严重烧伤大鼠血清对脂肪间质干细胞生物学特性的影响

目的 探讨严重烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响.方法 取雄性SD大鼠双侧腹股沟脂肪组织,采用胶原酶消化法、分离纯化大鼠ADSCs,取第3代细胞,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物,行成脂成骨诱导分化鉴定;ADSCs传代后按随机数字表法分为10％胎牛血清组(正常培养组)、10％正常大鼠血清组,10％烧伤大鼠血清组,采用噻唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长曲线.通过流式细胞仪检测各组细胞的生长周期、Real-time PCR法检测各组细胞血管内皮生长因子(VEGF)、凋亡相关因子Caspase-3的表达情况.结果 分离培养的ADSCs传至第3代时形态规则,经流式细胞仪检测,所培养的ADSCs均表达CD29、CD90、CD105,阳性率分别为88.6％、99.7％、92.8％,而CD31、CD34、CD45阳性率分别为4.4％、4.7％、3.3％;经诱导培养后可向成骨成脂分化.MTT法检测结果显示:10％烧伤大鼠血清组细胞增殖较快,各时间点吸光度值(A值)明显高于10％胎牛血清组及10％正常大鼠血清组.流式细胞仪检测结果显示:培养1周后10％烧伤大鼠血清组、10％正常大鼠血清组、10％胎牛血清组ADSCs G1期细胞比例分别为:(72.20±5.13)％、(83.50±4.74)％、(90.20±6.37)％;S期细胞比例分别为:(21.40±2.84)％、(12.50±1.96)％和(8.60±1.31)％,10％烧伤大鼠血清组ADSCs G1期细胞比例显著低于10％正常大鼠血清组、10％胎牛血清组(t=2.39、4.86;P ＜0.05);10％烧伤大鼠血清组ADSCs S期细胞比例显著高于10％正常大鼠血清组、10％胎牛血清组(=5.54,7.93;P＜0.01).Real-Time PCR检测结果显示:10％烧伤大鼠血清组VEGF的表达明显上调,Caspase-3表达显著下调与10％正常大鼠血清组、10％胎牛血清组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 10％烧伤大鼠血清可明显促进ADSCs的增殖、抑制细胞凋亡发生、促进ADSCs的分泌功能,严重烧伤后可望移植ADSCs用?     

Smad交互蛋白1在增生性瘢痕组织中的表达及其对纤维化相关因子的影响

目的研究Smad交互蛋白1（SIP1）在人增生性瘢痕组织中的表达及其对纤维化相关因子的影响。方法收集临床整形手术切取的9例患者增生性瘢痕标本及其自体正常皮肤标本。分离培养原代人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFBs）,取第3-5代细胞用于实验。（1）免疫组织化学法检测增生性瘢痕组织标本及其自体正常皮肤组织标本中SIP1的表达情况。（2）真核表达质粒pcDNA3.1（＋）/SIP1转染HSFBs。按照随机数字表法将细胞分为6组：对照组;pcDNA3.1（＋）组（空载体组）;pcDNA3.1（＋）/SIP1组;对照＋TGF-β1组;pcDNA3.1（＋）＋TGF-β1组;pcDNA3.1（＋）/SIP1＋TGF-β1组。于转染后第48 h和72 h分别提取细胞总RNA和细胞总蛋白。应用实时荧光定量PCR法检测各组细胞α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及结缔组织生长因子（CTGF）的mRNA表达水平;采用Western-blotting检测α-SMA的蛋白表达水平。结果 （1）免疫组织化学染色结果显示：增生性瘢痕组织中SIP1表达明显低于自体正常皮肤组织。（2）pcDNA3.1（＋）/SIP1转染HSFBs后纤维化相关因子的表达：①α-SMA的mRNA和蛋白表达水平：与对照组和pcDNA3.1（＋）组相比,pcDNA3.1（＋）/SIP1组在mRNA和蛋白表达水平均显著下调,差异有统计学意义（P〈0.05）。当细胞给予TGF-β1刺激后,各组α-SMA表达均上调,但pcDNA3.1（＋）/SIP1＋TGF-β1组mRNA和蛋白表达水仍低于对照＋TGF-β1组,差异有统计学意义（P〈0.05）。②CTGF的mRNA表达水平：与对照组和pcDNA3.1（＋）组相比,pcDNA3.1（＋）/SIP1组在mRNA表达水平显著下调,差异有统计学意义（P〈0.05）。当细胞给予TGF-β1刺激后,各组CTGF表达均显著上调,但pcDNA3.1（＋）/SIP1＋TGF-β1组mRNA表达水仍低于对照＋TGF-β1组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论与正常皮肤组织相比较,SIP1在增生性瘢痕组织中低表达。SIP1基因转染HSFBs可降低纤维化相关因?     

臀上动脉穿支分叶肌皮瓣在骶尾部脊索瘤切除后创面修复中的应用

目的评价应用臀上动脉穿支分叶肌皮瓣在骶尾部脊索瘤切除后创面修复中的临床疗效。 方法选择2017年1月至2019年12月于空军军医大学西京医院烧伤与皮肤外科应用臀上动脉穿支分叶肌皮瓣修复骶尾部脊索瘤切除后创面的11例患者。所有患者均为骶尾部脊索瘤术后创面感染伴脑脊液漏,患者骶尾部软组织缺损范围为10 cm×7 cm～21 cm×11 cm,后腹膜形成死腔范围为12 cm×6 cm～24 cm×14 cm;皮瓣设计均以髂后上棘与大转子连线中上1/3为旋转点,其连线为皮瓣轴线,术前均采用超声多普勒血流探测仪确定穿支位置,术中所有患者均采用臀上动脉穿支分叶肌皮瓣修复,设计切取穿支皮瓣11 cm×8 cm～22 cm×12 cm,分叶臀大肌肌瓣13 cm×7 cm～25 cm×15 cm,其中穿支皮瓣修复骶尾部皮肤缺损坏死,分叶肌瓣填塞脊索瘤切除后后腹膜死腔。术后常规给予敏感抗生素抗炎、对症及支持治疗。术后患者尽量保持俯卧位或侧卧位,减少皮瓣受压。密切观察肌皮瓣血运变化及2根引流管引流情况并每日记录。观察术后患者肌皮瓣成活情况及平均住院时间,门诊或电话随访,观察患者移植皮瓣外形及供瓣区周围瘢痕情况,供瓣区切取后是否遗留明显功能障碍。 结果本组11例患者术后皮瓣均存活良好,创面均得到有效修复,外形无臃肿,局部无破溃,平均住院时间为12 d。9例皮瓣缝合边缘Ⅰ期愈合,2例出现缝合口局部窦道形成,少量脑脊液外漏,经门诊换药后痊愈。门诊或电话随访平均8个月,供瓣区切口无明显瘢痕增生,有3例患者主诉上楼梯和伸胯动作时有部分功能障碍,但所有患者未诉在平地上行走时出现明显异常。 结论臀上动脉穿支分叶肌皮瓣解剖恒定、血液供应良好,手术方法简单、安全,是修复骶尾部脊索瘤切除后皮肤软组织缺损创面及脑脊液漏的一种有效、可靠的方法。     

封闭负压引流联合局部氧疗对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的影响

目的 观察封闭负压引流(negative pressure wound therapy,NPWT)联合局部氧疗对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的影响.方法 以腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病SD大鼠模型,并在其背部用蒸汽喷头制作皮肤烫伤模型.将90只糖尿病背部烫伤SD大鼠随机分为糖尿病烫伤对照组(A组)、NPWT治疗组(B组)和NPWT联合局部氧疗组(C组),每组30只,并给予相应处理.伤后7d、14d和21d测量创面愈合率并留取标本进行常规病理检查,并以Western blotting实验检测创面组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况.结果 B组和C组在伤后7d、14d和21 d时创面愈合率及VEGF蛋白表达量均高于A组(P＜0.01) C组伤后7d和14d时创面愈合率及VEGF蛋白表达量高于B组(P＜0.01).病理检查提示C组大鼠创面炎性反应较轻,肉芽组织和上皮细胞生长速度较快.结论 与单纯NPWT治疗相比,NPWT联合局部氧疗能促进创面组织内新生血管的生长,提高创面愈合效率,使创面愈合时间明显缩短.     

成年大鼠许旺细胞快速扩增的改良方法

目的对三种来源不同的神经组织进行许旺细胞（SCs）培养，比较其纯度、增殖能力，以找到一个快速获取大量SCs的方法。方法取成年大鼠预变性坐骨神经、成年大鼠新鲜坐骨神经、新生大鼠坐骨神经，使用低浓度胰酶快速消化法结合差速贴壁法分别进行SCs培养，进行形态学观察、S-100免疫细胞化学鉴定，检测并比较各组SCs纯度及增殖能力。结果各组细胞生长状态良好，S-100染色阳性，SCs纯度分别为：成年预变性组98％，成年新鲜组92％，新生大鼠组93％。各组SCs生长曲线表明预变性组细胞较新鲜组及新生组SCs增殖旺盛。结论成年大鼠预变性坐骨神经制作取材方便、细胞量充足，纯度高、细胞增殖旺盛，可以被用作细胞生物学研究及组织工程等研究。     

足底内侧游离皮瓣整复手掌电烧伤创面及瘢痕挛缩的疗效

目的探讨足底内侧游离皮瓣整复手掌电烧伤创面及瘢痕挛缩的疗效。方法采用回顾性观察性研究方法。2020年1月—2023年1月, 空军军医大学第一附属医院收治6例符合入选标准的手掌电烧伤创面或瘢痕挛缩患者, 其中男5例、女1例, 年龄35～55岁。手掌电烧伤创面清创后及瘢痕切除后创面面积为5.0 cm×3.0 cm～8.0 cm×7.0 cm。均采用吻合皮神经的足底内侧游离皮瓣整复创面, 皮瓣面积为5.5 cm×3.5 cm～8.5 cm×7.5 cm。移植腹部全厚皮修复皮瓣供区创面。术后观察皮瓣和皮片存活情况, 随访观察皮瓣外形、质地及皮瓣供区情况, 评估患手握持功能恢复情况。于末次随访时, 测量皮瓣两点辨别觉距离并按照中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准评定皮瓣感觉恢复情况, 采用皮瓣术后功能评价量表评价皮瓣功能恢复情况。结果术后5个皮瓣存活良好;1个皮瓣远端部分坏死, 清创后移植大腿外侧中厚皮修复。皮瓣供区皮片均存活良好。随访3～24个月, 皮瓣不臃肿, 质地、色泽好, 与周围组织匹配度高;皮瓣供区无明显瘢痕挛缩发生;患手握持功能良好。末次随访时, 皮瓣两点辨别觉距离为6～8 ...     

43例慢性创面的外科治疗

慢性创面泛指创面愈合过程受到各种因素的干扰,愈合过程延长并超过6～8周.引起慢性创面的原因多种多样,临床常见有褥疮、糖尿病皮肤溃疡、静脉性溃疡、烧伤或外伤后残余创面、放射性溃疡、癌性溃疡等.较大较深的慢性创面往往无法通过换药等保守疗法获得愈合,需要外科手术治疗.     

持续负压灌洗引流在糖尿病足合并足底脓肿清创术中的应用

目的 了解早期清创结合持续负压灌洗引流在糖尿病足合并足底脓肿患者保肢手术中应用的可行性.方法 糖尿病足合并足底脓肿患者10例共10只患足,实施手术清创后留置胃管进行持续负压灌洗引流7～14 d,停止灌洗后维持负压吸引3～5 d,拔除引流管,术后3周左右拆线.观察创面愈合情况. 结果经上述处理,患者局部炎性反应明显减轻,创面愈合,足部功能恢复良好,外形不受影响. 结论清创术结合局部持续负压灌洗引流,有利于糖尿病足合并足底脓肿的治疗,可保留患肢原始长度.