人胰腺癌干细胞差异性基因的表达

目的 分选、鉴定人胰腺癌干细胞,运用基因芯片技术分析其差异性基因的表达.方法 运用流式分选技术分选胰腺癌干细胞(CD24+CD44+ESA+),NOD/SCID鼠移植瘤试验进行肿瘤干细胞特性鉴定.采用Affymetrix U133 plus2.0人类全基因组表达谱芯片对胰腺癌干细胞和非干细胞进行差异基因筛选.结果 分选得到人胰腺癌CD24+CD44+ESA+亚群细胞,占所有细胞的0.8%;5×103个CD24+CD44+ESA+细胞就能成瘤(2/4),而阴性细胞1×105才能成瘤(1/4);CD24+CD44+ESA+具有一定的自我更新和分化能力.基因芯片杂交获得6553(11.99%)条差异基因,胰腺癌干细胞中5255(9.61%)条上调表达,1298(2.37%)条下调表达.其中差异基因涉及细胞凋亡、细胞周期、代谢、细胞线粒体结构和耐药等多个方面.结论 胰腺癌于细胞具有自身特征性基因表达谱,为进一步从干细胞层面研究胰腺癌发病机制及靶向治疗奠定基础.     

人胰腺癌干细胞差异性基因的表达

目的 分选、鉴定人胰腺癌干细胞,运用基因芯片技术分析其差异性基因的表达.方法 运用流式分选技术分选胰腺癌干细胞(CD24+CD44+ESA+),NOD/SCID鼠移植瘤试验进行肿瘤干细胞特性鉴定.采用Affymetrix U133 plus2.0人类全基因组表达谱芯片对胰腺癌干细胞和非干细胞进行差异基因筛选.结果 分选得到人胰腺癌CD24+CD44+ESA+亚群细胞,占所有细胞的0.8%;5×103个CD24+CD44+ESA+细胞就能成瘤(2/4),而阴性细胞1×105才能成瘤(1/4);CD24+CD44+ESA+具有一定的自我更新和分化能力.基因芯片杂交获得6553(11.99%)条差异基因,胰腺癌干细胞中5255(9.61%)条上调表达,1298(2.37%)条下调表达.其中差异基因涉及细胞凋亡、细胞周期、代谢、细胞线粒体结构和耐药等多个方面.结论 胰腺癌于细胞具有自身特征性基因表达谱,为进一步从干细胞层面研究胰腺癌发病机制及靶向治疗奠定基础.     

IFN-γ在沙眼衣原体呼吸道感染中免疫防御机制的探讨

目的:检测与IFN-γ作用相关的酶吲哚胺2,3二氧化酶(IDO)、诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)和NADPH氧化酶(ox)gp91在沙眼衣原体呼吸道感染中的表达及与机体防御的关系,探讨衣原体感染中IFN-γ免疫防御作用的机制.方法:用沙眼衣原体小鼠肺炎株(MoPn)通过鼻腔感染C57BL/6(H-2b)小鼠,用过氧化物酶连接的鼠抗衣原体脂多糖单抗染色HeLa 229细胞,检测衣原体在肺组织的生长;用RT-PCR检测衣原体感染后第7及14天小鼠肺组织IFN-γ、IDO、iNOS和gp91NADPH ox mRNA表达.结果:MoPn呼吸道感染后小鼠肺组织匀浆衣原体活性测定,于感染后第2天,HeLa 229细胞内可见有衣原体包涵体生长,IFU值增高,于感染后第7天IFU达最高水平,以后逐渐下降,至感染后21天基本恢复到基线水平.与未感染的对照组比较,Th1细胞因子IFN-γ于感染后第7天表达显著增高,感染后14天有所降低,但仍维持较高水平;同时衣原体感染可显著诱导与IFN-γ作用相关的三种酶IDO、iNOS和gp91 NADPH ox在小鼠肺组织的表达,感染后第7及14天,IDO,iNOS及gp91 NADPH ox的表达与对照组比较均有显著差异,其中IDO和gp91 NADPH ox于感染后第7天mRNA表达增高显著(P＜0.01),14天略有下降(P＜0.05).结论:衣原体呼吸道感染诱导Th1细胞因子IFN-γ mRNA高表达,参与宿主对衣原体的清除及机体免疫防御,此作用可能与其相应的酶IDO、iNOS和gp91 NADPH ox表达增高有关.     

灵芝对两个品系果蝇生长发育和寿命的影响比较研究

在以果蝇作寿命试验时,人们注意到不同品系果蝇的寿命存在明显差异,但同一种药物作用于不同品系果蝇后其效果如何,则很少见报导。探讨这一问题对于我们合理选择果蝇品系和正确评价实验结果都是重要的。在寿命试验中,究竟是以幼虫发育时间     

宿主的遗传背景对呼吸道感染沙眼衣原体后Treg产生的影响

目的 探讨宿主的遗传背景对呼吸道感染沙眼衣原体后调节性T细胞(Treg)产生的影响.方法 对衣原体感染具有明显易感性差异的C57 BL/6(C57)和C3H/HeN(C3H)小鼠鼻腔吸入1×103 IFU沙眼衣原体小鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum,Cm),于感染后不同天数处死小鼠.利用细胞内细胞因子染色技术检测小鼠脾脏单个核细胞CD4+ CD25+T细胞、Foxp3+ CD4+ CD25+T细胞百分率,利用RT-PCR技术检测小鼠肺组织Treg细胞分泌的相关细胞因子IL-10和IL-2的mRNA表达水平,并比较Cm呼吸道感染不同时期C57和C3H小鼠Treg免疫应答水平的差异.结果 Cm感染在两组小鼠均诱导较高水平的CD4+ CD25+T细胞、Foxp3+ CD4+ CD25+T细胞产生及IL-10、IL-2mRNA表达.感染后第3天和第7天,高易感性的C3H小鼠脾脏CD4+ CD25+T细胞、Foxp3+ CD4+CD25+T细胞扩增水平,以及肺组织细胞因子IL-2 mRNA的表达水平均高于C57小鼠,感染后第14天,C3H小鼠IL-10 mRNA表达水平明显高于C57小鼠.结论 衣原体呼吸道感染在高易感性的C3H小鼠诱导高水平的Treg的增殖及Treg相关细胞因子IL-10、IL-2的表达,从而对衣原体特异的Th1免疫应答抑制作用增强,在小鼠衣原体呼吸道感染易感性差异中发挥重要作用.     

24例自身免疫性肝病临床及病理分析

目的比较自身免疫性肝炎（AIH）、原发性胆汁性肝硬化（PBC）、原发性硬化性胆管炎（PSC）及自身免疫重叠综合征（OLS）的临床、病理特点，帮助临床及时诊断和治疗。方法分析同济医院消化内科2002年10月至2005年5月间收治的24例自身免疫性肝病（ALD）患者（AIH 13例，PBC 7例，PSC 1例，AIH/PBC重叠综合征3例）的临床资料，对其临床表现、实验室检查及组织学特点等进行比较。结果24例ALD患者男女之比为1∶5，平均年龄48.8岁。13例AIH以丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、IgG升高为主；7例PBC以碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）、IgM升高为主；3例AIH/PBC重叠综合征兼有以上特点。AIH患者抗核抗体（ANA）均为阳性，PBC患者抗线粒体抗体（AMA-M2）阳性，AIH/PBC重叠综合征同时检测到ANA、AMA。AIH主要表现为界面性肝炎，PBC均可见明显胆管周围炎和小胆管损伤。结论ALD临床表现复杂多样但也有各自特点。肝功能、血清抗体和免疫球蛋白检测有助于ALD的诊断与鉴别诊断。病理学检查的诊断价值有一定局限性。     

甲状腺功能减退症成人患者血脂和心肌酶的变化

目的观察成人甲状腺功能减退症（甲减）患者的血脂和心肌酶变化。方法回顾26例成人甲减患者血清生化指标,重点对其中18例血脂和心肌酶明显升高者进行分析。结果18例甲减患者血脂和心肌酶明显高于正常值,经左旋甲状腺素片治疗后甲状腺功能恢复,临床症状缓解,血脂和心肌酶逐步恢复。结论甲减患者的血脂和心肌酶升高随其甲状腺功能恢复而渐趋正常,可据此与心血管疾病相鉴别。     

功能性消化不良与心理因素关系研究

目的研究功能性消化不良与心理因素的关系，探讨以认知疗法为主的心理治疗在功能性消化不良治疗中的作用。方法对120例FD患者，按设计随机分成治疗组和对照组2组进行治疗，2组同时实施心理治疗，并观察其疗效。结果2组治疗结束后其疗效基本一致。经统计学处理无显著差异（P〉0．05）。结论功能性消化不良的发病与心理因素有密切关系，心理治理对功能性消化不良有显著作用。     

16例脾结核临床分析

目的 探讨脾结核的诊断和治疗措施.方法 对16例脾结核患者的临床资料进行回顾性分析.结果 16例病人中表现为发热、盗汗、腹胀、腹痛和脾肿大分别为11例次(68.8%)、6例次(37.5%)、8例次(50%)、10例次(62.5%)和13例次(81.2%).腹部B超及CT检查10例有脾内占位性病变,3例脾内有钙化灶,另3例为脾弥漫性肿大.手术及病理诊断脾结核9例,3例因脾内有钙化灶诊断脾结核,另4例诊断性抗结核治疗有效而诊断脾结核.16例病人中有8例合并脾外结核.所有病人都经过半年以上的抗结核治疗,经随访预后良好.结论 脾结核诊断主要依据睥病理学检查及诊断性治疗,系统性抗结核治疗及选择性手术治疗是脾结核的主要有效治疗手段.     

Expression of metadherin/AEG-1 gene is positively related to orientation chemotaxis and adhesion of human hepatocellular carcinoma cell lines of different metastatic potentials

Metastasis contributes to the poor prognosis of hepatocellular carcinoma (HCC). However, the mechanism through which a primary HCC cell develops into a metastatic phenotype is not well understood. The purpose of this study was to examine the correlation between metadherin (MTDH)/ astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) expression in HCC cell lines of different metastatic potentials and such metastatic phenotypes as orientation chemotaxis and adhesion. MTDH/AEG-1 expression was detected by RT-PCR and western blotting in HCC cell lines (HepG2, Huh7, Sk-HEP-1, MHCC-97H). Distribution of MTDH/AEG-1 was observed by immunofluorescence staining and confocal laser scanning microscopy. The abilities of orientation chemotaxis and adhesion and the index of interaction between HCC cell lines and microvascular endothelial cell lines (MVECs, including HUVECs and HPMECs) were measured by chemotaxis assay and adhesion assay, respectively. The results showed that MTDH/AEG-1 protein expression was significantly higher in high metastatic potential cancer cell lines (Sk-HEP-1, MHCC-97H ) than in low metastatic potential cell lines (HepG2, Huh7) (P<0.05). The MTDH/AEG-1 protein was localized in the perinuclear region of HCC cells. Furthermore, the abilities of orientation chemotaxis and adhesion of HCC cells to HPMECs were increased as compared with those of HCC cells to HUVECs (P<0.05). The abilities of orientation chemotaxis and adhesion were much stronger in Sk-HEP-1 and MHCC-97H cells with MTDH/AEG-1 highly expressed than in HepG2 and Huh7 cells with MTDH/AEG-1 lowly expressed (P<0.05). These results suggested that the expression of MTDH/AEG-1 gene in HCC cell lines of different metastatic potentials was closely positively related to the abilities of orientation chemotaxis and adhesion of HCC cells. It was deduced that MTDH/AEG-1 might play a pivotal role in the lung-specific metastasis of HCC, which may be medi-ated through orientation chemotaxis and adhesion abilities of HCC cells. MTDH/AEG-1 may serve as a potential therapeutic target for HCC.