卵母细胞和受精卵的扫描电镜制样方法

卵母细胞和受精卵的扫描电镜制样方法项晓人，成国祥，袁莉民卵母细胞和受精卵由于其量少珍贵而成为扫描电镜制样技术中的一个难题，至今用扫描电镜研究卵和受精卵超微结构的范围只限于鼠类。而过去研究人员用口吸移管（ｍｏｕｔｈｐｉｐｅｔｅｅ）移卵、以大量卵球弥补制...     

视网膜毛细血管铺片制作技巧

视网膜毛细血管的内皮细胞与周细胞的比值 (Ｅ/Ｐ比值 ) ,是研究视网膜毛细血管病变的重要形态定量指标。该指标的样品制备方法在操作上有一定难度 ,尤其在一些关键性的操作上 ,文献中没有详细的说明〔1～ 4〕,学者往往不能得到优质的、大面积的铺片 ,影响到观察和计量结果的客观性、科学性。现将我室在制备大鼠视网膜毛细血管铺片过程中的一些技巧与改进方法介绍如下。1　材料与方法取ＳＤ大鼠 ,♀♂不限 ,体重 2 50 ｇ左右。放血处死大鼠 ,立即取出眼球置 4 %多聚甲醛液中固定 1～ 2ｄ。或用1 %戊巴比妥钠腹腔麻醉大鼠 ,从颈外动脉灌注生…     

宁心红杞胶囊对老龄雌性大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的影响

目的：观察天然药物干预下老龄雌性大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的变化。方法：以自然衰老雌性大鼠为实验模型,按临床等效剂量胃饲由天然植物药加工制成的宁心红杞胶囊8周后,取其卵泡中颗粒细胞,用透射电镜进行观察。结果：模型组颗粒细胞胞体变小,胞质中的各种细胞器和分泌颗粒数量明显减少,可见较多的凋亡细胞和凋亡小体。用药组细胞体积增大,胞质内细胞器数量增多,线粒体、滑面内质网、粗面内质网、高尔基复合体等结构大体正常,细胞间缝隙连接增多。偶见凋亡的颗粒细胞,未见凋亡小体。结论：宁心红杞胶囊具有调控颗粒细胞凋亡的作用,能抑制凋亡进程,这可能是其临床治疗围绝经期综合征的作用机制之一。     

电针对大鼠丘脑背内侧核痛敏神经元放电的影响

目的：探讨MD是否参与电针和内脏痛信息的传递。方法：采用玻璃微电极细胞外记录的方法，观察电针足三里穴和内脏痛对大鼠MD诱发放电的影响；电针对内脏痛刺激诱发的大鼠MD确放电的影响，并均以外踝为非穴位对照。结果：电针和内脏痛均可在MD引导出诱发放电；电针可明显抑制内脏痛诱发的MD痛放电，并具明显的穴位特异性。结论：MD不仅接受针刺信息的传递，也接受痛信息的传递，并且在针刺镇痛中起着一定的作用。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对强迫游泳大鼠不同脑区c-fos蛋白表达水平的下调作用

目的：柴胡加龙骨牡蛎汤出自《伤寒论》，现代临床用于抑郁症获得良好疗效。为探讨柴胡加龙骨牡蛎汤受体后药理学机制，本研究观察了该方对强迫游泳大鼠海马和纹状体c-fos基因表达的影响。     

环烯醚萜总苷对Ⅱ型糖尿病大鼠血脂及视网膜毛细血管病变的影响

目的：观察Ⅱ型糖尿病大鼠血脂的变化、视网膜毛细血管病变及环烯醚萜总苷对其影响。方法：自制高脂饲料喂养Wistar大鼠4周后，按25mg／kg一次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)，2周后用口服糖耐量试验(Oral glucose tolerancetest，OGTT)筛选造模成功大鼠。随机分为糖尿病模型组(Model)、降糖通脉胶囊组(Jiangtang Tongmai Jiaonang，JTTM)及环烯醚萜总苷组(Iridoid glycosides of Cornus officinalis，IGCO)，并设正常对照组(Control)。饲养16周，观测血清总胆固醇(CHOL)、甘油三脂(TG)、载脂蛋白A(Apo-A)及B(Apo-B)、高密度脂蛋白(HDL-C)及低密度脂蛋白(LDL-C)，并运用视网膜消化铺片和图像分析方法，观测糖尿病大鼠视网膜微血管结构改变及环烯醚萜总苷对其影响。结果：模型组大鼠血清Apo-A水平明显降低，血清CHOL、TG、LDL-C、Apo-B水平明显升高。环烯醚萜总苷组能显著升高糖尿病大鼠Apo-A水平，降低糖尿病大鼠CHOL、TG、LDL-C、Apo-B水平。模型组视网膜毛细血管内皮细胞(EC)数目明显增加，而周细胞(PC)数目明显减少，导致E／P值上升。环烯醚萜总苷组均能显著降低糖尿病大鼠视网膜毛细血管的E／P值。结论：环烯醚萜总苷对糖尿病血脂改变及视网膜毛细血管病变具有一定的改善作用。     

电针对脑缺血再灌注模型大鼠纹状体NMDA受体NR2亚基蛋白表达的影响

目的 观察脑缺血再灌注模型大鼠受损侧纹状体组织中NMDA受体调节亚单位NR2A和NR2B蛋白表达及其电针干预后的变化,探讨电针对缺血再灌注兴奋性氨基酸毒性的拮抗作用,进一步阐明电针治疗缺血性脑血管疾病的机制.方法 用数字随机表将15只SD大鼠随机分成3组:假手术组、模型组、电针组,每组各5只.采用改良Longa线栓法制作大脑中动脉短暂性缺血再灌注模型,电针组大鼠在再灌同时电针“百会”、“大椎”两穴(连续波,频率3 Hz,电流强度1～3 mA),30 min,深度均为10 mm.免疫组织化学法及图像处理系统检测分析大鼠受损侧纹状体NR2A、NR2B蛋白表达情况.结果 与假手术组相比,模型组大鼠纹状体组织中NR2A的表达量明显下降,而NR2B的表达量明显升高,给予电针“百会”、“大椎”穴后的大鼠纹状体组织NR2A表达细胞数及含量均明显高于模型组,表达NR2B的细胞数及含量均明显降低.结论 电针可能通过激活NR2A受体蛋白表达,抑制NR2B受体蛋白的过量表达,从而调节NMDA受体复合物的整体功能活性,减少NMDA受体介导的兴奋性氨基酸毒性反应,减轻脑缺血再灌注引起的局灶性脑损伤,发挥一定的脑神经保护作用.     

中药复方对脑缺血鼠脑组织超微结构的影响

本文用透射电镜观察了缺血60分钟、再灌注60分钟、缺血后中药治疗三组小鼠脑运动区皮层的超微结构．结果发现：①锥体细胞和胶质细胞均有改变，以胶质细胞改变最显著；②毛细血管周围的胶质细胞突起亦肿胀明显，且内皮与突起之间的基膜增厚可达300nm；③中药治疗组鼠脑胶质细胞肿胀消失，细胞器恢复正常．毛细血管内皮与胶质细胞突起之间的基膜厚度变薄。说明脑缺血对大脑胶质细胞和血脑屏障损害严重，而中药复方有改善上述损伤的作用。     

士的宁背景下电针对大鼠不同脊髓节段甘氨酸含量的影响

目的:探讨循经感传形成过程中脊髓甘氨酸的作用。方法:将40只健康雄性SD大鼠随机分为5组:空白组、假电针组、士的宁组、电针组、士的宁解溪组。采用柱前衍生-反相高效液相法,观察皮下注射甘氨酸受体拮抗剂士的宁后电针解溪穴,对大鼠不同脊髓节段甘氨酸含量的影响。结果:电针组电针后可显著减少颈犤(2.86±0.68)nmol/g犦、腰段犤(3.88±0.67)nmol/g犦脊髓的甘氨酸含量,与空白组甘氨酸(4.98±1.18),(5.12±0.70)nmol/g比较,差异有非常显著性意义(P<0.01);胸段甘氨酸含量则有增加的趋势,但没有统计学意义(P>0.05)。电针的影响存在与士的宁某些相一致的效应;在士的宁提高脊髓兴奋性的背景下电针解溪穴,可显著减少颈、腰段脊髓甘氨酸的含量(P<0.05～0.01),值得注意的是,在胸段其影响与单纯注射士的宁或电针的效应相反。结论:士的宁背景下电针,可能通过阻断和/或干扰甘氨酸对脊髓的抑制作用而提高脊髓的兴奋性,并且不同的脊髓节段其机制可能不同。     

大鼠卵泡颗粒细胞透射电镜制样的简便取材方法

近年来,在很多妇科或更年期疾病的实验研究中,实验动物大鼠卵泡中颗粒细胞的超微结构观察是一个重要指标。由于大鼠卵巢卵泡都很小,而颗粒细胞又是半游离在卵泡液中,数量更少,因此,要得到足量的颗粒细胞进行电镜制样,并及时固定,显然取材比较困难。本实验