TGF—β1和TIL在喉癌局部免疫反应中作用的研究

目的 :检测喉癌组织TGF β1的表达 ,分析TGF β1与喉癌临床指标的关系 ,明确TGF β1表达对TIL细胞浸润和局部免疫功能的影响。方法 :38例原发性喉癌标本 ,应用免疫组化SP法 ,检测喉癌组织CD3 、CD4 、CD8、CD57、CD68和CD2 5的浸润及TGF β1的表达 ;同时以 10例声带息肉做对照组。结果 :与对照组相比 ,喉癌组织TGF β1蛋白表达减少 ,且TGF β1表达与喉癌病人性别、年龄、临床分期及不同发生部位无关 ,随着恶性度的增高 ,TGF β1表达减少 ,淋巴结转移组TGF β1阳性率多于未转移组 ,TGF β1表达与CD4 细胞浸润无关 ,而与CD8浸润有显著正相关 ,TGF β1表达能诱发CD4/CD8比值倒置。结论 :喉癌组织TGF β1蛋白表达减少 ,TGF β1对喉癌细胞的生长可能起抑制作用 ,有利于肿瘤细胞的转移 ,通过影响CD8细胞的浸润 ,改变CD4/CD8比值 ,进而抑制肿瘤局部免疫功能。     

Aβ25-35致PC12细胞模线粒体损伤及人参皂甙对其影响

目的　探讨Aβ2 5-3 5致PC12细胞损伤后线粒体COX活性和ATP合成的改变及人参皂甙对它们的影响。方法　Aβ2 5-3 5损伤PC12细胞 ,人参皂甙处理前后紫外分光光度计测定线粒体COX活性 ,高效液相色谱仪测定线粒体能荷。结果　Aβ2 5-3 5损伤PC12细胞后 ,线粒体COX活性降低 ,线粒体ATP、ADP含量降低 ,人参皂甙能提高线粒体COX活性及ATP、ADP含量。结论　人参皂甙通过抗氧化作用可以减轻Aβ2 5-3 5致PC12细胞线粒体的氧化损伤。     

CD44和CD24在鼻咽癌细胞系HK-1中调控STAT3发生磷酸化的分子机制研究

目的 研究CD44和CD24在鼻咽癌细胞系HK-1中调控STAT3发生磷酸化的分子机制.方法 采用流式细胞仪对培养的鼻咽癌HK-1高分化NPC细胞进行分选以获得CD44 +/CD24+ HK1细胞及CD44-/CD24-HK1细胞,通过Western blot、MTT和肿瘤微球形成等实验,分析鼻咽癌阳性肿瘤细胞中P-STAT3的表达,以及STAT3被抑制剂Stattic沉默后,对CD44+/CD24+ HK1和CD44-/CD24-HK1细胞增值能力和肿瘤微球形成能力的影响.结果 鼻咽癌HK-1细胞中可以提取到34.7％的CD44 +/CD24+ HK1细胞和41.5％的CD44-/CD24-HK1细胞,CD44+/CD24+ HK1细胞比CD44 /CD24-HK1细胞表达磷酸化STAT3水平高.STAT3的抑制剂Stattic可以抑制CD44+/CD24+ HK1和CD44-/CD24-HK1细胞磷酸化STAT3的表达,MTT实验显示16μmol/L Stattic明显抑制CD44+/CD24+ HK1和CD44-/CD24-HK1细胞增殖,肿瘤微球形成实验表明Stattic可明显抑制CD44+/CD24+ HK1和CD44-/CD24-HK1细胞微球形成能力,即STAT3在CD44+/CD24+ HK1细胞增殖和鼻咽癌进程中发挥重要的作用.结论 CD44和CD24在鼻咽癌侧群细胞HK-1细胞中,CD44 +/CD24+阳性细胞通过诱导STAT3发生磷酸化来促进鼻咽癌发展,为鼻咽癌肿瘤干细胞的靶向治疗提供了新的靶点,临床治疗可靶向抑制STAT3的表达,从而抑制CD44+/CD24+ HK1细胞增殖和肿瘤微球的形成,最终达到降低鼻咽癌的发生率.     

喉癌中脉管生成相关因子与微血管密度和淋巴管密度的关系及临床意义

目的探讨喉癌组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)、环氧化酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)的表达与微血管和淋巴管密度的关系。方法通过免疫组化SP法对64例声门上型喉癌标本中HIF-1α、COX-2与微血管密度(microvessel density,MVD)CD34标记及微淋巴管密度(lymph vessel density,LVD)D2-40标记进行了检测。结果喉癌中HIF-1α及COX-2蛋白阳性表达率分别为67.18%(43/64)、70.31%(45/64),MVD为36.79±8.48,LVD为9.68±6.35。喉癌HIF-1α、COX-2表达阳性者的MVD及LVD明显高于阴性者。喉癌中HIF-1α和COX-2之间存在相关性(r=0.492,P<0.05)。颈淋巴结转移组中HIF-1α、COX-2阳性表达率(χ2分别为6.615、5.534、P<0.05)及MVD和LVD(t分别为5.58、7.43,P<0.05)明显高于非转移组,差异有统计学意义。结论 HIF-1α、COX-2可能参与喉癌的血管及淋巴管生成,HIF-1α可能通过调节下游基因的表达,在喉癌血管及淋巴管生成中发挥重要作用,共同参与喉癌颈淋巴结转移过程。     

小RNA干扰细胞周期蛋白Y基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

目的 利用RNA干扰技术下调细胞周期蛋白Y(Cyclin Y,CCNY)基因的表达,观察其对喉癌Hep-2细胞增殖的影响.方法 构建针对CCNY基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,包装慢病毒感染喉癌Hep-2细胞.将细胞分为2组,对照组和实验组(感染CCNY shRNA慢病毒组).运用Real-time PCR检测CCNY在RNA水平的变化;四甲基偶氮唑蓝法和平板克隆形成实验检测CCNY表达下调对细胞增殖的影响.结果 成功包装表达CCNYshRNA的慢病毒并感染Hep-2细胞,shRNA下调CCNY的表达后,与对照组相比CCNY在mRNA水平的表达显著下降,抑制率为75.3％ (P ＜0.05).表达CCNY shRNA的慢病毒感染5d后,继续培养6d,细胞的生长明显受到抑制(P ＜0.001).细胞在体外培养10 d后形成克隆的潜力降低了60％.结论 靶向CCNY基因RNA干扰能够阻抑喉癌Hep-2细胞的CCNY表达,抑制细胞增殖,CCNY基因有望成为喉癌基因治疗靶点.     

头颈部游离组织瓣血管危象的预防和处理

目的探讨头颈部游离组织瓣术后血管危象的预防和处理方法。方法2003年3月～2008年4月我科96例游离组织瓣移植术后危象发生13例。回顾性分析危象发生时间,危象类型,皮瓣类型,吻合血管选择,血栓病理观察,处理过程和抢救成功率。结果13例中,保守处理成功5例。剩下8例中,动脉危象为1例,静脉危象6例,动静脉危象1例;前臂瓣2例,腹直肌3例,股外侧皮3例。首次发生危象时间分别在术后2小时～6天,平均34小时。8例中,4例系连续两次抢救,最终抢救成功4例,失败4例。结论术前认真选择适应证和规范的吻合技术是减少危象的关键;早期发现和掌握抢救技巧提高抢救成功率的关键。     

面中区恶性肿瘤80例手术缺损的修复

Objective To evaluate the reconstructive methods of outcome of midface defects following the removal of malignant neoplasms. Methods Eighty cases (54 males, and 26 females, age ranging from 23-79, with a median age of 53.5 years) ,of midface malignant tumors from 1997-2006 in Beijing Tongren Hospital were retrospectively reviewed. The clinical data including the type of midface region defects,reconstructive methods and the therapeutic outcome were analyzed. Of the 80 patients,6 cases were with type Ⅰ ( external nasal ) defect,56 with type Ⅱ (maxillary) defect, 14 with type Ⅲ (naso-facio-maxillary)defect and 4 with type Ⅳ ( maxillary defect combined with naso-facio-orbital cutaneous deficiency). Results The defects after the removal of malignant tumors were repaired with pedicle tissue flaps in 31 cases and free tissue flaps in 49 cases, respectively, one-stage reconstruction accounting for 73 cases (91.2%). KaplanMeier analysis showed total 3-year and 5-year survival rates were 63.8% and 40. 6%, respectively.Conclusions One-stage reconstruction is a satisfactory method for the repair of midface defect after the removal of malignant tumor, with good clinical outcome. Selection of repair methods should be based on defect types.     

经口CO2激光手术治疗下咽癌

率82.1%,5年喉功能保存率87.0%.术后局部区域复发7例,行挽救性手术及放射治疗6例,最终4例因再次复发死亡,2例存活;同时伴远处转移1例,行放化疗后未控制死亡.非肿瘤死亡1例.2例患者出现较轻并发症,保守治疗后好转.除1例接受挽救性喉下咽手术患者外,其余存活17例患者均保留喉功能.结论 CO2激光治疗下咽癌是一项可行的治疗方案,酌情行择区性或改良性颈淋巴清扫和术后放射治疗可获得满意疗效及喉功能保存率.     

喉癌组织中HIF-1α和COX-2及VEGF与微血管密度的关系及临床意义

目的:探讨喉癌患者中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧合酶-2(COX-2)与血管内皮生长因子(VEGF )表达水平与喉癌血管生成的关系及临床意义.方法:通过免疫组织化学SP法对 64例喉癌标本中HIF-1α、COX-2与VEGF及微血管密度(MVD)进行了检测.结果:喉癌中HIF-1α、COX-2蛋白及VEGF的阳性表达率分别为65.63 %(42/64)、68.75%(44/64)和71.88(46/64),MVD为35.79±9.49.喉癌HIF-1α、COX-2和VEGF与MVD表达均呈正相关(P<0.05).喉癌中HIF-1α和COX-2与VEGF之间存在正相关性(P<0.05).在有淋巴结转移的肿瘤中HIF-1α、COX-2和VEGF阳性表达及MVD明显高于非转移组(P<0.05).结论:HIF-1α、COX-2和VEGF参与喉癌的血管生成,HIF-1α通过调节下游基因的表达(COX-2及VEGF),在喉癌血管生成中发挥重要作用,共同参与喉癌颈淋巴结转移过程.