PTEN对髓系白血病细胞VEGF及MMP表达的影响简

 目的 探讨在慢性髓系白血病中与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)对血管内皮生长因子(VEGF)及金属基质蛋白酶(MMP)相互影响及其作用机制。方法 1)研究10例慢性髓系白血病慢性期CML-CP、10例急变期CML-BC及10例正常人骨髓单个核细胞内PTEN、VEGF、MMP-2和MMP-9 mRNA表达水平变化。2)将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-PTEN-GFP）及对照载体腺病毒（Ad-GFP）转染人慢性髓系白血病细胞系K562。MTT检测细胞增殖;荧光定量PCR（FQ-PCR）检测PTEN、VEGF、MMP-2和MMP-9 mRNA水平变化,Western blot及明胶酶谱检测PTEN、p-Akt、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果 CML-BC患者中PTEN mRNA表达水平低于CML-CP及正常对照组(P<0.05),而VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA在CML-BC患者中均高于CML-CP及正常对照组(P<0.05)。以MOI=200转染K562细胞3d后Ad-PTEN-GFP组K562细胞内VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平均明显低于Ad-GPF组和未转染组(P<0.05),PTEN与VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平负相关,转染Ad-PTEN-GFP组与转染Ad-GFP组比较VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平分别降低4.80、5.88、5.72倍,p-Akt及VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平分别降低26.0、5.23、2.86、4.76倍。结论 PTEN基因可能通过抑制VEGF、MMP-2、MMP-9表达,抑制髓系白血病细胞血管新生及侵袭。     

高等医学院校设置《医疗纠纷防范》课程的探索

随着法制的逐步健全和医学模式的转变,人们生活质量、保健需求和法律意识逐步增强,医患矛盾日益凸现,目前已成为社会和百姓关注的热点。医患的权利和义务成为矛盾焦点,＂高额＂与＂死亡＂成为关键词[1]。特别是2010年7月1日实施《中华人民共和国侵权责任法》以来,对医务人员提出了更高要求。     

急性一氧化碳中毒患者心率变异性与心肌损伤程度的关系

急性一氧化碳中毒(ACOP)是急诊冬季常见的急症,可出现多种器官受损,而心脏是除了脑以外最常见的受损器官。心率变异性(HRV)是一种简便而又敏感的反映心脏自主神经调控的一种检测方法。HRV实质上是通过分析窦性心率间期(R-R间期)在不同的时间或状态下的变化,反映在窦房结水平自主神经对心率的调整。该指标是否与心肌损伤有关是近年来国内外广泛关注的问题之一。     

和厚朴酚抑制白血病U937细胞侵袭及血管新生作用

目的探讨和厚朴酚(HNK)对人白血病U937细胞侵袭及血管新生作用的影响及其可能的分子机制。方法应用不同浓度的HNK处理U937细胞不同时间,用MTT法检测HNK对细胞增殖抑制作用;基质黏附试验检测HNK对U937细胞黏附功能的影响;TranswellTM小室检测HNK对U937细胞侵袭抑制作用。实时定量PCR(qRT-PCR)检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA水平变化。ELISA检测HNK处理U937细胞后上清VEGF蛋白表达水平。结果 HNK对U937的体外增殖有显著抑制作用,呈剂量和时间依赖性。低浓度HNK能够抑制U937细胞的黏附及侵袭能力。不同浓度HNK处理U937细胞24 h后,细胞VEGF、VEGFR1及MMP-9表达水平呈剂量依赖性下调。结论 HNK可能通过抑制VEGF、VEGFR1及MMP-9表达,抑制U937细胞侵袭及血管新生功能。     

PTEN、VEGF、COX-2与JAK2 V617F突变阳性骨髓增殖性肿瘤血管新生

 目的:观察PTEN、VEGF、COX-2在JAK2 V617F突变阳性骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者骨髓中的表达与血管新生之间的相互关系。方法:收集保定市第一医院住院及门诊42例JAK2V617F阳性的MPN患者(初治组27例,治疗组15例),其中原发性血小板增多症(ET)17例,真性红细胞增多症(PV)10例,原发性骨髓纤维化(PMF)15例;此外,选取10例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者作为对照。Real-time PCR检测突变型与野生型JAK2比值。免疫组化检测患者及对照骨髓病理切片p-JAK2、PTEN、VEGF、COX-2的蛋白水平及CD105标记的微血管密度(MVD)。结果:初治患者p-JAK2、VEGF、COX-2及MVD水平明显高于对照组,而PTEN表达水平明显低于对照组。治疗组患者p-JAK2、VEGF、COX-2及MVD的水平明显低于初治组,但PTEN表达水平高于初治组。JAK2 V617F突变量与VEGF、COX-2及MVD呈正相关(P<0.05)。PTEN与VEGF及MVD负相关(P<0.05)。JAK2突变型与野生型比值≥0.5的患者p-JAK2、VEGF、COX-2及MVD均明显高于比值<0.5的患者,而PTEN与上述相反。结论:PTEN、VEGF、COX-2与JAK2 V617F共同参与了骨髓增殖性肿瘤患者血管新生。     

医疗纠纷防范关口前移与医学生课程设置的思考

随着人们对于医疗服务的技术与质量要求日益增长,人们法律意识和维权观念不断增强,医疗纠纷日渐增多。医学生在临床的学习中,由于从医经验少,法律法规知识掌握甚少,致使法律意识不强,导致患者不满而引发纠纷时有发生。因此,高等医学院校及早实施医疗纠纷防范教育是医学发展的必然趋势。将医疗纠纷防范教育,纳入在校医学教育课程,做到医疗风险防线教育关口前移,是行之有效的手段。     

新诊断2型糖尿病伴高尿酸血症的相关因素分析

目的 探讨新诊断2型糖尿病(T2DM)患者伴高尿酸血症(HUA)的相关因素.方法 选取新诊断T2DM患者158例,根据血尿酸(SUA)水平(男性SUA≥420 μmol/L,女性SUA≥360μmol/L),将其分为正常尿酸(NUA)组126例,HUA组32例.比较两组临床指标的差异.结果 新诊断2型糖尿病患者HUA患病率为20.3％,其中男性26.3％,女性11.1％;HUA组患者舒张压(DBP)、体质量指数(BMI)、腰围(WC)、甘油三酯(TG)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、24小时尿微量白蛋白(UAER)均高于NUA组(P＜0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于NUA组(P＜0.05),两组患者糖尿病病程、空腹血糖(FPG)、餐后2小时血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、收缩压(SBP)差异无统计学意义(P＞0.05).直线相关分析显示,TG、HDL-C、BMI、WC、DBP、SCr及UAER是高尿酸血症的影响因素(P＜0.01).结论 新诊断T2DM患者高尿酸血症与高血压、血脂异常、肥胖和肾脏病变相关.     

施他宁治疗肝硬化食管静脉曲张破裂大出血疗效及护理

施他宁是人工合成的环状十四肽生长抑素,其化学结构和生物效应与天然生长抑素相同.能选择性收缩内脏血管,使门脉压显著下降,侧支循环血流量显著减少,而由于其高度选择性,故在常规剂量下不会引起冠状动脉强烈收缩而产生心肌缺血等副反应[1],可用于治疗食管静脉曲张破裂出血.我科于1996年3月至1998年1月应用施他宁(瑞士雪兰诺大药厂生产)治疗食管静脉曲张破裂大出血患者14例,与应用垂体后叶素治疗患者16例进行了对照观察,效果显著.     

野生型PTEN基因增强青蒿琥酯抑制K562细胞的作用

 目的: 探讨野生型PTEN转染人白血病K562细胞系对青蒿琥酯敏感性的影响及其分子作用机制。方法: 将野生型PTEN以腺病毒为载体转染(感染复数为200)人白血病K562细胞(Ad-WT-PTEN),同时以转染空载体腺病毒(Ad)及未转染细胞为对照组,与青蒿琥酯(ART)联合作用,观察野生型PTEN增强青蒿琥酯抑制K562细胞的作用。根据IC₅₀计算PTEN对青蒿琥酯的增敏倍数。以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,real-time PCR检测PTEN 的mRNA水平,Western blot检测PTEN、蛋白激酶B(Akt)及磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白水平;caspase活性检测试剂盒检测caspase-3/7的活性。结果: Ad-WT-PTEN转染K562细胞后,对青蒿琥酯敏感性明显增加,依据IC₅₀计算增敏倍数为2.25倍。至第3天,Ad-WT-PTEN +ART组较Ad+ART组细胞活力下降、凋亡率升高。Ad-WT-PTEN转染K562细胞后PTEN 的mRNA及蛋白表达明显增加,p-Akt水平及caspase-3/7活性下调,以PTEN及青蒿琥酯联合作用组下调尤为明显。结论: 野生型PTEN可能通过降低K562细胞Akt磷酸化的水平,并增加caspase-3/7活性,增强细胞对青蒿琥酯的敏感性。