损伤，相关重要脑动脉血管引流效果好。患者术后恢复快，预后良好率达到61.67%。结论 硬通道微创锥颅置管术及术后引流过程中，穿刺针不易损伤脑动脉血管网，穿刺路径较安全可靠。