大鼠胰腺发育功能相关基因表达谱的分析

目的研究大鼠胰腺胚胎发育不同阶段的基因表达谱,对比其功能相关基因随大鼠胰腺发育的变化。方法采用显微分离及提取技术获得胚胎发育不同阶段胰腺组织并提取RNA,采用高密度寡核苷酸芯片(Affemetrix芯片)对胚胎发育至第12.5天、15.5天、18.5天胚胎胰腺和成年胰腺进行基因转录水平分析,用生物信息学方法分析具体基因的表达情况。结果胰腺的生物学功能尤其β细胞功能相关基因insulin RNA、amylopsin RNA、GLUT-2RNA等在胚胎第15.5及18.5天显著高表达。结论胚胎第15.5～18.5天直至出生是胰腺功能完善和成熟的阶段,这个时期以细胞功能成熟为主。     

日本血吸虫NP30抗体检测方法的优化

目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方法。方法通过正交设计,选用L27(313)正交表,对NP30腹水包被酶标板的浓度、血清浓度、血清孵育时间和辣根过氧化物酶标记抗人IgG的二抗孵育时间共4个因素的3个水平进行不同组合的实验,确定该间接法的最佳实验条件。并用建立的方法对50份云南大山区日本血吸虫粪孵阳性病人血清样本和50份非疫区正常人血清样本进行检测,评价其敏感性和特异性。结果确定的该间接法最佳检测条件为:NP30腹水4μg/ml包被酶标板,血清浓度为1∶100,37℃孵育60min,二抗为37℃孵育30min。该方法的敏感性和特异性分别为88%和96%。结论该方法具有较高的诊断价值,可用于大山区日本血吸虫病疫区的诊断检测。     

安军明主任医师治疗小儿周围性面瘫临床经验撷要

安军明主任医师认为小儿脏腑娇嫩,易被邪侵,风邪中络则易导致周围性面瘫,且感冒为其主要诱发因素。该病急性期邪气表浅,变化迅速,治疗以祛浅表之风邪为主,予远端针刺配合耳部贴压揿针治疗;恢复期邪气始衰,正气始复,为治疗关键时期,治宜调和营卫、活血通络、祛邪扶正,予局部浅刺与远端针刺相结合,辅以方氏头针进行头部穴位刺激;后遗症期治宜益气通络、活血补血,治疗仍以针刺为主,配合中药及小儿推拿,疗效显著。附案例1则,以资验证。     

幽门螺杆菌TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR检测方法的建立北大核心CSCD

目的建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法。方法采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线。检测临床标本中所含幽门螺杆菌的循环数,用该方法对临床胃黏膜标本进行检测并与标准曲线对比,计算所含幽门螺杆菌的拷贝数。结果建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR方法检测幽门螺杆菌质粒的线性范围是10~2~10~8拷贝/μl,CagA和VacA基因标准曲线的相关系数分别是0.977 8和0.990 4。29份临床胃黏膜标本的CagA和VacA基因循环数Ct值分别在29~35和30~35之间,幽门螺杆菌拷贝数分别在1.0×10^(1.39)~1.0×10^(3.87)和1.0×10^(3.06)~1.0×10^(3.91)之间,且临床标本中的幽门螺杆菌均为I型。结论建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR法具有敏感、精确、快速的特点,可用于幽门螺杆菌的快速定量检测与分型鉴定。     

ILK对幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡的影响

目的探讨ILK在幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞GES-1凋亡中的作用。方法体外培养GES-1细胞,随机分为空白对照组、Cpd22组和Hp组。采用罗丹明-鬼笔环肽检测不同浓度ILK抑制剂Cpd22对胃上皮细胞形态及细胞骨架改变的影响;Cpd22作用于GES-1细胞1h后,Western blot检测细胞内ILK表达情况;Hp与Cpd22作用1h的GES-1细胞共培养(MOI=100∶1)24h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP表达情况。结果与空白对照组相比,Cpd22浓度为2μmol/L时细胞形态变圆,间隙变大,细胞外缘伪足减少,细胞无法正常伸展。空白对照组与Cpd22组ILK相对表达量分别为0.83±0.01、0.74±0.01,比较差异有统计学意义(t=5.65,P0.05)。空白对照组、Cpd22组、Hp组细胞凋亡率分别为(6.53±2.78)%、(21.13±5.60)%、(14.07±3.97)%,比较差异有统计学意义(t值分别为-5.52和-6.83,P0.05);Caspase-3相对表达量分别为0.63±0.07、0.95±0.14、0.88±0.11,差异均有统计学意义(t值分别为-5.44和-5.88,P0.05);PARP的相对表达量分别为1.17±0.07、0.93±0.16、1.09±0.12,差异有统计学意义(t值分别为3.32和3.46,P0.05)。Cpd22与Hp共作用组细胞凋亡率为(30.37±5.17)%,Caspase-3的相对表达量为1.07±0.10,PARP的相对表达量为0.86±0.07,与Cpd22组比较差异均有统计学意义(t值分别为4.90、2.85和6.70,P0.05)。结论抑制ILK表达可增强Hp诱导GES-1细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞骨架重排和Caspase-3的表达有关。     

“通关利窍”针刺法治疗中风后吞咽障碍研究进展

吞咽障碍是中风的常见并发症之一，严重影响着患者的身心健康及生命质量。石学敏院士在“醒神开窍”针刺法的基础上创立了“通关利窍”针刺法，以“调神导气，滋补三阴，通关利窍”为治疗原则，选取内关、水沟、三阴交、风池、完骨、翳风等穴位，科学量化施术手法，能准确有效地治疗中风后吞咽障碍。现整理近年来相关文献，从中风后吞咽困难的发病机制与治疗原则、“通关利窍”针刺法的穴位选择、施术手法及量学要求、临床疗效等方面，进行系统归纳总结，以期更好地指导临床。     

益生菌A. muciniphila改善大肠杆菌诱导的小鼠腹泻

目的：以产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC）诱导肠道菌群失调性腹泻模型,分析益生菌嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila,A. muciniphila）对ETEC诱导腹泻的改善效果。方法：用ETEC诱导小鼠腹泻模型。实验小鼠随机分为PBS组、模型组、干预组。干预组给予灌服A. muciniphila菌液（浓度为1×109CFU/mL）0.2 m L/d,连续5 d,模型组口腔灌服ETEC菌液（浓度为1×109CFU/mL）0.5 mL/d。记录小鼠身体状况、体重、腹泻率和死亡率的变化;HE染色观察结肠组织病理变化;ELISA检测血清白细胞介素（interleukin,IL）IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量;RT-PCR检测结肠组织IL-1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达;收取小鼠粪便进行16S rRNA高通量测序并进行统计分析。结果：干预组与模型组相比,身体状况明显改善,腹泻率降低了66%,死亡率降低了30%;血清IL-1...     

医学基础课阶段本科生手机成瘾对学业拖延的影响：自我控制的中介效应

目的　探讨自我控制在医学本科生手机成瘾和学业拖延之间的中介效应。方法　采用便利抽样方法选取某医学院校本科生640名,运用一般情况调查表、手机成瘾倾向量表（smartphone addiction proneness scale,SAPS）、简明自我控制量表（brief self-control scale,BSCS）、大学生学业拖延量表（procrastination assessment scale-students,PASS）进行问卷调查。应用SPSS 25.0进行描述性统计分析、独立样本t检验、单因素方差分析及Pearson相关分析。结果　相关分析显示,学业拖延得分与手机成瘾得分呈显著正相关（r=0.29,P<0.01）,与自我控制得分呈显著负相关（r=-0.26,P<0.01）;手机成瘾得分与自我控制得分呈显著负相关（r=-0.33,P<0.01）。中介效应分析显示,自我控制在手机成瘾与学业拖延之间的中介效应显著（效应值=0.13,95%CI=0.03~0.26）,中介效应占总效应的38.24%。结论　自我控制在医学基础课阶段本科生手机成瘾和学业拖延之间发挥部分中介效应。医学院校教育工作者可以从医学本科生手机成瘾和自我控制的角度进行干预,改善其学业拖延现状。