实验雪貂饲育笼的设计与应用

目的设计开发一种实用的实验雪貂饲育笼具。方法根据雪貂的生物学特性并参考有关实验动物笼器具标准进行设计。结果该笼舍完全能适用于普通环境条件下的饲养和繁殖。结论该笼具操作和使用方便,具有一定的应用和推广前景。     

云南地区恒河猴线粒体DNA控制区遗传多态性研究

目的 从分子水平探讨云南地区恒河猴遗传多样性,为今后开展恒河猴遗传资源的保护及合理利用提供借鉴和背景资料.方法 采用PCR直接测序法测定云南地区恒河猴96份样品的线粒体DNA控制区全序列,用Mege 4.0和DNA SP软件对变异位点数、简约信息位点数、单倍型、单倍型多样度、核苷酸多样度等遗传信息进行分析,基于邻接法(neighbor-joining,NJ)和最小进化法(minimum-evolution,ME)构建系统发生树.结果 在96份样品中,共检测出了149个多态性位点,定义了46种单倍型,单倍型多样度(Hd)为0.968±0.007,核苷酸多样度(Pi)为0.020.结论 云南地区恒河猴存在着较丰富的遗传多态性.     

实验性2型糖尿病恒河猴模型的构建及其部分临床特征分析

目的构建2型糖尿病(T2DM)恒河猴模型,使之成为研究人类T2DM的有效替身。方法以高糖高脂饮食为基础,在出现高脂血症和肥胖状态后注射35 mg/kg的链脲佐菌素(STZ),测定体重指数、血脂、空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数、尿糖和口服葡萄糖耐量试验等,分析其部分临床特征。结果 T2DM模型组体重指数(BMI)大于35达到重度肥胖,有高脂血症的特点,空腹血糖、胰岛素和胰岛素抵抗指数显著增高(P<0.01),尿糖检测呈阳性,葡萄糖耐量受损并且空腹血糖高于7 mmol/L、2 h的血糖水平高于11.1 mmol/L,胰岛有轻度损伤和病变。结论通过部分临床特征分析,T2DM模型组具有典型的T2DM临床特征,可成为T2DM研究的有效模型。     

脊髓法猴体神经毒力试验对恒河猴肠道菌群的影响研究

目的 探讨脊髓注射法猴体神经毒力试验对肠道菌群的影响。方法 用Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗进行脊髓法猴体神经毒力试验,收集3只神经毒力试验恒河猴及3只健康恒河猴粪便样本,提取细菌总DNA,采用新一代高通量测序技术对16S rRNA基因的V3~V4高变区测序并进行物种分类、丰度及多样性分析。结果 神经毒力试验对动物脊髓造成不同程度的病理损伤;试验组粪便微生物多样性降低,门水平上两组菌群无差异,优势菌群主要为硬壁菌门、变形菌门及拟杆菌门,占比总和超过95%;属水平上有普雷沃菌属（Prevotella）、芽殖菌属（Gemmiger）等11种菌属存在显著差异（P<0.05）。结论 脊髓注射法猴体神经毒力试验对动物造成脊髓损伤并引起粪便内乳酸菌属（Lactobacillus）、普雷沃菌属（Prevotella）及芽殖菌属（Gemmiger）等菌属组成变化,为建立非人灵长类动物脊髓损伤模型提供理论依据。     

戊型肝炎病毒与ING5相互作用的研究

目的 构建ING5基因真核表达载体和ING5荧光素酶载体,将pMIR-Report-ING5荧光素酶质粒与PUC-HEV质粒共转染293T细胞后,验证HEV与ING5之间相互关系。方法 通过提取293T细胞总RNA,RT-PCR法扩增ING5基因序列,并克隆到真核表达载体PGC3.1 (+)上。利用脂质体转染法将PGC-ING5真核表达质粒转染HepG2细胞后,通过 Western Blot法检测ING5表达情况;将pMIR-Report-ING5荧光素酶质粒和PUC-HEV质粒共转染293T细胞进一步探究ING5与HEV之间相互作用关系。结果 经双酶切和测序鉴定真核表达质粒PGC-ING5构建成功,ING5基因在HepG2细胞中成功表达;将pMIR-Report-ING5荧光素酶质粒与PUC-HEV质粒共转染293T细胞后,发现HEV明显抑制239T细胞中pMIR-Report-ING5荧光素酶的活性。结论 成功构建了PGC-ING5真核表达载体和pMIR-Report-ING5荧光素酶载体,并且证明HEV与ING5之间具有相互作用。     

云南省猪戊型肝炎病毒全基因组扩增及进化分析

目的 对猪戊型肝炎病毒全长基因组进行扩增,分析其进化关系,为HEV的感染性克隆研究奠定基础。方法 利用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR)和RACE技术对猪粪便中HEV样品进行全基因组扩增,利用DNAStar和MEGA4.0软件进行同源性比较和进化树分析。结果 RT-nPCR方法扩增出HEV的 5段目的基因序列和RACE技术扩增出HEV的 5'和3'端,序列比对结果正确,HEV全长扩增成功。同源性分析显示其与新疆株(GU119961)同源性较高(96.1%)。系统进化树显示该病毒属于基因4型h亚型猪HEV。结论 HEV全基因组序列扩增成功,为深入研究HEV奠定基础。     

人工繁育幼年猕猴生长指标的研究

目的测定分析人工繁育幼年猕猴的生长指标,建立人工繁育猕猴生物学特性数据。方法对20只幼年猕猴(雌雄性各10只)测量其3月龄、12月龄和24月龄体重、躯干长、后肢全长、前肢全长和尾长。结果从3～24月龄猕猴的体重绝对增长率呈逐渐上升趋势,相对生长率呈逐渐下降趋势;从初生～3月龄为体重增长最快时期;从3～24月龄前肢全长生长速度较后肢全长慢些,躯干长生长速度较前肢全长和后肢全长慢些。在所测定的3月龄、12月龄和24月龄中,公猴体重、后肢全长、前肢全长和尾长均大于母猴,但差异无统计学意义。结论3月龄、12月龄、24月龄雌雄猕猴体重差异无统计学意义(P>0.05),雌雄猕猴躯干长、后肢全长、前肢全长和尾长差异无统计学意义(P>0.05)。     

红外线耳温计与水银体温计测量猕猴体温的比较

目的 对红外线耳温计与水银体温计测量猕猴体温差异性进行比较,为临床、动物实验等开展体温测量提供一种简单、快速、损伤小的方法.方法 选人工繁育3～4岁猕猴共80只,分为麻醉组和非麻醉组,同时采用两种测量仪对猕猴进行体温测量,比较二者之间的差异.结果 麻醉组:在性别上两种测量仪器所测量的结果都无差异(P＞0.05),耳温比直肠温低1.49±0.55℃,耳温与直肠温均存在极显著差异(P＜0.01);非麻醉组:在性别上两种测量仪器所测量的结果都无差异(P＞0.05),耳温比直肠温低2.19±0.53℃,耳温与直肠温均存在极显著差异(P＜0.01);麻醉组与非麻醉组比较,耳温不存在差异(P＞0.05),直肠温存在极显著性差异(P＜0.01).结论 红外线耳温计所测量的温度明显低于水银体温计测量的直肠温度,在麻醉状态下实际温度应为所测耳温加1.49℃,而在非麻醉状态下加2.19℃.     

PCR方法检测猕猴奇异变形杆菌

目的 利用PCR检测猕猴奇异变形杆菌,为该病菌的鉴定、临床诊断、治疗及流行病学调查等提供参考。方法 从猕猴粪便中分离奇异变形杆菌并进行鉴定,纯培养后提取基因组DNA,经PCR扩增、凝胶电泳检测、基因序列测序后,序列提交BLAST比对分析。用该菌株检验PCR方法的特异性和敏感度,利用PCR方法和传统分离培养法同时对80只猕猴进行检测。结果 在分离得到的猕猴奇异变形杆菌中扩增出225 bp的基因序列(GenBank登录号为JQ040548,其与GenBank中奇异变形杆菌AM942759的同源性为98.2%),而其它5株非奇异变形杆菌的PCR扩增结果为阴性,表现出极好的特异性。纯化培养的奇异变形杆菌利用PCR方法检测灵敏性,其敏感度达80 cfu/mL。在80只猕猴中,共检测出了2份阳性样品,阳性率为2.5%,检测结果与传统培养方法一致。结论 该PCR方法能迅速、准确地检测猕猴奇异变形杆菌,在临床具有良好的实用性。