清热消炎宁片治疗冠状病毒感染的作用及机制研究

目的 研究清热消炎宁抗冠状病毒的作用,为评价其防治冠状病毒感染提供实验依据。方法 雌雄各半的96只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、连花清瘟胶囊(0.546 g/kg)组和清热消炎宁片低、中、高剂量(8.72、17.44、34.89g/kg)组,每组16只。采用ip环磷酰胺联合HCoV-229E冠状病毒感染BALB/c小鼠,建立冠状病毒感染模型,通过小鼠体质量、肺指数、病毒载量、血凝滴度、肺组织病理改变来评价清热消炎宁的治疗作用;通过ELISA检测肺泡灌洗液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)水平;流式细胞术检测肺组织巨噬细胞、淋巴细胞(CD3⁺、CD4⁺)及NK细胞比例;Western blotting检测肺组织Toll样受体4(Toll-like receptor ...     

顶空毛细管气相色谱法测定奥拉西坦中乙醇、二氯甲烷和4-氯乙酰乙酸乙酯的残留量

目的建立奥拉西坦原料药中乙醇、二氯甲烷及4-氯乙酰乙酸乙酯残留量的测定方法。方法采用顶空毛细管气相色谱法,色谱柱为Rtx-5型毛细管柱,柱温采用程序升温(40℃保持2 min,以7.0℃·min-1的速率升温至120℃,保持2 min),检测器为氢焰离子化检测器,进样口温度为180℃,检测器温度为200℃,载气为氮气,柱流量为1.0 m L·min-1,分流比为5:1,顶空温度85℃,顶空时间为30 min,顶空进样体积为1 m L。结果 3种溶剂均获得基线分析,在考察的浓度范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率在95.1%~97.6%。结论该方法专属性强、重复性好、结果可靠,适用于奥拉西坦原料药中残留溶剂的测定。     

3，4，5，6-四羟基（口山）酮对缺氧／复氧所致PC12神经细胞凋亡的保护作用涉及DDAH／ADMA途径

目的 研究3，4，5，6-四羟基。（口山）酮对缺氧/复氧所致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞凋亡的保护作用与二甲基精氨酸-二甲胺水解酶（DDAH）/非对称性二甲基精氨酸（ADMA）通路的关系。方法 将体外培养的PC12细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组和3个剂量的。山酮（3、10、30μmol·L^-1）处理组。用hoechst33342染色和膜联蛋白V（Annexin V）＋碘化丙啶（PI）流式细胞仪法检测细胞凋亡率，用高效液相色谱（HPLC）法测定DDAH活性及ADMA的浓度；用活性氧及caspase-3试剂盒检测细胞内活性氧（ROS）生成及caspase-3活性。结果缺氧/复氧处理PC12神经细胞能增加ROS生成，降低DDAH活性，升高ADMA水平，激活caspase-3诱导细胞凋亡。外源性ADMA（3、10和30μmol·L^-1）能激活caspase-3并诱导PC12神经细胞凋亡。3，4，5，6-四羟基。（口山）酮（3、10和30μmol·L^-1）能抑制缺氧/复氧所致的PC12神经细胞凋亡，抑制ROS生成，增加DDAH活性，降低ADMA水平，抑制caspase-3活性。结论3，4，5，6-四羟基。（口山）酮对缺氧／复氧所致PC12神经细胞凋亡具有保护作用，其机制与抑制氧化应激调节DDAH/ADMA途径有关。     

两种类型内皮祖细胞的体外分化及非对称性二甲基精氨酸对其增殖的抑制作用

目的:研究人脐带血中两种类型内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)的体外分化特征及非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对其增殖的影响.方法:采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法联合分离脐带血中单个核细胞,在含有血管内皮生长因子和碱性纤维细胞生长因子的培养基中培养.通过形态学、免疫荧光、逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和流式细胞分析细胞的生长特点和生物学特征.在贴壁细胞中加入不同浓度的ADMA(1,5和10 μmol/L)作用不同时间(24,48和72 h),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和细胞克隆计数的方法评价ADMA对EPC增殖的影响.结果:贴壁细胞分为早期内皮祖细胞和晚期内皮祖细胞两种类型细胞.早期内皮祖细胞的形态从小的圆形细胞变成以集落为中心,周围呈发芽式向外生长的细胞群,晚期内皮祖细胞形成典型的"铺路石样".DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-acLDL)和FITC标记荆豆凝集素I(FITC-UEA-I)双染色阳性细胞初步鉴定为内皮祖细胞.RT-PCR提示随着培养时间延长,内皮特异性基因表达变化逐渐增强,流式细胞分析提示早期EPC有AC133,CD34和KDR表达;晚期EPC AC133不表达,CD34表达弱,KDR表达增强.MTY法提示早期EPC增殖能力弱,而晚期EPC增殖能力强;同时ADMA呈量效和时效减少EPC的数目和抑制它的增殖能力.结论:在人的脐带血中获得两种类型EPC,加入ADMA能抑制EPC的增殖,这为进一步研究ADMA对EPC的作用提供了实验基础.     

百两茶提取物对小鼠学习记忆能力的影响

目的:观察百两茶提取物对小鼠记忆力的影响。方法:采用小鼠灌胃给予不同剂量的百两茶提取物(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg),连续给药30天,末次给药后进行水迷宫试验,观察小鼠登台时间和记忆消退时间。实验完成后经小鼠内眦静脉采血后,行脑组织及肝脏取材,检测小鼠肝糖原LG)、肌糖原(MG)、超氧化物岐化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平。结果:1.百两茶提取物低、中、高剂量(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg)能明显缩短小鼠登台时间;高剂量(400 mg/kg)组能明显延长小鼠登台记忆消退时间。2.百两茶提取物低、中、高剂量(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg)能升高小鼠血中MG、LG的水平。3.百两茶提取物低、中、高剂量(100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg)能提高小鼠的SOD与GSHPx活性。结论:百两茶提取物能够改善小鼠学习能力。     

骨髓增殖性肿瘤动物模型和药物研发进展

骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasm,MPN)是临床上骨髓髓系细胞异常增生和进行性骨髓纤维化为特征的克隆性造血功能障碍疾病.费城阴性MPNs主要包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维化.基于其复杂的发病机制,目前已成功创建转染突变基因细胞移植、转基因和基因敲入等几种相关动物...     

下颌升支垂直/斜行骨切开术涉及骨性标志的测量分析

目的测量分析成年人下颌升支与垂直或斜行骨切开术相关的骨性标志。方法收集成年离体下颌骨标本105例(男54例,女51例)。测量下颌孔最下点、下颌孔后点与升支后缘的水平距离;并观察下颌孔最下点与下颌第二磨牙牙合平面的垂直向关系,翼肌粗隆最上点与下颌孔最下点的垂直向关系,以及下颌升支外侧隆突存在的比例。结果下颌孔最下点到升支后缘的平均距离男性为16.12mm,女性为16.03mm;最小距离男性为11.20mm,女性为10.68mm。下颌孔后点到升支后缘的水平距离男性为13.50mm,女性为13.60mm;最小距离男性为10.06mm,女性为10.18mm。90.17%的标本下颌孔最下点低于下颌第二磨牙牙合平面;85.34%的标本下颌升支翼肌粗隆最上点超越下颌孔最下点平面;72.41%的升支外侧隆突明显存在。结论下颌孔最下点及后点到升支后缘的水平距离男女相似,无性别差异。在下颌第二磨牙牙合平面水平距升支后缘8~10mm作骨切开线一般可以避开下齿槽神经血管束;升支内侧翼内肌附着有利于近心骨段的血液供应。     

小鼠循环肝癌细胞模型的建立与评价

目的 采用小鼠肝癌Hepa 1-6细胞建立小鼠肝癌循环肿瘤细胞（CTCs）模型。方法 采用雄性C57BL/6小鼠108只,按照体重分为3组,每组36只。3个组分别每只尾静脉接种0.2 mL的浓度为1×10⁶、5×10⁶和1×10⁷个/mL的小鼠肝癌Hepa 1-6细胞单细胞悬液。各组分别于接种后第1、5、9、13、17、21天检测采血,采用流式细胞术检测,计算2万个有核细胞中CTCs数目及比例、相对CTCs抑制率,记录动物死亡率。②采用雄性C57BL/6小鼠80只,按体重分为2组,分别为模型对照组、甲苯磺酸索拉菲尼组,每组40只。每只尾静脉接种0.2 mL的浓度为5×10⁶个/mL的Hepa 1-6细胞单细胞悬液,接种后第2天开始灌胃给予甲苯磺酸索拉菲尼（50 mg/kg）,连续21 d,并于给药第3、8、15、21天采血进行CTC检测。结果 ①接种浓度为1×10⁶个/mL的细胞悬液后,第1、5、9、13、17、21天的动物CTCs比例为：25.1%、18.1%、8.9%、4.4%、2.9%、0.3%,未出现动物死亡;接种浓度为5×10⁶个/mL的细胞悬液后,第1、5、9、13、17、21天的动物CTCs比例为：40.4%、35.4%、15.4%、9.0%、6.6%、4.1%,未出现动物死亡;接种浓度为1×10⁷个/mL的细胞悬液后,第1、5天的动物CTCs比例为：39.1%、33.5%,在接种完毕之后立即出现动物死亡,且所有动物在接种后第7天全部死亡。②甲苯磺酸索拉菲尼给药期间D₃、D₈、D₁₅、D₂₁相对循环肿瘤细胞清除率分别为：-7.5%、4.6%、55.3%、-94.5%,与模型对照组比较差异有显著性（P<0.05或P<0.01）。结论 采用浓度为5×10⁶个/mL小鼠肝癌细胞Hepa 1-6悬液尾静脉注射可建立小鼠肝癌CTC模型,可用于抑制循环肿瘤细胞药物的筛选与评价。     

脂联素与认知障碍的研究进展

脂肪细胞因子是一类由脂肪细胞分泌、具有广泛的生物活性的多肽或蛋白质。脂联素是一种具有胰岛素增敏作用的脂肪细胞因子,具有抗糖尿病、抗动脉粥样硬化和抗炎等作用。脂联素可参与并调控着认知障碍的发生、发展,被认为是一个新的认知障碍的调节因子。     

川东獐牙菜一个新酮的研究

目的研究川东獐牙菜(Swertia davidi Franch.)抗氧化活性成分。方法用柱色谱技术分离化学成分,利用UV,IR,NMR,MS等方法确证化合物结构,采用DPPH方法研究了7个酮类化合物的抗氧化活性。结果得到3个化合物,分别鉴定为:2,5-二甲氧基-1,4-二羧基苯(VIII);1,5,8-三羟基-3,4-二甲氧基酮(IX)和1,8-二羟基-3-(3′-羟基-丁氧基)酮(X)。结论X为新化合物,具有较强的抗氧化活性;VIII和IX为首次从该植物中分离得到。