| 两种类型内皮祖细胞的体外分化及非对称性二甲基精氨酸对其增殖的抑制作用 |
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| 引用本文： | 何晋,谢秀梅,姜德建,方叶青,陈晓彬.两种类型内皮祖细胞的体外分化及非对称性二甲基精氨酸对其增殖的抑制作用[J].中南大学学报(医学版),2008,33(2):138-145. |
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| 作者姓名： | 何晋 谢秀梅 姜德建 方叶青 陈晓彬 |
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| 作者单位： | 中南大学1.湘雅医院心内科， 长沙 410008； 2.药学院药理学系, 长沙 410078 |
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| 基金项目： | 湖南省教育厅重点学科项目 |
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| 摘 要： | 目的:研究人脐带血中两种类型内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)的体外分化特征及非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对其增殖的影响.方法:采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法联合分离脐带血中单个核细胞,在含有血管内皮生长因子和碱性纤维细胞生长因子的培养基中培养.通过形态学、免疫荧光、逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和流式细胞分析细胞的生长特点和生物学特征.在贴壁细胞中加入不同浓度的ADMA(1,5和10 μmol/L)作用不同时间(24,48和72 h),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和细胞克隆计数的方法评价ADMA对EPC增殖的影响.结果:贴壁细胞分为早期内皮祖细胞和晚期内皮祖细胞两种类型细胞.早期内皮祖细胞的形态从小的圆形细胞变成以集落为中心,周围呈发芽式向外生长的细胞群,晚期内皮祖细胞形成典型的"铺路石样".DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-acLDL)和FITC标记荆豆凝集素I(FITC-UEA-I)双染色阳性细胞初步鉴定为内皮祖细胞.RT-PCR提示随着培养时间延长,内皮特异性基因表达变化逐渐增强,流式细胞分析提示早期EPC有AC133,CD34和KDR表达;晚期EPC AC133不表达,CD34表达弱,KDR表达增强.MTY法提示早期EPC增殖能力弱,而晚期EPC增殖能力强;同时ADMA呈量效和时效减少EPC的数目和抑制它的增殖能力.结论:在人的脐带血中获得两种类型EPC,加入ADMA能抑制EPC的增殖,这为进一步研究ADMA对EPC的作用提供了实验基础.
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| 关 键 词： | 脐带血 内皮祖细胞 分化 非对称性二甲基精氨酸 增殖 |
| 文章编号： | 1672-7347（2008）02-0138-08 |
| 收稿时间： | 2007-07-24 |
| 修稿时间： | 2007年7月24日 |
Differentiation of 2 endothelial progenitor cells in vitro and inhibitory effect of asymmetric dimethylarginine on its proliferation |
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| HE Jin,XIE Xiu-mei,JIANG De-jian,FANG Ye-qing,CHEN Xiao-bin.Differentiation of 2 endothelial progenitor cells in vitro and inhibitory effect of asymmetric dimethylarginine on its proliferation[J].Journal of Central South University (Medical Sciences)Journal of Central South University (Medical Sciences),2008,33(2):138-145. |
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| Authors: | HE Jin XIE Xiu-mei JIANG De-jian FANG Ye-qing CHEN Xiao-bin |
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| Institution: | 1.Department of Cardiology, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410008; 2.Department of
Pharmacology,School of Pharmaceutical Sciences, Central South University,Changsha 410078,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | umbilical cord blood endothelial progenitor ceils differentiation asymmetric dimetylarginine proliferation |
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