肿瘤坏死因子α促进烧伤后蛋白高分解代谢的潜在机制

骨骼肌蛋白高分解代谢导致的骨骼肌消耗是一种常见的骨骼肌病变,在肿瘤、慢性肾病、脓毒症及烧伤患者中较为常见。研究发现肿瘤坏死因子α(TNF-α)是骨骼肌高分解代谢的重要调控因子,骨骼肌细胞凋亡可能是骨骼肌蛋白高分解代谢的重要机制之一,而TNF-α又可诱导骨骼肌细胞凋亡。本文将简要介绍TNF-α通过介导骨骼肌细胞凋亡而参与烧伤后骨骼肌蛋白高分解代谢的潜在机制。     

钙蛋白酶抑制剂对烧冲复合伤大鼠心功能的作用

目的探讨钙蛋白酶抑制剂对烧冲复合伤大鼠心功能的作用。方法 72只雄性SD大鼠随机分为3组各24只;对照组大鼠置于37℃水中12s;复合伤组大鼠采取爆炸+94℃水烫伤方法形成烧冲复合伤;钙蛋白酶抑制剂组大鼠以相同方法形成烧冲复合伤后,腹腔注射钙蛋白酶抑制剂MDL28170(24mg/kg)。于伤后24、48、72h分别取各组大鼠8只进行研究。测定不同时间大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室短轴缩短指数(left ventricular fractional shortening index,LVFS);检测血清肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)水平;Tunel染色法检测心肌组织细胞凋亡(计算凋亡指数);荧光光度法检测心肌组织中钙蛋白酶和caspase-3活性;原子吸收光谱仪测定心肌组织细胞Ca~(2+)水平。结果复合伤组大鼠24、48、72h时,以及钙蛋白酶抑制剂组48h时LVEF、LVFS均低于对照组(P0.05),复合伤组大鼠24h时LVEF与钙蛋白酶抑制剂组比较差异无统计学意义(P0.05),其余时间点LVEF、LVFS均低于钙蛋白酶抑制剂组(P0.05);复合伤组24、48、72h时cTnⅠ、CK-MB及钙蛋白酶抑制剂组24、48h时cTnⅠ、CK-MB均高于对照组(P0.05),复合伤组24h时cTnⅠ、CK-MB,以及48h时cTnⅠ,72h时CK-MB均高于钙蛋白酶抑制剂组(P0.05),其余时间点复合伤组cTnⅠ、CK-MB与钙蛋白酶抑制剂组比较差异均无统计学意义(P0.05);24、48、72h时钙蛋白酶抑制剂组、复合伤组心肌凋亡指数均高于对照组(P0.05),钙蛋白酶抑制剂组48、72h时心肌凋亡指数低于复合伤组(P0.05);复合伤组24、48、72h时以及钙蛋白酶抑制剂组伤后48、72h时心肌钙蛋白酶活性均高于对照组(P0.05),24h时心肌钙蛋白酶活性高于钙蛋白酶抑制剂组(P0.05);各时间点复合伤组和钙蛋白酶抑制剂组caspase-3活性均高于对照组(P0.05),48、72h时复合伤组高于钙蛋白酶抑制剂组(P0.05);复合伤组24h时心肌Ca~(2+)水平高于对照组和钙蛋白酶抑制剂组(P0.05)。结论钙蛋白酶抑制剂可通过抑制钙蛋白酶活性而减轻心肌细胞凋亡,改善烧冲复合伤后心功能。     

荧光定量PCR验证大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢高通量芯片中miRNA-30a表达及意义

目的探讨miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢中的表达及意义。方法建立严重烫伤大鼠模型,将16只大鼠分为实验组与对照组,每组各8只,于伤后72 h留取胫骨前肌标本。应用TRIZOL法抽提胫骨前肌中总RNA,采用丹麦锁核苷酸技术Exiqon miRCURYTMLNA microRNA芯片(第七代),约700条捕获探针,数据库版本为v.18.0,分别检测实验组与对照组胫骨前肌标本中miRNA-30a的表达水平,实时定量聚合酶链反应(PCR)验证以检验芯片数据的可靠性。结果芯片筛查结果显示,miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢中表达下调,而荧光定量PCR结果同样显示miRNA-30a表达降低。结论 miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢过程中表达下调明显,其作用机制需进一步研究证实。     

严重烫伤大鼠早期胫骨前肌组织中微小RNA表达谱数据的靶基因分析

目的初步确定严重烫伤大鼠早期胫骨前肌组织中差异表达微小RNA(miRNA)的靶基因,从而为进一步机制研究指明方向。 方法采用高通量芯片技术检测严重烫伤大鼠早期胫骨前肌miRNA表达谱数据,筛选部分差异明显且相关性较好的miNRA,包括miR-1-3p、miR-206-3p、miR-133a-3p、miR-22-3p、miR-30a-5p、miR-30d-3p、miR-190b-5p、miR-628和miR-678,利用互联网络检索数据库Mirbase、Miranda和Mirdb,对这些差异miRNA进行靶基因预测。 结果3大数据库预测结果显示差异miRNA主要调控79个靶基因,网络关系图显示了miR-1-3p、miR-206-3p、miR-133a-3p、miR-22-3p、miR-30a-5p、miR-30d-3p、miR-190b-5p、miR-628和miR-678等miRNA及其预测靶基因之间复杂的调控网络关系。 结论根据初步的预测结果,miR-1-3p和miR-206-3p共同调控的靶基因较多,可作为进一步机制研究的理论依据。     

不同补液量对重度烧冲复合伤犬脏器功能的影响

目的探讨烧冲复合伤休克期不同补液量对机体脏器功能的影响,从而明确烧冲复合伤休克期补液适当的补液量。方法将32只健康雄性比格犬建立Ⅲ度烧伤35%总体表面积并中度冲击伤的烧冲复合伤模型后,随机分为对照组、增量10%组、增量20%组、增量30%组,每组8只。对照组按Parkland公式进行补液治疗,增量10%组、增量20%组、增量30%组则分别在Parkland公式补液量基础上增加10%、20%、30%补液量,其补液速度亦相应分别提升10%、20%、30%,各时间段匀速补液。在伤前及伤后4、8、24、48 h时,分别通过Pi CCO心肺容量监护仪测量心输出量、血管外肺水指数;通过生化检验测量血清谷丙转氨酶、血肌酐、血尿素氮等;通过快速血气分析检测动脉血氧分压。通过尿路置管记录伤后24 h尿量,并计算尿输出量。结果伤后4 h,对照组、增量10%组、增量20%组和增量30%组尿输出量依次为(0.39±0.11)、(0.55±0.13)、(0.77±0.17)、(0.98±0.19)m L·kg-1·h-1,增量20%组和增量30%组均高于对照组(t=5.308、7.601)和增量10%组(t=2.908、5.283),差异均有统计学意义(均P<0.05);伤后24 h,四组尿量依次为(0.59±0.05)、(0.70±0.07)、(0.88±0.05)、(1.21±0.09)m L·kg-1·h-1,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、增量10%组、增量20%组和增量30%组伤后心输出量较伤前降低,4 h时分别为(1.25±0.17)、(1.36±0.17)、(1.57±0.19)、(1.72±0.19)L/min,增量20%组和增量30%组高于对照组,差异均有统计学意义(t=3.550、5.214,均P<0.05);伤后24 h,四组心输出量依次为(2.63±0.24)、(2.64±0.21)、(2.76±0.18)、(2.40±0.19)L/min,增量20%组高于增量30%组,差异具有统计学意义(t=3.890,P<0.05)。伤后对照组和增量30%组谷丙转氨酶高于增量20%组,伤后24 h(t=2.745、3.864)、48 h(t=5.080、6.869)和72 h(t=4.195、5.143),差异均有统计学意义(P<0.05)。伤后4 h和8 h时,增量20%组、增量30%组血尿素氮低于对照组,伤后4 h(t=4.372、7.429),伤后8 h(t=3.719、6.171),差异均有统计学意义(均P<0.05),增量20%组、增量30%组低于增量10%组,伤后4 h(t=3.519、6.508)、伤后8 h(t=3.922、6.835),差异均有统计学意义(均P<0.05)。伤后各组间血肌酐比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。四组伤后较伤前,血管外肺水指数均上升,动脉氧分压下降,组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论犬Ⅲ度烧伤35%总体表面积并中度冲击伤休克适宜的补液量应按Parkland公式补液量增量20%计算,即第一个24 h内4.8 m L·kg-1·h-1,第二个24 h内2 m L·kg-1·h-1,与Parkland公式补液量及增量10%相比,可在伤后早期显著改善尿输出量和心输出量,且不会引起肺水肿的加重;增量30%与增量20%相比,尿输出量提升过高,早期容量负荷过重。     

外源性肺泡表面活性物质对重度烧冲复合伤大鼠急性肺损伤的治疗作用

目的 观察外源性肺泡表面活性物质对重度烧冲复合伤大鼠急性肺损伤的治疗作用.方法 健康雄性SD大鼠180只,用随机数表法分为假伤组、治疗组、对照组各60只,每组致伤前0h及伤后6、24、48、72 h共5个观察时相点各12只.进行如下处理:(1)假伤组:脱毛12 h后,以3％戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔内注射麻醉,将背部脱毛区域置入37℃水中持续12s;(2)治疗组:参照既往大鼠重度烧冲复合伤模型,致伤后立即经气管插管滴注外源性肺泡表面活性物质即猪肺磷脂注射液2 ml/kg;(3)对照组:参照既往大鼠重度烧冲复合伤模型,致伤后立即经气管插管滴注等量的生理盐水2 ml/kg.分别于致伤前0h及伤后6、24、48、72 h监测大鼠动脉血氧分压(PaO2)及二氧化碳分压(PaCO2),测定各组大鼠肺功能,留取肺组织,行病理观察.结果 除去实验过程中的死亡损耗后,最终3组5个时相点分别均衡纳入8只大鼠进行统计学分析.PaO2:对照组6、24、48、72 h各时相点均显著低于假伤组[(69.55±5.11)、(62.05±6.54)、(53.24±7.65)、(50.00±7.45)比(93.75±3.41)、(94.25±2.19)、(93.63±2.33)、(93.25±1.83) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa),均P＜0.05];治疗组6h接近假伤组[(92.63±3.74)比(93.75±3.41)mmHg,P=0.594];对照组6h时即降至70 mmHg左右,随后逐渐下降,而治疗组各时相点均显著高于对照组[(92.63±3.74)、(87.50±3.34)、(78.75±3.11)、(71.38±3.74)比(69.55±5.11)、(62.05±6.54)、(53.24±7.65)、(50.00±7.45) mmHg,均P＜0.05].PaCO2:治疗组在6、24、48 h显著低于对照组[(45.50±6.79)、(49.38±7.52)、(54.13±4.82)比(53.25±2.76)、(59.50±6.61)、(63.60±7.33) mmHg,均P＜0.05],72 h时而治疗组与对照组均显著高于假伤组[(59.63±6.87)、(68.88±6.85)比(36.38±1.85) mmHg,均P＜0.05],而治疗组与对照组差异无统计学意义(P =0.051).治疗组深吸气量、中心气道阻力、肺顺应性及组织弹性在24h时显著优于对照组(均P＜0.05),与假伤组接近(P＞0.05);治疗组肺泡结构破坏程度以及肺出血、水肿程度均较对照组轻.结论 外源性肺泡表面活性物质对重度烧冲复合伤大鼠急性肺损伤具有明显的治疗作用,可改善氧合,减轻肺水肿及肺毛细血管膜的通透性.