肿瘤相关巨噬细胞通过诱导肝癌细胞自噬降低索拉菲尼的促凋亡作用

目的探讨索拉菲尼治疗肝癌耐药的分子机制,寻找逆转耐药新靶点。方法体外诱导THP-1细胞建立M2型肿瘤相关巨 噬细胞（TAMs）,免疫荧光鉴定M2型TAMs,将SMMC-7721细胞分为空白对照组、M2-TAMs共培养组、索拉菲尼组以及索拉菲 尼与M2-TAMs共培养联合处理组,CCK-8法检测M2-TAMs对索拉菲尼抑制SMMC-7721增殖的影响;Annexin V/PI双染法、 蛋白质免疫印迹法检测使用自噬抑制剂氯喹处理前后M2-TAMs对索拉菲尼促SMMC-7721细胞增殖、细胞凋亡的影响及细胞 凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的表达量变化。结果索拉菲尼对肝癌细胞SMMC-7721作用48 h的IC50为2.25 μmol/L,索拉菲 尼对与M2-TAMs共培养（共培养给药组）48 h 的SMMC-7721的IC50为4.72 μmol/L。共培养给药组与单独给药组相比细胞凋亡 率明显下降（P<0.01）,Bcl-2 表达明显增加,Bcl-2/Bax 比值增加（P<0.05）,而自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高（P< 0.001）,p62蛋白表达下调（P<0.05）,自噬水平明显增强。氯喹处理后能明显抑制共培养给药组的细胞增殖（P<0.05）,促进细胞 凋亡（P<0.05）,下调Bcl-2/Bax比值（P<0.01）。结论M2-TAMs可通过促进SMMC-7721细胞自噬,降低索拉菲尼对肝癌细胞的 增殖抑制作用,因此抑制自噬可能是逆转肿瘤微环境诱导索拉菲尼治疗耐药的新靶点。     

定标活检术在肠道黏膜中临床应用价值的探讨及分析

目的 评价定标活检术在肠道黏膜中的应用价值.方法 选择行肠镜检查的患者89例,使用一次性定标活检钳在其肠道黏膜进行标记,通过定期复查肠镜,分析单次标记成功率、标记的存在情况、标记局部黏膜的组织反应及其并发症等情况.结果 89例患者中单次定标成功率84.27％,总有效率96.63％.随访超过6个月、12个月、1 8个月和24个月的患者中,定标总有效率分别为82.35％、78.56％、76.54％和67.89％.结论 定标活检术在肠道黏膜中具有标识清晰,留存时间较长,适合肠道疾病的纵向对比研究,临床推广意义较大.     

硫酸氨基葡萄糖脂质体的制备及其对骨关节炎的治疗作用

目的: 构建与评价硫酸氨基葡萄糖脂质体（glucosamine sulfate liposome,GAS Lips）,并比较游离硫酸氨基葡萄糖（GAS）和GAS-Lips对前交叉韧带横断术（anterior cruciate ligament transection,ACLT）构建的骨关节炎大鼠的治疗效果。方法: 采用薄膜分散法构建GAS Lips,并对其粒径、形貌、载药量与体内滞留性进行评价。24只SD大鼠随机分为假手术组、ACLT+未给药组、ACLT+GAS组、ACLT+GAS Lips组。通过关节腔注射生理盐水、GAS与GAS Lips进行体内药效实验,并观察其对骨关节炎的治疗作用。结果: 表征实验结果表明,GAS-Lips平均粒径为（255.02±3.64）nm,形状为类球形。制剂学评价结果表明,包封率为（78.62±1.01）%,载药量为（9.90±0.75）%,并具有良好的缓释作用。体内滞留实验表明,与对照组相比,Cy3-Lips组在关节腔滞留时间明显延长（P<0.01）。体内药效实验表明,与游离GAS相比,GAS-Lips可以更有效缓解关节表面损伤,抑制炎症因子的表达（P均<0.01）,且对大鼠的体重无明显影响。结论: 本研究成功构建与评价了一种GAS-Lips,提高了GAS在骨关节炎滞留时间与治疗效果,为其开发成为骨关节炎纳米制剂提供研究基础。     

鞍山市1983～2003年饮用水污染事故的分析

1983-2003年鞍山市共发生饮用水污染事故24起，受威胁人数为20余万人，均处理及时，未发生严重后果。     

白藜芦醇对人黑色素瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人黑色素瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法 MTT法检测不同浓度(10、20、40、80、160μmol.L-1)Res对人黑色素瘤细胞株Mel-RM和MM200增殖的抑制作用,溴化丙啶(propidium iodide,PI)单染进行流式细胞仪分析,检测Res对黑色素瘤细胞凋亡的影响。通过JC-1染色法检测Mel-RM和MM200细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,△Ψm)。试剂盒检测Caspase-3的活性变化。结果随着Res的浓度的增加,对人黑色素瘤细胞株的增殖产生明显的抑制作用,80、160μmol.L-1的Res可诱导Mel-RM和MM200细胞出现明显的凋亡,JC-1染色结果显示,Res处理后Mel-RM和MM200线粒体膜电位分别降低51.0%和68.8%。Caspase-3活性检测结果显示Res对Caspase-3具有激活作用。结论 Res具有抑制黑色素瘤细胞增殖诱导其凋亡的作用,其机制可能与降低细胞线粒体膜电位及激活Caspase-3有关。     

鞍山市农村学生口腔卫生调查

我们于1991年10月至11月间对鞍山市农村学生口腔卫生进行了调查,旨在为搞好农村卫生教育提供依据。共调查农村26所学校,调查对象是小学四年级、初二和高二年级学生,每校随机抽取10名左右学生,共256人。采用牙菌斑指数评定口腔卫生状况,分度标准如     

内镜黏膜下剥离术治疗消化道黏膜下肿瘤的护理

消化道黏膜下肿瘤(SMT)泛指一类来自黏膜层以下(非黏膜组织)的消化道病变[1]。内镜下黏膜剥离术(ESD)可以一次性完整切除病变部位,能明显降低肿瘤的残留与复发。2009年9月至2012年8月,宁波市鄞州区第二医院对35例SMT患者实施了ESD术,取得了较好的治疗效果。现将护理经验总结如下。     

氯喹增强乳腺癌细胞对他莫昔芬化疗敏感性的作用研究

目的:探讨氯喹(chloroquine,CQ)增强乳腺癌细胞对他莫昔芬(tamoxifen,TAM)化疗敏感性的作用及其机制.方法:以雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,分为空白对照组、TAM组、CQ组和CQ+TAM组,空白对照组不加药物,仅用培养基培养,其余各组加入相应药物培养.采用MTT法检测各组细胞存活率;通过集落克隆形成实验观察低浓度CQ、TAM及其联用对MCF-7细胞增殖的抑制作用;溴化丙啶单染检测各组细胞凋亡率;Western blot法检测各组蛋白表达情况.结果:TAM组、CQ组和TAM+CQ组24 h、48 h、72 h细胞存活率均明显低于空白对照组(P<0.01),TAM+CQ组24 h、48 h、72 h细胞存活率亦均明显低于TAM组和CQ组(P<0.01),TAM组24 h存活率低于CQ组(P<0.05).集落克隆形成实验结果显示,低浓度CQ抑制MCF-7细胞集落形成不明显,但CQ可明显增强TAM的抑制作用.4组间细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.01),其中TAM组、CQ组和TAM+CQ组细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P<0.01),TAM+CQ组细胞凋亡率亦均明显高于TAM组和CQ组(P<0.01).Western blot结果显示,随时间增加,TAM组Beclin-1和LC3Ⅱ蛋白表达升高,p62蛋白表达降低;与空白对照组比较,TAM组LC3Ⅱ蛋白表达明显升高,p62蛋白表达降低;而CQ+TAM组LC3Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白表达均较TAM组升高,Bcl-2蛋白表达降低.结论:CQ可增强乳腺癌细胞对TAM化疗的敏感性,其机制可能是通过下调Bcl-2表达,抑制细胞自噬反应.     

小脑结构与功能磁共振成像在帕金森病中的研究进展

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是继阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)之后的第二大神经退行性疾病,它被认为是一种"经典的"基底节疾病,故大多数关于PD的研究都集中在基底神经节,而小脑常被忽视.近年来,越来越多的解剖学、病理生理学和临床证据均表明小脑在PD的发生发展过程中...     

2-脱氧葡萄糖通过激活AMPK通路抑制类风湿关节炎血管新生

通过观察2-脱氧葡萄糖（2-DG）对佐剂关节炎（AA）大鼠滑膜组织血管翳形成的抑制及对人脐静脉内皮细胞 （HUVEC）增殖、迁移和体外成管的作用,探讨2-DG抑制类风湿关节炎血管新生的机制。方法采用滑膜病理组织HE染色观察 滑膜组织血管翳形成;CCK-8法检测HUVEC的细胞增殖活性;Transwell小室法检测HUVEC的迁移;体外基质胶成管实验检 测HUVEC 的成管数;Western blot 检测p-AMPK 以及抗凋亡蛋白Bcl-2 的表达;使用AMPK 阻断剂Compound C 阻断 HUVEC细胞的AMPK信号通路。结果2-DG（200 mg/kg）明显减轻AA大鼠滑膜组织血管翳生成（P<0.01）;体外实验结果显 示,2-DG（0.5 mmol/L和/或5 mmol/L）可明显抑制HUVEC的增殖、迁移和体外成管（P<0.01或P<0.001）,加入AMPK受体阻断 剂Compound C（5 μmol/L）,2-DG对HUVEC的活化的抑制作用被明显阻断（P<0.01）;Western blot结果显示2-DG（5 mmol/L） 可以增加P-AMPK的蛋白表达,减少Bcl-2的蛋白表达,差异有统计学意义（P<0.05）。结论2-DG可能通过激活AMPK通路减 少Bcl-2的表达抑制内皮细胞增殖、迁移和体外成管,从而抑制类风湿关节炎血管新生。