补肾法对去卵巢大鼠骨髓细胞0PG、RANKL和TNF-α基因表达的影响

目的观察补肾中药对大鼠去卵巢后骨髓细胞表达核因子κB受体活化子配体（RANKL）、核因子κB受体活化子（RANK）、护骨素（OPG）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）基因的影响。方法健康3月龄雌性SD大鼠72只，其中24只为假手术对照组，48只去卵巢后随机分为去卵巢组和中药组，每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12周每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA，RT-PCR半定量分析其表达。结果与对照组比较，去卵巢后2周，去卵巢组骨髓细胞TNF—α和RANKL的mRNA表达显著升高（P〈0．05～0．01），第4～6周，上述改变达高峰，至第12周TNF-α仍呈有意义增高；而去卵巢组OPG表达在第2～6周则明显降低，2～4周为最低点。中药组TNF—α和RANKL表达低于去卵巢组（P〈0．05，P〈0．01），而OPG表达明显高于去卵巢组。但是中药治疗未能使以上基因表达完全恢复正常。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论补肾中药在一定程度上抑制去卵巢大鼠骨髓细胞过度表达TNF-α和RANKL，同时增加OPG的表达。     

雌激素调节大鼠去卵巢后骨髓细胞OPG、RANKL、RANK基因表达

目的 观察大鼠去卵巢后骨髓细胞核因子κB受体活化子配体（RANKL）、核因子κB受体活化子（RANK）、护骨素（OPG）以及TNF-α基因表达的改变和雌激素的影响。方法 健康3m龄雌性SD大鼠72只，24只为假手术对照组，48只去卵巢，随机分为去卵巢组和雌激素组，每组24只。分别于去卵巢后2、4、6、12w每组各取6只大鼠骨髓细胞提取RNA，RT-PCR半定量分析其表达。结果 与对照组相比，去卵巢后2W．去卵巢组骨髓细胞TNF-α和RANKLmRNA表达显著升高（P〈0．05—0．01），第4-6w，上述改变达高峰，至第12w TNF-α仍呈有意义增高；而OPG表达在第2-6W则明显降低（P〈0．01），2-4W为最低点；OPG／RANKL比值2-6W为最低（P〈0．01），12W仍低于对照组。雌激素组以上各时间TNF-α和RANKL表达低于去卵巢组（P〈0．05，P〈0．01）而OPG表达和OPG／RANKL比值明显高于去卵巢组（P〈0．01）。各组全程未见RANK基因表达水平有明显变化。结论 雌激素抑制大鼠去卵巢后骨髓细胞过度表达RANKL和TNF-α而增加OPG的表达。     

吡格列酮对哮喘模型TH1/TH2细胞因子表达的影响

目的 初步探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ（PPAR-γ）激动剂吡格列酮对哮喘模型TH1/TH2细胞因子表达的影响及其机制。方法 18只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和药物组，每组各6只。采用Western blot方法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达，同时运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内细胞因子白细胞介素4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）的表达。结果 哮喘组肺组织T-bet的表达与正常对照相比显著升高（P〈0．01），GATA3无显著变化（P〉0．05）；经吡格列酮治疗的小鼠肺组织T-bet的表达与哮喘鼠比显著增高（P〈0．01），而GATA3无显著变化（P〈0．05）。哮喘鼠T细胞内IL-4／WN-γ比值与正常组相比明显升高（P〈0．01）；经吡格列酮治疗后细胞内IL-4，IFN-γ比值明显降低（P〈0．01）。结论 PPAR-γ激动剂吡格列酮可能通过参与调控TH1细胞转化过程中重要转录因子T-bet的表达，改变IL-4／IFN-γ比值，从而改善相应的炎性症状，PPAR-γ可能成为哮喘治疗的新靶点。     

以国家精品资源共享课建设为契机,全面提高医学检验人才培养质量

<正>华中科技大学同济医学院检验系《临床输血检验》课程2013年获国家精品资源共享课立项建设项目,这是该课程继2008年获华中科技大学精品课程、2009年获湖北省精品课程、2010年获国家级精品课程后的又一国家级课程建设项目。精品资源共享课是高等学校教学质量工程和教学改革中的重要内容之一,是国家精品开放课程建设项目的组成部分,是以高校教师和学生为服务主体、同时面向社会学习者的基础课和专业课等各类网络共     

鸡菌菌丝体中多糖的提取及含量测定

鸡菌菌丝体中多糖的提取及含量测定王化远何俊超呈裕潘世秀＊药学院有机化学教研室真菌类是现代中西药、营养保健品研制开发的宝库，如香茹、灵芝、虫草等在药品保健品的开发中均取得巨大的经济效益。鸡菌（ｆｅｒｍｉｔｏｍｙｃｅｓａｌｂｕｍｉｎｏｓｕｓ）是我国南方特...     

应用SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR法对中国汉族人群HLA-B27进行快速基因分型

目的：建立一种快速、灵敏的实时荧光聚合酶链反应（PCR）对中国汉族人群的人白细胞抗原B27（HLA-B27）进行基因分型。方法：采用SYBR GreenⅠ荧光PCR法对120例已定型的标本、230例健康志愿者、54例类风湿因子（RF）阳性患者和36例抗核抗体（ANA）阳性患者的HLA-B27 DNA进行实时检测，并采用熔解曲线对HLA-B27进行基因分型。结果：①熔解曲线分析显示，伊珠蛋白PCR产物的Tm平均值为87．82℃，HLA-B27 PCR产物的Tm平均值为90．54℃，HLA-B27阴性标本仅在87．82℃处存在β-珠蛋白的熔解曲线峰，而阳性标本则于87．82℃和90．54℃处出现两个熔解曲线峰，且△Tm约为2．72℃；②对120个已定型的标本，SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR法与传统的PCR—SSP（序列特异性引物）结果完全吻合；③健康志愿者、RF阳性患者和ANA阳性患者HLA-B27 DNA阳性率分别为2．6%（6／230）、3．7％（2／54）和5．6％（2／36）。结论：SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR法是一种快速、灵敏的HLA-B27基因分型方法，具有传统的PCR所不可比拟的优点，可取代传统的PCR法用于中国汉族人群的HLA-B27的基因分型，辅助强直性脊柱炎等脊柱关节病的诊断。     

肿瘤坏死因子α和白细胞介素6致脂肪细胞胰岛素抵抗的不同机制

细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分别作用于3T3-L1细胞6h和72h,观察对葡萄糖摄取和胰岛素信号转导的影响。两者作用72h抑制胰岛素刺激的葡萄糖摄取、胰岛素受体底物1 (IRS-1)酪氨酸及蛋白激酶B(PKB)磷酸化,并使IRS-1表达下降。TNF-α作用6h增加IRS-1丝氨酸307磷酸化。提示IL-6和TNF-α致胰岛素抵抗的作用机制不尽相同。     

实验诊断学实验教学改革初探

实验诊断学实验教学是实验诊断学教学中的一个重要组成部分，占整个教学课时的近1／2。长期以来实验课只是学生按照老师设定好的实验方案做，这样的实验教学有其可取之处：学生有既定的目标，实验结果明确便于解释，但却使学生这一主体始终处于被动服从地位，忽视了学生的积极参与作用，学生兴趣不大，甚至产生厌恶抵触情绪，使得教学效果并不理想。