术前前白蛋白含量在评估肝癌患者肝切除术后远期预后中的价值

目的 明确肝切除术后肝癌患者远期预后的影响因素,探讨术前血浆前白蛋白(PA)含量在评估肝癌患者肝切除术后远期预后中的价值.方法 回顾性分析第二军医大学东方肝胆外科医院2011年12月-2012年3月期间施行肝切除术的原发性肝癌患者病例资料及随访资料,用单因素及多因素Cox回归分析法分析术前多项指标对患者总生存时间及术后复发的影响.根据术前血浆PA含量的临界值,分为低PA组(术前PA含量≤152 mg/L)和高PA组(术前PA含量＞152 m/L),用Kaplan-Meier法分析两组间预后的差异.结果 共373例行肝切除术的肝癌患者纳入本研究,中位生存时间32.3个月,中位肿瘤复发时间20.5个月.肿瘤大小(P=0.003)、TNM分期(P＜0.001)、术前血浆PA含量(P=0.034)、血管侵犯(P=0.027)是影响患者术后总生存时间的独立危险因素,TNM分期(P＜0.000 1)、术前血浆PA含量(P=0.002)、血管侵犯(P=0.048)是影响患者术后复发的独立危险因素.高PA组中位生存时间和中位复发时间分别为41.3个月和28.8个月,优于低PA组的31.7个月和14.4个月,两组间差异有统计学意义(P＜0.000 1).结论 术前血浆PA含量低是肝癌患者行肝切除术后总生存期和肿瘤复发的独立危险因素.     

术后经导管动脉化疗栓塞对肝内胆管细胞癌患者远期预后的影响

目的 评估术后经导管动脉化疗栓塞(pTACE)对肝内胆管细胞癌(ICC)患者远期预后的影响,并鉴别适合进行术后pTACE辅助治疗的ICC患者.方法 纳入2010年1月至2011年1 2月在第二军医大学东方肝胆外科医院接受根治性切除术治疗的114例ICC患者,通过单因素和多因素分析确定总生存期(()S)和无复发生存期(RFS)的独立危险因素.有l项及以上复发危险因素的患者被定义为高风险组(n=73),没有复发危险因素的被定义为低风险组(n=41),比较pTACE对这两组患者预后的影响.结果 多因素分析结果显示多发肿瘤(HR=3.515,95％CI:2.083～5.932,P＜0.00l)、肿瘤最大径＞5 cm(HR=2.050,95％CI:1.309～3.210,P=0.002)、微血管侵犯(HR=2.287,95％CI:1.104～4.736,P=0.026)、手术切缘阳性(HR=5.089,95％ CI.2.055～12.600,P＜0.001)和淋巴结转移(HR=2.880,95％CI:1.579～5.251,P=0.00l)是()S的独立危险因素;多发肿瘤(HR=2.752,95％CI:1.619～4.678,P＜0.001)、肿瘤最大径＞5 cm(HR=2.010,95％CI:1.298～3.113,P=0.002)和微血管侵犯(HR=3.857,95％CI:1.856～8.013,P＜0.001)是RFS的独立危险因素.虽然pTACE不是OS或RFS的独立预后因素,但pTACE可以改善高风险组患者的OS和RFS(P＜0.05).结论 具有术后复发危险因素的ICC患者可从pTACE中获益,应该建议接受pTACE治疗.     

AKR1B10联合GPC-3在肝细胞癌免疫组化诊断中的应用

目的：探讨AKR1B10和GPC-3联合应用在提高肝细胞癌（HCC）免疫组化诊断敏感性和特异性的价值。方法：制备75例HCC组织芯片作为训练集,进行AKR1B10和GPC-3免疫组化,建立Logistic回归诊断模型,以此构建ROC曲线（受试者工作特征曲线）,利用其AUC(曲线下面积)对单个指标和联合指标的敏感性和特异性进行评估。将Logistic回归诊断模型用于200例HCC的测试集中,检测其有效性。 结果：1.训练集中,AKR1B10和GPC-3的AUC分别为0.773和0.800,联合诊断后的AUC提高至0.931;AKR1B10和GPC-3的敏感性分别为56%和61.3%,特异性均为98.7%,两者联合后的敏感性提高至88%,特异性为97.3%。2.测试集中,AKR1B10联合GPC-3对HCC诊断的敏感性和特异性分别为97%和96.5%。结论：AKR1B10联合GPC-3明显提高了HCC免疫组化诊断的敏感性和特异性,应在常规病理外检中合理组合使用。     

肝脏组织脱水流程及试剂更换改进方法

病理组织脱水是重要环节之一,组织脱水合理,效果事半功倍。由于不同部位组织特性不同,应用统一程序往往会影响处理质量,因此,不同特性组织应选用不同程序处理。肝脏组织实质细胞多,间质细胞数量少、细胞间隙大、质地较脆,表面覆以致密结缔组织被膜[1],并富含弹性纤维,处理不当,切片易脆、碎、皱褶、产生碎屑等问题[2]。作者通过5年的实践摸索,处理约5万例标本,得出一套适用于肝脏组织的脱水流程和试剂更换方法,效果较理想,现介绍如下。     

肝门部胆管癌神经侵犯裸鼠动物模型的建立

目的建立裸鼠肝门部胆管癌原位种植瘤神经侵犯模型。方法裸鼠全身麻醉后,逐层开腹,将胆管癌细胞系QBC939种植于裸鼠胆总管与门静脉组织间隙处,B超观察肿瘤生长情况,2周后处死裸鼠,肿瘤组织行病理学和S100免疫组化染色,观察神经侵犯情况。结果 B超显示肿瘤成功种植于肝门部,原位种植成瘤率为100%(10/10);肿瘤细胞呈侵袭性生长,腹膜后淋巴结肿大,肿瘤组织内神经侵犯率达80%。结论裸鼠肝门部胆管癌原位移植瘤及神经侵犯模型的建立,为研究胆管癌的神经侵犯机理以及探讨胆管癌防治策略提供了理想的工具。     

肝母细胞瘤临床病理学特征及微卫星变异特点意义分析

目的:肝母细胞瘤(hepatoblastoma,HB)是罕见的肝脏恶性肿瘤,其生物学特性在不同患者中表现不同.本研究通过对HB的临床病理特点及基因组微卫星变异特征的分析,探讨其在评估HB生物学特性中的意义.方法:选取第二军医大学东方肝胆外科医院1983-01-01-2013-12-31收治的＜18岁且经手术切除的HB患者50例.分析50例患者的临床、生化参数和病理参数,采用显微切割法分离并提取33例HB组织和配对周边肝组织的DNA,采用PCR-SSCP方法,检测10个微卫星的变异特点,统计分析各参数之间的相关性.结果:50例HB患者,男性患者较女性的分期更差,P=0.015;TNM为Ⅲ/Ⅳ期的患者血清AFP≥1 000 μg/L的比例(92.9％)显著高于Ⅱ期患者(59.1％),P=0.004;有瘤栓形成患者的血清AFP≥1 000 μ.g/L的比例(100.0％)显著高于无瘤栓患者(70.3％),P=0.026;单纯胎儿型HB血清AFP＜1 000 μg/L的比例(33.3％)显著高于其他类型(8.7％),P=0.036;有卫星灶的HB同时有瘤栓形成的比例(61.5％)显著高于无卫星灶(13.5％),P=0.001;上皮间叶混合型HB直径≥10 cm的比例(100.0％)明显高于其他类型(50.0％),P=0.009.HB发生11p15.5附近微卫星变异的频率为60.6％(20/33),其中14例(70.0％)HB呈肝表面外生性生长,明显高于未发生微卫星变异(30.1％),P=0.038.TNM分期为Ⅱ/Ⅲ级的HB中,微卫星杂合性缺失率(54.4％)明显低于Ⅳ期(100.0％),P=0.013.结论:患者男性、TNM分期Ⅲ/Ⅳ级、瘤栓形成、微卫星变异、外生生长和血清AFP≥1 000 μg/L等可能是导致HB恶性生物学行为的主要因素.     

小肝癌与不典型增生结节的差异糖蛋白筛选及其聚糖结构鉴定

 目的 筛选不典型增生结节(dysplastic nodule, DN)和小肝癌(small hepatocellular carcinoma, sHCC)之间的差异糖蛋白,并分析其聚糖结构,为肝癌的早期诊断提供参考。方法 对DN和sHCC各15例的石蜡组织切片进行蛋白质修复和提取;运用定量蛋白质组学技术鉴定DN和sHCC中的差异糖蛋白;利用IPA分析差异糖蛋白功能与相关信号通路,筛选出与肿瘤相关的差异糖蛋白;纯化目标糖蛋白,优化抗体辅助凝集素芯片技术(antibody overlay lectin microarray)分析其聚糖结构。结果 本研究共鉴定到26个差异糖蛋白;IPA分析筛选得到肿瘤相关的重要差异糖蛋白为α-1 抗胰蛋白酶(α-1-antitrypsin,A1AT)和补体C3;相比于DN,sHCC中A1AT与凝集素CAL、GSL I、JAC、GSL II、PHA-L、GNL、WGA等亲和的聚糖结构增多,C3与CSL、LTL、WFL亲和的聚糖结构增多,此结果说明在sHCC中,A1AT的T/Tn抗原、三/四天线的N-聚糖结构、高甘露糖和唾液酸等结构的含量增加;而C3的N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)、Lewis X 抗原［Fucα3(Galβ4)GlcNAc］、H-type 2 抗原［Fucα2(Galβ4)］和半乳糖β(1,3/1,6) 连接N-乙酰半乳糖［Galβ3(-6)GalNAc］结构增多。结论 在DN和sHCC中,A1AT、C3聚糖结构的变化可能为肝癌早期诊断提供新的糖生物学标志物。     

Galectin-4蛋白在肝细胞癌中特异性高表达

目的探讨Galectin-4蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学En Vision法检测Galectin-4在300例HCC和41例3种肝脏良性肿瘤中的染色特点及表达情况。结果 Galectin-4主要在HCC细胞质着色,在3种良性肿瘤不着色或极少着色。HCC和3种肝脏良性肿瘤中Galectin-4的阳性表达率分别为82.7%(248/300)和0.0%(0/41)(P=0.000),Galectin-4与血清AFP联合检测HCC的阳性率达95%。Galectin-4的表达与HCC肿瘤分期相关,与其他临床病理学参数无关。结论 Galectin-4蛋白在HCC组织中特异性高表达,对HCC的诊断和鉴别诊断具有较高的价值。Galectin-4高表达可能提示HCC较好的肿瘤分期。