云南蕊木的研究进展

云南蕊木是傣族民间常用的中草药,主要含有具有多种生物活性的单萜吲哚生物碱。本文从化学成分、生物活性和临床应用3个方面综述云南蕊木的研究进展,以期为云南蕊木的更深入研究提供参考。     

葫芦素E抑制多发性骨髓瘤细胞增殖及与阿霉素的协同效应?

目的：研究葫芦素 E 对人多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响,并观察葫芦素 E 与阿霉素的协同效应。方法采用 CCK-8测定葫芦素 E 对4种多发性骨髓瘤细胞 MM1.S、MM1.R、U266和 RPMI8226的半数生长抑制率(GI50),并通过 CalcuSyn 协同效应分析软件,计算药物合用指数(CI),评价葫芦素 E 与阿霉素协同抗多发性骨髓瘤作用;流式细胞术检测葫芦素 E 对 MM1.S、MM1.R 的细胞周期、线粒体膜电位和细胞凋亡的影响;Western blot 检测凋亡相关蛋白 Caspase-3和 PARP 的变化,以及葫芦素 E 对 IL-10刺激的 RPMI8226细胞STAT3蛋白磷酸化的抑制作用。结果葫芦素 E 对4种多发性骨髓瘤细胞的 GI50均在(12.3~161.7)nM 范围内;葫芦素 E 导致多发性骨髓瘤细胞的 SubG1期细胞比例、凋亡细胞比例和线粒体膜电位下降细胞比例均明显增加,并出现凋亡相关的活化蛋白如 Cleaved Caspase-3和 Cleaved-PARP。葫芦素 E 能有效抑制 IL-10诱导的RPMI8226细胞 STAT3磷酸化,并能与阿霉素协同抗多发性骨髓瘤。结论葫芦素 E 通过抑制 STAT3蛋白磷酸化,诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡,并能协同阿霉素抗多发性骨髓瘤。     

补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR条件优化

目的对补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系及扩增程序进行优化,检测PCR优化体系的适用性和灵敏性。方法通过改进引物设计、改变PCR反应过程中Mg2＋浓度、引物浓度、退火温度、模板DNA浓度及反应循环次数,分析比较PCR扩增效果。结果优化后的补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系中,Mg2＋浓度在2-4mmol/L,引物浓度在0.025-0.4μmol/L,循环次数在30-45次之间均能扩增得到清晰均一的特异性条带;同时,引物退火温度在55.5℃-69.6℃范围内均适用;优化后PCR体系能够检测的最低DNA浓度为1.41ng/μl,即模板DNA在反应体系中的总量为约2.82ng.结论已经建立的优化后的PCR基因扩增体系特异性高且稳定可靠。     

双创背景下地方高校大学生创新平台安全管理的实践与探索

创新平台安全管理是开展大学生创新创业工作的基石,对保障师生人身和国家财产安全、维护高校和社会稳定极为重要。在国家积极推动高校创新创业教育的背景下,本文对地方高校大学生创新平台安全管理的现状及问题进行分析,并从强化制度建设、明确责任、齐抓共管、全员全程安全教育、多元化管理队伍建设和重视硬件建设等方面进行积极的探索与实践,并取得了一定成效,为地方高校创新平台安全管理提供了一套较为成熟的管理思路和方法。     

甜瓜蒂中葫芦素提取工艺初探及其含量测定

目的 比较65％乙醇和无水乙醇回流提取法从甜瓜蒂中提取葫芦素的效率;同时比较甜瓜蒂纤维和甜瓜蒂粉末中葫芦素含量的差异.方法 分别采用65％乙醇和无水乙醇加热回流法制备甜瓜蒂粉末提取液;采用无水乙醇加热回流法制备甜瓜蒂纤维提取液.通过HPLC测定提取液中葫芦素B、E和I的浓度.结果 甜瓜蒂粉末采用无水乙醇制备的提取液中葫芦素B、E浓度均高于65％乙醇制备的提取液中葫芦素B、E浓度,差异有统计学意义(P＜0.05);但葫芦素I浓度比较,差异无统计学意义(P＞0.05).甜瓜蒂纤维采用无水乙醇制备的提取液中也含有较高浓度的葫芦素B、E、I.结论 采用乙醇加热回流法从甜瓜蒂中提取葫芦素,无水乙醇提取效率高于65％乙醇.甜瓜蒂粉末中葫芦素含量虽高于甜瓜蒂纤维,但甜瓜蒂纤维中仍有较高含量的葫芦素,不应当作废弃物处理.     

医学院校科研实验中心建设与管理的探讨

医学院校的科研实验中心承担着学校的科研及教学工作,在学校的发展及人才培养中有着重要的作用。本文就成都医学院科研实验中心为例,对科研实验中心建设的意义、建设的情况及管理模式等方面进行了探讨。     

利用流式监控高质量小鼠脾细胞的制备

目的 流式技术监控小鼠脾细胞裂解过程,在确保脾淋巴细胞高活力的同时,充分裂解其中的红细胞.方法 以流式细胞术监控ACK和Tris-NH4Cl两种红细胞裂解液的裂解效果,通过细胞融合率判断淋巴细胞活力.结果 结合FSC和PI荧光强度分析,在确保淋巴细胞相对存活率大于或等于90%的前提下,ACK处理0.5～1 min即可去除90%以上的红细胞,Tris-NH4Cl处理10 min也可去除82%的红细胞,获得的淋巴细胞的融合效率为85%～90%.结论 流式细胞术能够实时监控ACK和Tris-NH4Cl的裂解过程,获得高质量的脾淋巴细胞以适用于杂交瘤细胞的制备.     

流式细胞术检测细胞亚群存活率的应用研究

目的 采用流式细胞术直接检测小鼠脾细胞中T细胞与Treg细胞存活率,探讨流式细胞术测定混合细胞中细胞亚群存活率的可行性.方法 荧光抗体及碘化丙锭联合使用,测定小鼠脾细胞中T细胞与调节性T细胞的存活率.结果 使用流式细胞术测定脾细胞中T细胞存活率时,r2=0.992 5,斜率为1.012;测定调节性T细胞存活率时,r2=0.983 1,斜率为0.982 3.结论 流式细胞术可以应用于测定混合细胞中细胞亚群的存活率,为药物筛选提供新的选择.     

流式细胞术检测细胞存活率的方法学建立

目的探讨流式细胞术测定细胞存活率的可行性及准确性,为药物筛选、细胞增殖测定、药物毒性检测等提供新的选择。方法使用流式细胞术、CCK-8比色法以及台盼蓝染色排除法测定Jurkat细胞存活率。结果使用流式细胞术,细胞浓度大于105/mL时,CV值小于5%;细胞浓度小于104/mL时,CV值为5%~10%。使用流式细胞术r2为0.993 5,斜率为0.999 4;使用CCK-8比色法r2为0.991 2,斜率为1.011;使用台盼蓝染色排除法r2为0.969 8,斜率为1.057。结论流式细胞术进样流速稳定,且与活细胞数量成正比,可用于测定细胞存活率。