人参总甙及单体对脐血CD34+细胞体外增殖及分化的影响

目的：探讨人参总甙、人参皂甙单体对脐血CD34^ 细胞体外增殖及分化的影响。方法：用MethoCult^TM H4435半固体培养基加入不同浓度的人参总皂甙(GS)、Rgl、Rbl，计数CFU—E、BFU—E、CFU—GM集落。结果：GS、人参皂甙单体Rg1、Rb1具有刺激脐血CD34^ 细胞集落形成的作用，人参皂甙单体的作用优于GS。不同浓度的人参皂甙对脐血CD34^ 细胞集落刺激不同，但其集落形成能力明显高于对照组。GS的最佳浓度为50mg／L，Rg1和Rb1最佳浓度为5mg/L。高浓度的GS、Rgl、Rb1集落形成能力下降，但并不显示抑制作用。结论：人参总甙、人参皂甙单体能促进造血干或祖细胞增殖，并且能诱导定向分化，具有类似生长因子和协同生长因子作用。     

骨重建过程"四环素活体标记"骨组织形态计量学指标在骨质疏松中的应用

扼要结合骨组织形态计量学指标与实验动物数据介绍影响骨质疏松中骨重建过程的动态指标变化及意义,讨论各指标间的关系及变化所代表的实验意义,还介绍了一系列骨计量学观测指标的标准名称,以及利用体视学和图像分析方法进行测量的公式、单位,并扼要介绍一组实验数据与骨计量学指标的相关分析意义,便于今后分析例样的应用查阅。     

从脐血和骨髓中诱导成骨样细胞的体外研究

目的:探讨脐血和骨髓单个核细胞(monocytes,MNC)体外培养过程中的生长特性及诱导贴壁细胞向成骨细胞分化。方法:分离脐血和骨髓MNC,按培养基不同分成3组:分别为MesencultTM无血清培养基。CellGRO培养基+100mL/L胎牛血清。DMEM/F12培养基+100mL/LFBS。体外培养以获得贴壁细胞。观察不同培养条件下细胞扩增的效果。获得的贴壁细胞培养基中加入地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸,诱导细胞向成骨细胞分化。检测诱导后细胞成骨细胞标志物碱性磷酸酶、I型胶原和骨钙素的表达。结果:脐血和骨髓MNC在含有血清的培养基中可以获得更多的贴壁细胞。骨髓MNC贴壁细胞形态均一,呈典型的成纤维细胞样,而脐血贴壁细胞未获得典型的成纤维细胞样细胞,混有大量的圆形细胞。骨髓中获得的细胞可以持续传代10代以上仍保持良好的增殖状态;脐血贴壁细胞最多可以传代2次,细胞总数和纤维样细胞均逐代减少。诱导后的脐血和骨髓细胞均呈碱性磷酸酶阳性,免疫组化染色显示I型胶原和骨钙素表达阳性。结论:骨髓MNC体外培养可以获得典型的间充质干细胞且可以持续多代扩增,向成骨细胞诱导后,形态和标志物检测都呈典型的成骨细胞样。脐血MNC体外培养可获得贴壁细胞,但不呈间充质干细胞样,向成骨细胞诱导后,虽形态与成骨细胞不相似,但成骨细胞     

发育期缺碘大鼠骨发育障碍的病理学观察

目的观察缺碘对大鼠甲状腺功能及骨发育的影响。方法复制两代碘缺乏大鼠动物模型．测定血清中TT3、TT4水平，拍摄X线片，并作股骨远端骨切片观察骨发育情况。结果20日龄缺碘大鼠的体质量明显低于对照组，甲状腺相对质量明显高于对照组；补碘组与正常组无明显差别、碘缺乏大鼠血清TT3水平与对照组相比无明显变化．但TT4。水平显著降低。X线片中可见．碘缺乏大鼠的长骨较同日龄正常大鼠短且细．骨间隙增大，钙化不良。股骨远端骨骺病理切片显示，缺碘大鼠次级骨化中心形成迟缓且小，骨骺生长板中几个软骨细胞区域层次混乱，储备细胞数目减少，增殖区宽度较正常大鼠减少，生后补碘可以部分纠正上述改变。结论发育期碘缺乏会导致大鼠发育迟缓，骨骺软骨发育不良．钙化障碍。生后给碘缺乏大鼠补碘可以改善骨骼发育。     

NOG突变引起的指(趾)关节融合和多发骨性联合综合征

骨骼和关节发育异常是常见的先天性畸形之一，也是许多遗传性疾病的常见表型，在已发现的单基因遗传疾病中．伴有骨骼和关节发育异常的超过10％，近端指(趾)关节融合(proximal symphahlangism．SYM1)和多发骨性联合综合征(multiple synostoses syndrome，SYNS1)都是由NOG突变引起的常染色显性遗传疾病。本文就NOG的结构、功能及其突变等内容做一综述。     

缺碘性甲状腺功能低下大鼠骨发育障碍的病理学观察

目的探讨缺碘所致发育期大鼠甲状腺功能(甲功)低下造成的发育障碍,包括成骨细胞分子异常、骨计量学证据和病理学证据等,本文报告病理学观察结果.方法复制了第1代和第2代碘缺乏大鼠动物模型,测定血清中T3、T4水平,拍摄X光片,并作股骨远端骨切片观察骨发育情况.结果 20日龄正常组与缺碘组T3水平分别为(1.83±1.11)nmol/L和(1.66±1.01)nmol/L,补碘后略有下降,差异无显著意义;T4水平分别为(104.68±25.73)nmol/L和(3.47±1.06)nmol/L,显示甲功低下,补碘后升至(119.88±29.45)nmol/L.缺碘大鼠体重在整个发育过程中(1～84 d)始终低于正常组,平均降低了56%;X光片中可见,缺碘大鼠的长骨较同日龄正常大鼠短且细,骨间隙增大,钙化不良.20日缺碘鼠肌骨远端骨骺病理切片显示,大鼠次级骨化中心形成迟缓且小,骨骺生长中几个软骨细胞区域层次混乱,储备细胞数目减少.增殖区宽度较正常大鼠者减少;甲状腺病理学变化显示,从生后1 d开始,碘缺乏大鼠已经出现了甲状腺肿大的典型变化,包括滤泡体积变小,形状不规则,胶质明显减少或缺如.滤泡上皮细胞增大呈柱状,胞浆淡染,有空泡变性,滤泡间小血管增多,充血明显.生后补碘可以部分纠正上述改变.结论缺碘导致大鼠发育迟缓,体重增长缓慢.骨骼发育不良,长骨骨骺软骨发育障碍,钙化过程也受到影响.生后给缺碘大鼠补碘可以改善骨骼发育.     

中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响

目的　研究中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响 ,探讨葛根治疗骨质疏松症的药理作用。方法　采用去卵巢大鼠模型 ,分A去势组、B假手术组、C去势服葛根组、D去势服西药组 (阳性对照组 ,程序治疗 ) ,去势 1个月后C、D组服药 50d ,放免法测定血清雌二醇 (E2 )、邻甲酚酞络合酮法测定尿钙 ,ELISA法测定尿脱氧吡啶啉 (Dpd) ,放免法测定血清骨钙素 (BGP)水平 ,组间进行比较。结果　E2 测定B、C、D组高于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 1 ,P <0 0 0 1 )。尿钙测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 1 )。Dpd测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 )。BGP测定B组低于A组 (P <0 0 1 ) ,C、D组高于A组 (P <0 0 1 ,P <0 0 5) ,同时高于B组(P <0 0 0 1 )。结论　中药葛根有增加E2 ,抑制骨吸收 ,促进骨形成 ,对骨质疏松症有治疗作用     

BMP-2和地塞米松对成人成骨细胞增殖和分化的影响

目的 观察不同浓度骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和地塞米松(dexamathasone,DEX)对体外培养的人成骨细胞增殖、分化的影响。方法成人髂骨松质骨胰蛋白酶消化后获得成骨细胞进行培养,用倒置显微镜进行活体观察并做碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型及Ⅲ型胶原染色观察成骨细胞生物学特征。培养的细胞加入不同浓度BMP-2(1、10、100、1000ng／m1)和DEX(10^-8、10^-7、10^-6mol／L)作用48h后,用MTT法检测细胞增殖,同时测定细胞裂解液中ALP活性和OCN含量。结果 体外培养的成人成骨细胞可合成碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原,并形成钙化结节、3个浓度的DEX在48h后均能刺激成骨细胞的增殖,增加成骨细胞ALP活性和OCN含量,4个浓度BMP-2在48h后对成骨细胞无增殖作用,但都能增加ALP活性和OCN含量。结论 地塞米松促进体外培养的成人成骨细胞增殖和分化;短期作用下,BMP-2对成骨细胞的增殖无明显作用,但可促进成骨细胞的分化。     

去势大鼠骨质疏松模型药物干预后血清骨酸性磷酸酶5b等骨代谢指标观察

目的：检测切除卵巢大鼠骨质疏松症模型血清中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrateresistant acod phosphatase form 5b，TRACP5b)在术后不同时时期的变化，结合药物十预及同期测定的脱氧吡啶啉(Dpd)等骨代谢指标、骨组织形态计量学指标变化，探讨TRACP5b对骨质疏松症诊断和疗效监测的意义。方法：采用SD雌性大鼠80只，分为5组，每组16只。除假手术组外．均进行大鼠双侧卵巢切除，于术后3d实验组开始给药，术后4、14周取材．进行骨代谢指标及骨组织形念计量学等指标观察。结果：大鼠去卵巢4周后，Dpd／肌酐(Cr)与TRACP5b数值模型组明显高于假手术组：14周时TRACP5b值仍高于假手术组。药物干预实验发现，大鼠去势4周，虽然药干预组与去势组血清E2水平无显著性变化，Dpd/Cr与TRACP5b指标有显著性变化。实验药物14周时，骨吸收指标TRACP5b值仍呈极显著性下降，其他骨吸收指标变化差异无显著性。同时骨计量学结果也证实，实验药物组骨体积，骨吸收表面，骨矿化沉积率，骨重建单位时间等指标均得到发送。结论：实验证实在骨质疏松症形成的早期（高骨转换期）或晚期（低骨转换期）TRACP5b均能反应破骨细胞活跃程度及骨质疏松症的状态。二膦酸盐与雌激素类药物均有抑制破骨细胞性骨吸收的特点，能降低骨吸收代谢的测定指标，而血清指标中TRACP5b值下降的持续时间及特异性更为显著，骨计量学结果也显示了药物对骨体积的改善。     

从骨髓和脐血造血干细胞中诱导成骨样细胞

骨髓有2个重要的功能:造血和成骨。骨髓中存在造血干细胞(hem atopoietic stem cells,HSCs)(CD34 细胞)和间充质干细胞(m esenchym al stem cells,MSCs)。这2种干细胞共同存在于骨髓腔中,MSC对HSC不仅有空间位置的机械支持作用,还分泌多种造血因子支持其造血功能,有助于HSC未分