微信平台结合CBL教学法在老年心血管病学临床教学中的应用效果分析

目的 分析微信平台结合基于案例学习（case-based learning,CBL）教学法在老年心血管病学教学中的应用效果。 方法 纳入在空军军医大学西京医院老年病科见习的医学本科生32人,将其随机分为传统教学法组（16人）和微信平台结合CBL教学法组（16人）。在教学结束时,比较两组学生的理论考试分数和临床实践能力考试分数,并以问卷形式调查两组学生对所接受教学法的满意度。 结果 较传统教学法组,微信平台联合CBL教学法组学生的理论考试分数和临床实践能力考试分数均显著提高（均P<0.05）。与传统教学法组相比,微信平台联合CBL教学法组的学生对教学模式的满意度也显著提高（均P<0.05）。 结论 微信平台联合CBL教学法能显著提高老年心血管病学的临床教学效果并增加学生满意度。     

心室负荷卸载防治心肌缺血再灌注损伤的应用及机制

目前临床上针对心肌缺血再灌注（myocardial ischemia-reperfusion,MI/R）损伤仍缺乏有效的防治策略。一些临床及动物实验发现，在再灌注之前经皮植入心室辅助装置（percutaneous ventricular assistance device,pVAD）可以减少心室收缩-舒张负荷并减少心室做功与耗氧量，实现心室负荷有效卸载。这种操作可以减少MI/R损伤相关的心肌梗死面积扩大并限制纤维疤痕的形成。因此，pVAD植入有望成为防治MI/R损伤、改善心肌梗死患者预后的重要治疗手段。本文就心室负荷卸载防治MI/R损伤的应用及机制进行综述。     

GDF11逆转巨噬细胞胆固醇堆积的分子机制研究

目的 观察生长转化因子（GDF）11在巨噬细胞泡沫化中的作用并探讨其可能的分子机制。方法 以不同浓度氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)处理RAW264.7细胞,将75 μg/ml oxLDL与不同浓度GDF11共处理过夜,采用荧光染色观察巨噬细胞脂质堆积情况。提取总蛋白或是总RNA,采用Western blot方法检测oxLDL对巨噬细胞GDF11表达的作用,采用实时荧光定量PCR检测GDF11、ABCA1、ABCG1、CD36、IL-1、IL-6及MMP9 mRNA的表达。结果 oxLDL可以显著诱导巨噬细胞胆固醇堆积并抑制巨噬细胞GDF11表达（P<0.05）,外源给予GDF11可以抑制oxLDL引起的巨噬细胞胆固醇堆积（P<0.05）;oxLDL孵育能够有效诱导CD36、IL-1、IL-6和MMP9 mRNA表达并抑制ABCA1、ABCG1 mRNA表达（P<0.05）,外源给予GDF11刺激可以有效逆转oxLDL对于CD36、IL-1、IL-6和MMP9 mRNA的诱导和对于ABCA1、ABCG1 mRNA的抑制（P<0.05）。结论 GDF11可以有效抑制巨噬细胞泡沫化进程,与其有效逆转oxLDL对于CD36、IL-1、IL-6和MMP9 mRNA的诱导和对于ABCA1、ABCG1 mRNA的抑制相关。     

支链氨基酸氨基转移酶1通过P53信号调节脂肪间充质干细胞存活

目的 研究支链氨基酸氨基转移酶1(branched-chain-amino-acid aminotransferase 1,BCAT1)调节间充质干细胞存活的作用并探讨机制。 方法 从雄性Sprague Dawley大鼠附睾白色脂肪中分离脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）。腺病毒转染ADSCs中分别过表达或敲低BCAT1表达后给予过氧化氢（hydrogen dioxide,H₂O₂）刺激诱导ADSCs凋亡。利用CCK-8细胞活力分析、cleaved caspase-3表达及TUNEL染色评估ADSCs凋亡。利用P53特异性抑制剂PFT-1α探讨P53信号在BCAT1调节ADSCs生存的分子机制。 结果 BCAT1而不是BCAT2是ADSCs的主要表达亚型。H₂O₂刺激诱导ADSCs凋亡时BCAT1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。使用shRNA敲低BCAT1表达加重而过表达BCAT1显著减轻H₂O₂诱导的ADSCs凋亡（均P<0.01）。敲低BCAT1导致H₂O₂刺激的ADSCs中P53下游靶基因表达水平显著增高,提示P53信号活化（均P<0.01）。PFT-1α可以逆转BCAT1敲低恶化的ADSCs凋亡（均P<0.01）。 结论 BCAT1通过P53信号调节ADSCs生存。BCAT1可作为促进ADSCs存活、增强其心肌保护作用的候选靶点。     

儿茶酚胺释放对心肌BCKDK表达的影响及其机制研究

目的 探究在缺血、高血压、心衰等疾病条件下儿茶酚胺释放对心肌细胞中支链酮酸脱氢酶激酶（BCKDK）的表达影响及其作用机制。 方法 使用异丙肾上腺素（ISO）腹腔注射模拟小鼠心脏儿茶酚胺导致的心肌病变模型。小鼠分为对照（Vehicle）组和ISO注射（ISO）组。分别使用ISO、过氧化氢（H₂O₂）、鱼藤酮（rotenone）和抗霉素（antimycin ）A 模拟多种病理刺激处理心肌细胞。使用Western blot检测BCKDK、含有NHL重复序列蛋白（NHLRC）1 和热休克蛋白（Hsp）70蛋白水平表达；实时荧光定量PCR检测BCKDK mRNA水平表达；免疫荧光检测BCKDK、NHLRC1和Hsp70的细胞内定位；免疫共沉淀探究蛋白-蛋白相互作用和BCKDK泛素化水平。 结果 与Con组相比，ISO处理显著增加BCKDK蛋白水平（P<0.01），而mRNA水平无显著差异，BCKDK与NHLRC1的结合降低且泛素化水平降低。而过表达NHLRC1上调BCKDK泛素化水平并降低其蛋白表达。与ISO组相比，Hsp70敲低能完全逆转ISO诱导的BCKDK升高和泛素化降低逆转ISO诱导的支链氨基酸（BCAA）代谢紊乱（P<0.01）。 结论 ISO暴露通过诱导Hsp70与BCKDK结合竞争性抑制NHLRC1介导的BCKDK泛素化，从而导致BCKDK的上调和心肌细胞中BCAA分解代谢紊乱。     

缺氧前、后处理1-磷酸鞘氨醇对心肌细胞缺氧／复氧损伤拮抗作用的差异及相关机制

目的：探讨1-磷酸鞘氨醇（S1P）缺氧前、后处理对心肌细胞缺氧／复氧（H／R）损伤拮抗作用的差异及相关机制。方法：分离SD乳鼠（1—2d龄）心肌细胞进行体外培养。对培养的心肌细胞进行H／R处理以模拟心脏缺血／再灌注（ischemia／reperfusion,r／R）损伤。将培养的心肌细胞随机分为对照组、H／R组、H／R＋SIP缺氧前处理（H／R’pre—S1P）组及I-I／R＋SIP缺氧后处理（I-I／R＋post—S1P）组,采用四甲基偶氮唑蓝（methylthiazolyltetrazo｜ium。MTT）比色法检测心肌细胞的活力,乳酸脱氢酶（1actatedehydrogenase,LDH）检测试剂盒检测培养基中LDH的水平,caspase-3活性检测试剂盒检测心肌细胞中caspase．3的活性,Westernblot检测ATP激活的蛋白激酶（AMPK）、激活的苏氨酸激酶（Akt）、细胞外信号调节激酶1／2（ERKl／2）蛋白磷酸化水平及SIP裂解酶．1（SIPlyase1,SPLl）蛋白表达的水平。结果：与对照组相比,I-1／R组心肌细胞活力显著降低（P〈0．01）,培养基中LDH的浓度和细胞中easpase-3的活性显著增高（P〈0．01）。S1P缺氧前处理可明显增加H／R处理后心肌细胞的活力（P〈0．01）,减少LDH释放和caspase-3的活性（P〈0．01）;而I-I／R＋post—S1P组的各项指标与H／R组比较均无明显差异。Westernblot检测发现,S1P缺氧前处理可明显增高心肌细胞中AMPK、Akt和ERkl／2磷酸化的水平（P〈0．05）,而SIP缺氧后处理未激活AMPK、Akt和ERKl／2生存信号。Westernblot检测发现,缺氧处理组心肌细胞中SPLl表达的水平较对照组显著升高（P〈0．01）。结论：缺氧前用S1P处理可激活AMPK、Akt、ERKl／2生存信号,显著减少心肌细胞凋亡,增加细胞的存活率,减轻心肌细胞H／R损伤;而S1P缺氧后处理不能发挥以上保护作用,其机制可能是缺氧处理导致心肌细胞SPLl的表达上调,通过降解SIP而减弱了其介导的抗心肌细胞H／R损伤的作用。     

抑制1-磷酸鞘氨醇裂解酶活性加重缺血性心力衰竭

目的:观察1-磷酸鞘氨醇(S1P)裂解酶(SPL)在小鼠缺血性心衰(HF)模型中的作用。方法:将60只成年雄性C57/BL6J小鼠随机分为以下4组:假手术(Sham)组、心肌梗死(MI)组、假手术+THI(Sham+THI)组[THI是SPL的抑制剂]及MI+THI组,每组15只(n=15),将25 mg/L THI溶于饮水中,于手术24 h后连续饲喂2周。MI4周后,采用ELISA试剂盒测定心肌中S1P的含量。根据心脏质量/体质量(HW/BW)评价心肌肥厚。用小动物心脏超声评估小鼠心脏结构和功能,经Masson三色染剂染色法观察心脏纤维化。用Western blot检测转化生长因子-β(TGF-β)蛋白的表达。实时PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、心房钠尿肽(ANP)、脑钠尿肽(BNP)和平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)mRNA的水平。结果:与MI组相比,MI+THI组小鼠心肌组织中S1P的含量增加(P0.01);左心室射血分数(LVEF)降低(P0.01),左心室收缩末期内径(LVESD)和舒张末期内径(LVEDD)均增加(均P0.05),HW/BW增加(P0.01),心脏纤维化加重;TGF-β蛋白的表达增加(P0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原、ANP、BNP和α-SMA mRNA的水平均显著增加(均P0.01)。与Sham组相比,Sham+THI组小鼠上述指标无显著差异。结论:抑制SPL的活性可能增加梗死后心肌病理性S1P信号的激活,加重MI后的心脏重构和HF。     

抑制鞘氨醇激酶-2活性加重血管紧张素II诱导的心肌细胞肥大

目的 本实验旨在明确鞘氨醇激酶（sphingosine kinase,SphK）2在血管紧张素（angiotensin,Ang）II诱导的心肌细胞肥大中的作用。方法 分离并体外培养SD乳鼠心肌细胞。给予AngII（10 μmol/L）处理24h诱导心肌细胞肥大。AngII刺激时分别给予溶媒或SphK2特异性抑制剂ABC294640（1 μmol/L）共处理。采用蛋白免疫印迹法检测心肌细胞SphK2蛋白表达。采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA）检测心肌细胞细胞核1-磷酸鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate,S1P）水平。采用结晶紫染色观察AngII诱导的心肌细胞肥大程度。采用实时定量聚合酶链式反应（real time-polymerase chain reaction,RT-PCR）检测心肌细胞肥大标志基因心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide,ANP）、脑钠尿肽（brain natriuretic peptide,BNP）和β-肌球蛋白重链（β-myosin heavy chain,β-MHC）mRNA表达水平。结果 与对照组比较,AngII处理上调心肌细胞SphK2蛋白表达和S1P浓度（均P<0.05）,并增加心肌细胞横截面积与ANP、BNP和β-MHC mRNA表达水平（均P<0.05）。与溶媒组比较,ABC294640处理显著降低了心肌细胞核S1P浓度,并进一步增加了AngII处理后的心肌细胞横截面积和肥大标志基因mRNA表达水平（均P<0.05）。结论 抑制SphK2活性加重AngII诱导的心肌细胞肥大。SphK2有可能成为治疗病理性心肌肥大的新靶点。     

BCAA代谢障碍在儿茶酚胺诱导心肌细胞毒性中作用

目的探讨心肌细胞支链氨基酸(BCAA)代谢障碍在儿茶酚胺诱导的心肌细胞毒性中的作用。方法分离并培养新生大鼠心室肌细胞(NRVMs),给予异丙肾上腺素(ISO)20μmol/L处理48 h模拟儿茶酚胺毒性,ISO刺激同时给予支链α-酮酸脱氢酶激酶(BDK)特异性抑制剂3,6-二氯-2-苯并噻吩羧酸(BT2)处理(40μmol/L)。48 h后,蛋白质印迹法(Western blot)检测BCAA代谢相关酶及细胞凋亡相关酶蛋白的表达;分光光度法检测支链-α酮酸脱氢酶(BCKD)活性;给予外源性BCAA(5 mmol/L)后,分时间点检测培养基中BCAA浓度,直接反映心肌细胞BCAA降解速率;流式细胞术检测心肌细胞凋亡。结果 ISO处理激活心肌细胞线粒体凋亡通路并引起心肌细胞凋亡。与对照组比较,ISO组心肌细胞中BDK表达明显上调,引起BCKD活性下降和BCAA降解障碍。给予BDK抑制剂BT2处理后,能够逆转ISO刺激造成的心肌细胞BCAA降解障碍并明显抑制心肌细胞凋亡。结论抑制BDK能够减轻儿茶酚胺毒性诱导的心肌细胞凋亡,改善心肌BCAA降解障碍有可能成为减轻儿茶酚胺毒性的新策略。     

心力衰竭合并抑郁症的诊断与治疗

心力衰竭（简称心衰）是一种致死率和致残率很高的临床综合征,是心血管领域亟需解决的重大医学问题。临床数据表明,心衰患者具有较高的抑郁症风险,约30%的心衰患者罹患抑郁症。抑郁症会严重降低心衰患者生活质量,也会增加心衰患者的再入院和死亡风险。目前,心衰合并抑郁症的机制尚不完全清楚,临床上也缺乏有效的干预手段。因此,抑郁症仍是心衰患者管理中的一个不可忽视的问题。本文就心衰合并抑郁症的流行病学特点、对心衰患者预后的影响、诊断及治疗进行总结。