核辐射对机体的影响

机体受到一定剂量核辐射后会出现多个器官结构和功能的改变.本文综述了机体受到低剂量核辐射后出现的免疫细胞数量和功能变化,包括淋巴细胞总数和部分亚群数量、淋巴细胞转化率、血清免疫球蛋白含量以及单核细胞功能等变化.同时还综述了核辐射对内分泌及遗传的影响.     

免疫磁珠法分离人外周血CD4+CD25+调节性T细胞

目的 建立人外周血单个核细胞中CD4 CD25 调节性T细胞(regulatery T cells,Treg)免疫磁性细胞分离力(megnetic activated cell sorting,MACS),并鉴定其分离效率.方法 采用免疫磁珠两步法(即阴性分选和阳性分选2步)分离人周血单个核细胞中的CD4 CD25 调节性T细胞,首先采用生物素标记的鸡尾酒抗体和抗生物素标记的磁珠阴性分选CIM细胞,再用抗CD25 的磁珠阳性分选CD4 CD25 T细胞.分离后的细胞经抗体染色后再通过流式细胞仪检测其分离纯度;内因子染色检测其转录因子FOXV3的表达频率;台盼蓝染色检测细胞的存活率;3H-TdR掺入法检测其对CD4 CD25-T细脆殖抑制效应.结果 阴性分选CD4 T细胞的纯度为(92.2±1.7)%,阳性分选后CD4 CD25 Treg细胞的纯度(95.1±1.2)%.胞内因子染色FOXF3在CD4 CD25 Treg细胞中的表达率为(80.4±1.2)%,台盼蓝染色细胞存活率为(95.6±3.3)%.3H-TdR掺入法检测其对CIM CD25-T细胞具有明显的抑制作用.结论 采用免疫磁性细胞分离技术能够高效、快地得到一群纯度高并且细胞活力好的CD4 CIY25 Treg,为进一步研究其功能提供了方便.     

药物性肝衰竭100例临床特征分析

目的探讨药物性肝衰竭(drug-induced liver failure, DILF)患者用药情况、临床特征及预后。方法回顾性分析2016年4月至2018年3月100例DILF患者的用药史、基础疾病、症状、实验室检查、并发症及预后等。结果 100例DILF患者中女性多于男性,发病平均年龄(47.5±16.7)岁,平均潜伏期82.2 d。引起DILF主要的药物包括中药汤剂、解热镇痛药、中成药,而治疗感染性疾病(结核病除外)、皮肤病、结核病的药物位居前三位。DILF的分型以亚急性(57.0%)为主,临床分型以肝细胞损伤型(63.0%)为主。急性肝衰竭较亚急性肝衰竭预后差,差异有统计学意义(P=0.023)。100例患者临床治愈11例,临床好转37例,无效44例,死亡8例。在DILF患者中,治愈或好转组的AST、 TBil、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、国际标准化比率(INR)、血氨(AMMO)明显低于无效或死亡组(均P0.05),白蛋白、凝血酶原活动度(PTA)、总胆汁酸(TBA)、总胆固醇(TC)、血小板(PLT)明显高于无效或死亡组,差异有统计学意义(均P0.05)。DILF患者出现的并发症前三位分别为胸腹水、低钠血症和感染。与预后不良相关的因素为低钠血症、感染、肝性脑病、肝肾综合征、休克、出血,差异有统计学意义(P0.05)。结论 DILF起病急,并发症多且严重,预后不良,临床用药需加强管控并密切监测。     

癫痫患者心率变异性复杂度的多尺度熵分析

目的:研究癫痫疾病对心率变异性复杂度的影响,探索癫痫疾病的病理生理机制.方法:基于多尺度熵方法回顾性分析212例癫痫患者和212例健康对照清醒状态下相同时间段内4h的RR间期序列,并量化SampEn(样本熵)、Slope1-5(1～5连续5个尺度下SampEn值线性拟合的斜率)、Area1-5(5个SampEn值的总和...     

流式细胞术检测体内细胞毒效应方法的研究

目的 建立一种用流式细胞仪检测体内细胞毒效应的方法.方法 用不同浓度的羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞和非靶细胞,以1:1的比例混合靶细胞和非靶细胞,尾静脉回输小鼠,16h后取小鼠脾脏淋巴细胞,流式细胞仪检测CFSE标记靶细胞和非靶细胞的比例,测定体内被杀伤靶细胞的百分率.结果 荧光染料CFSE能有效标记靶细胞,16h后流式细胞仪能很好地检测到体内被杀伤靶细胞的百分率.结论 CFSE荧光染料标记靶细胞并结合流式细胞仪分析的方法能有效地检测到体内细胞毒效应,该技术有望在肿瘤免疫和移植排斥的体内监测中得到广泛应用.     

应用CompBeads建立流式多色分析补偿的方法

目的 探讨一种快速简便的流式细胞仪多色分析时的关键参数(荧光补偿)设置方法.方法 以BD CompBeads、实验样品(本实验为慢性乙型肝炎患者外周全血)分别与单克隆荧光抗体染色,结合流式细胞仪Diva软件调节细胞仪光电倍增管(PMT)电压,计算建立荧光补偿矩阵.同时以获得的参数设置仪器,运行慢性乙型肝炎患者外周全血6色荧光标记实验样品.结果 用CompBeads建立的补偿参数稳定可靠,能有效消除荧光光谱之间的交叉重叠.6色荧光标记实验样品检测的结果,可见细胞亚群分布清晰,荧光强度比例表达适当,与通常采用的实验样品单染色方法补偿结果一致(P>0.05).结论 该方法能快速方便进行流式细胞仪检测时仪器参数最佳化设置调整,在多色免疫标记流式检测中有较大的应用价值.     

基于survivin的肿瘤生物治疗研究进展

survivin是一种细胞凋亡抑制蛋白,属于IAP(inhibitor apoptosis protein)蛋白质家族。由于其独特的结构、特殊的组织学分布,成为肿瘤生物治疗领域的研究热点,已有大量研究证明其作为治疗靶点的有效性。本文着重综述survivin在肿瘤生物治疗策略中的研究进展。     

肝癌患者CD4+CD25+调节性T细胞的检测及其临床意义

背景与目的CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatoryTcells)在自身免疫耐受、移植和抗肿瘤应答中起着重要的作用,它们在肿瘤患者中的作用机制尚未阐明。本研究分析、探讨肝癌患者肿瘤组织和外周血CD4 CD25 调节性T细胞频率的临床意义。方法应用流式细胞仪分析肝癌患者的肿瘤组织、外周血和非肝癌对照组中单个核细胞(PBMCs)的CD4 CD25 调节性T细胞频率。结果肝癌患者外周血CD4 CD25 T细胞占PBMCs(6.9±2.8)%,肝癌组织CD4 CD25 T细胞占(6.7±1.6)%,均较对照组显著增高。并且CD4 CD25 T细胞的阳性率与淋巴结转移率和TNM分期存在相关性。淋巴结转移阳性和TNM分期越晚,CD4 CD25 T细胞的阳性率越高。结论CD4 CD25 调节性T细胞在肝癌患者中比例升高,可能是肝癌患者细胞免疫功能削弱的机制之一。     

基于HPV16肿瘤基因治疗载体的构建与鉴定

目的:构建基于人乳头状瘤病毒16型(human papilloma virus type-16, HPV16)的肿瘤基因治疗栽体,并鉴定其对Hela肿瘤细胞的转染活性.方法:利用昆虫杆状病毒表达系统表达病毒蛋白,在体外变性与复性过程中用病毒蛋白包装绿色荧光表达质粒EGFP形成治疗载体.透射电镜观察治疗栽体的结构,并转染Hela肿瘤细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染效率.结果:透射电镜观察证实病毒蛋白可自我组装成病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)的结构,在转染Hela肿瘤细胞后,荧光显微镜和流式细胞仪成功检测到荧光的表达.结论:基于HPV16的新型肿瘤基因治疗载体能成功转染Hela肿瘤细胞,为肿瘤的基因治疗策略提供了理想的工具.     

基于HPV16的新型伪病毒治疗MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的实验研究

目的 构建基于人乳头状病毒(human papilloma virus,HPV)16型的新型伪病毒,探讨对MRL/Ipr,小鼠狼疮性肾炎的治疗作用,为临床治疗系统性红斑狼疮提供实验依据.方法 将12只3月龄MRL/Ipr狼疮小鼠随机均分为治疗组和对照组,治疗前后测定尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体滴度.结果 治疗组小鼠治疗后的尿蛋白、血清尿素氮、肌酐及抗ds-DNA抗体均下降,与治疗前有显著性差异(P＜0.05),而对照组治疗前后无显著性差异(P＞0.05),并且治疗组小鼠的平均生存期比对照组明显延长(p＜0.05).结论 基于人乳头状病毒16型的新型伪病毒可显著改善MRL/Ipr小鼠的免疫状况和肾脏功能,提高平均生存期.该研究结果为临床治疗系统性红斑狼疮提供了新的启示.