双重实时荧光定量PCR法鉴定克柔念珠菌和光滑念珠菌

目的 建立一种快速、灵敏、特异的鉴定克柔念珠菌和光滑念珠菌的双重实时荧光定量PCR方法.方法 以核糖体基因内转录间隔区Ⅱ(ITSⅡ)为靶目标,设计并合成分别针对克柔念珠菌、光滑念珠菌的种特异引物和探针.建立双重实时荧光定量PCR反应体系,并用该体系对呼吸道相关致病菌进行检测.鉴定结果与临床常规鉴定方法对照,评价其敏感度、特异度及重复性.结果 通过对100例样品的检测,结果显示该双重实时荧光定量PCR法检测标本的鉴定结果与常规鉴定方法的结果对照,特异度为100%,敏感度为100%;最小能检测到10个拷贝数的重组质粒;批内重复实验和批间重复实验结果均与常规鉴定方法结果相符.结论 双重荧光定量PCR法鉴定克柔念珠菌和光滑念珠菌,特异度和敏感度高,重复性好,且快速、简便,该方法将有助于念珠菌病的早期诊断和针对性治疗.     

不常见非发酵菌对常见抗菌药物敏感性分析

目的了解临床分离的伯克霍尔德菌属、金色杆菌属、产碱杆菌属等不常见非发酵菌的耐药性。方法从2004年~2006年临床各种标本中分离到的不常见革兰阴性杆菌用V ITEK-2全自动微生物分析仪进行检测鉴定,药物敏感性试验采用纸片扩散法。数据分析采用WHONET 5.4软件进行处理、统计和分析。结果两年中中山大学第一附属医院共收集患者首次分离株118株,其中伯克霍尔德菌属47株(其中洋葱伯克霍尔德菌41株,皮氏伯克霍尔德菌6株),金色杆菌属44株(其中脑膜脓毒性金黄杆菌17株,产吲哚金黄杆菌23株),产碱杆菌属27株(其中粪产碱杆菌13株,木糖氧化无色杆菌12株)。96.6%的菌株来源于痰标本。对伯克霍尔德菌属有较强体外抗菌活性的依次为:复方磺胺甲口恶唑(87.2%)、哌拉西林/三唑巴坦(87.0%)、左氧氟沙星(85.3%)、头孢吡肟(83.0%)、头孢他啶(78.6%)和头孢哌酮/舒巴坦(78.3%)。对金色杆菌属有较强体外抗菌活性以复方磺胺甲口恶唑(87.5%)最高。对产碱杆菌属敏感性较高的药物分别为头孢哌酮/舒巴坦(84.6%)和美罗培南(77.8%)。结论头孢哌酮/舒巴坦对三种非发酵菌都有较高体外抗菌活性。常规实验室鉴定方法易将三种菌相互混淆,甚至与氧化酶阴性的非发酵菌混淆,这可能是造成各地报道药敏结果差异的原因之一。     

RICU肺部革兰氏阴性杆菌感染的探讨

目的　为了了解RICU下呼吸道感染常见致病菌的分布及药敏情况 .方法　我们收集了 1993年 8月～ 12月我所RICU患者的痰培养分离的病原菌 149株 ,测定其中 10 2株革兰氏阴性杆菌对常用的 16种抗生素的敏感性 .结果　 149株病原菌中 ,革兰氏阴性杆菌 10 2株 ,其中铜绿假单胞菌 2 3株 ,位于首位 .药敏结果 :铜绿假单胞菌对环丙氟哌酸、泰能、丁胺卡那的敏感率分别是 91%、82 %、82 % .结论　RICU下呼吸道感染以革兰氏阴性杆菌为主 ,铜绿假单胞菌位于首位 ,对环丙氟哌酸的敏感率最高 .     

呼吸监护病区患者下呼吸道分离革兰阴性杆菌连续5年耐药性监测

目的探讨本所呼吸监护病区(RICU)患者下呼吸道分离革兰阴性杆菌的耐药变迁,指导临床合理使用抗菌药。方法2000-2004年从RICU患者下呼吸道分离的非重复的1047株革兰阴性杆菌采用Kirby-Bauer法进行药敏试验,数据分析采用WHONET5.3软件。结果最常见的病原菌为铜绿假单胞菌(42.9%)、嗜麦芽窄食单胞菌(17.1%)、鲍曼不动杆菌(10.0%)和肺炎克雷伯菌(6.5%)。敏感率较高的抗菌药是头孢他啶(50%～74%)、阿米卡星(33.3%～81.0%)、哌拉西林-三唑巴坦(30.4%～64.6%)、头孢哌酮-舒巴坦(33.5%-47.5%),亚胺培南的敏感率波动性较大。对嗜麦芽窄食单胞菌敏感性较高的药物是头孢哌酮-舒巴坦(47.2%～78.6%)和替卡西林-克拉维酸(28.3%～86.6%)。鲍曼不动杆菌对亚胺培南的敏感率始终保持在90%以上,头孢哌酮-舒巴坦的敏感率(18.2%～68.2%)与阿米卡星(31.8%～76.2%)相近。肺炎克雷伯菌对亚胺培南和头孢吡肟的敏感率最高,分别为92.9%～100%和55.6%～80.0%,哌拉西林-三唑巴坦的敏感率由58.3%降至21.7%。肺炎克雷伯菌产ESBLs株检出率由2002年的11.1%上升至2004年的47.8%。结论5年来本研究监测的细菌耐药率明显升高,加强耐药性监测,合理使用抗菌药物非常重要。     

重症传染性非典型肺炎医院内感染的临床分析

目的:探讨重症传染性非典型肺炎(亦称严重急性呼吸综合征,serious acute respiratorysyndrome,SARS)病人医院内感染的诊断与治疗.方法:对44例重症SARS病人的临床资料进行回顾性分析.结果:44例重症SARS病人27例发生医院内感染,其中7例表现为持续发热,16例表现为体温降低再升高,仅4例体温低于37.5℃;27例白细胞超过10×109/L者26例,淋巴细胞分类小于0.20者21例;19例X线胸片呈现进展性表现,5例无明显变化,3例好转;各类标本中共分离出50株病原菌,真菌12株,占24%;所有病例予以通气辅助和肾上腺皮质激素、抗菌药治疗,35例治愈出院,9例死亡.结论:重症SARS病人医院内感染的发生率高,多表现为混合性内源性感染,痰细菌培养对早期诊断具有重要意义;应予强力广谱抗菌药治疗.     

肺功能检查专用呼吸过滤器细菌过滤效率检测方法的建立及其可行性评价

目的 探讨肺功能检查专用呼吸过滤器细菌过滤效率的检测方法,并评价其可行性.方法 采用射流雾化器产生带有枯草芽孢杆菌黑色变种标准菌种细菌悬液(浓度为1.5×108 cfu/ml)的气溶胶,分别通过3种不同品牌的呼吸过滤器,然后采集过滤器末端的气流进行细菌培养和菌落计数,计算出呼吸过滤器的细菌过滤效率和微生物穿透值.结果 Promed、Microgard和Cosmed 3种过滤器的细菌过滤效率均大于99.99%,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).微生物穿透值分别为(17±9)、(23±12)和(13±8),3组间及Promed与其余2组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 通过雾化细菌悬液检测肺功能检查专用呼吸过滤器细菌过滤效率的方法可行.国内产品(Promed)与国内常用进口产品(Microgard和Cosmed)的过滤性能相当,达到呼吸保护装置的过滤要求,适于临床上应用.     

肺放线菌病4例临床分析

目的：探讨肺放线菌病临床表现、诊断和治疗方法。方法：总结分析4例肺放线菌病患者的临床资料。结果：4例均有咳嗽、咯脓血痰,肺部均有基础病变（分别为肺隔离症、支气管扩张症、肺囊肿、支气管异物）,均曾被误诊。2例患者经可弯曲支气管镜取分泌物及肺部活组织检查（活检）阳性确诊,另2例经术后病理活检确诊。4例患者全部予处理基础病变（肺叶切除和异物摘除）,其中1例患者在术前予大剂量青霉素治疗后肺放线菌病痊愈,4例患者均在术后予4～9d的抗生素治疗,随访半年至1年均未复发。结论：肺放线菌病的临床表现无特异性,容易误诊。肺部有基础病变且反复咳嗽、咯血痰而治疗效果不佳,应注意放线菌感染的可能。经可弯曲支气管镜等方法获取深部分泌物和（或）组织行病原学培养、病变组织病理学检查是主要的确诊方法。治疗上应选用青霉素等抗生素,同时应重视基础病变的处理。     

葡萄球菌感染对9种抗生素的体外活性研究

目的 收集广州地区四间教学医院住院及门诊感染患者中分离的葡萄球菌进行体外药敏试验，提供临床用药参考。方法 采用琼脂稀释法和葡萄球菌的苯唑西林筛选试验。结果 耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）的检出率92．4％。耐苯唑西林的凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCoN）的检出率96．9％。MRSA和MRSCoN对万古霉素100％的敏感，对利福平的敏感率分别为75．4％、84．4％。对替考拉宁的敏感率分别为71．1％、87．2％。对其余6种药物的敏感率在4．9％～26．2％、4．9％～18．8％之间。结论 葡萄球菌中的MRSA和MRSCoN的检出率很高，对其敏感的仍然是糖肽类的抗生素。     

口服八种细菌提取物对慢性支气管炎合并慢性阻塞性肺疾病急性加重的预防作用

反复的呼吸道感染是慢性支气管炎合并慢性阻塞性肺疾病 (COPD)急性加重的最常见诱因 ,早在 2 0世纪 70年代就有人提出使用口服细菌提取物来激活人体的天然免疫系统以抵御致病菌的侵蚀[1] 。八种细菌提取物 (商品名 :泛福舒 ,瑞士欧姆药厂 )是从 8种呼吸道感染常见致病菌提取的 ,它可通过刺激黏膜源性淋巴组织而激活机体免疫系统 ,增强各种免疫细胞活性以及免疫细胞因子生成 ,使支气管黏膜的巨噬细胞活性增强和分泌性IgA的分泌增多[2 ] 。国外早在 2 0世纪 80年代便开始对八种细菌提取物进行了系统的研究[3 ] ,国内尚少见相关报道。我们研…     

RICU肺部革兰氏阴性杆菌感染的探讨

目的为了了解RICU下呼吸道感染常见致病菌的分布及药敏情况.方法我们收集了1993年8月～12月我所RICU患者的痰培养分离的病原菌149株, 测定其中102株革兰氏阴性杆菌对常用的16种抗生素的敏感性.结果 149株病原菌中,革兰氏阴性杆菌102株,其中铜绿假单胞菌23株,位于首位.药敏结果:铜绿假单胞菌对环丙氟哌酸、泰能、丁胺卡那的敏感率分别是91%、82%、82%.结论 RICU下呼吸道感染以革兰氏阴性杆菌为主,铜绿假单胞菌位于首位,对环丙氟哌酸的敏感率最高.