雷帕霉素靶蛋白反义RNA真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达

目的构建雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的反义RNA真核表达载体，观察其对血管平滑肌细胞（VSMC）功能的影响。方法提取人VSMC总RNA，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）扩增mTOR基因cDNA序列，经pGEM-T载体克隆后双酶切，将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGP-C1，转染VSMC，Westernblot法检测反义表达载体对mTOR蛋白表达的影响，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果经RT-PCR获得664bp产物，T载体克隆后，酶切确定该片段为mTOR基因cDNA，进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-mTOR，测序证明序列正确后转染VSMC，证实其能够显著抑制mTOR蛋白产物表达，转染72h的mTOR蛋白产物表达抑制率达82％，S期细胞由15％降低为7％，凋亡细胞增至9％。VSMC增殖过程在Gx／Go期→S期受阻。结论成功构建mTOR基因的反义RNA真核表达载体。     

支链氨基酸东莨菪碱合用治疗肺性脑病34例疗效观察

临床资料：选择有慢性阻塞性肺病史的患者，急性加重期，由于呼吸衰竭、缺氧、二氧化碳潴留所致，出现嗜睡、神志恍惚，烦躁不安、昏迷、精神错乱等神经精神症状，均诊为肺性脑病。全部患者均为住院治疗患者。将其随机分为治疗组和对照组。治疗组34例，男14例，女20例，年龄在41～72岁之间，平均年龄52.4岁；对照组30例，男12例，女18例，年龄在43～69岁之间，平均年龄53．5岁。治疗方法：对照组给予抗感染、改善通气、强心、持续低流量吸氧、纠正酸碱平行失调与电解质紊乱等综合治疗；治疗组在上述治疗的基础上，加用14种氨基酸注射液250ml…     

单核吞噬细胞应答伤寒沙门菌的实验研究

目的 研究单核吞噬细胞应答伤寒沙门菌的机理。方法 采用体外培养的PMA分化的THP－1细胞，检测其内化和杀伤胞内伤寒沙门菌的活性，以及伤寒沙门菌诱导PMA分化的THP－1细胞产生TNF－α和IL－12的情况。结果 PMA分化的THP－1细胞内化和杀伤Vi阴性伤寒沙门菌的活性明显高于内化和杀伤Vi阳性伤寒沙门菌的活性。IFN－γ明显中此活性。伤寒沙门菌诱导PMA分化的THP－1细胞可以产生一定量的TNF－α和IL－12，然而，IFN－γ活化的PMA分化的HTP－1细胞产生TNF－α和IL－12的量明显增加。结论 伤寒沙门菌在单核吞噬细胞中的存活可能与Vi抗原的存在有关；IFN－γ在调节机体细胞免疫，防循伤寒沙门菌感染中起着重要的作用。     

甘草甜素和甘草酸单铵促进IL-2增强NK活性的研究

本实验采用乳酸脱氢酶释放法研究甘草甜素和甘草酸单铵对人外周血NK细胞活性的影响。结果表明,甘草甜素和甘草酸单铵本身无增强NK细胞活性的作用,但可明显促进IL-2增强NK活性,这种增强作用与甘草甜素和甘草酸单铵的浓度有关。     

不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导PBMC增殖和杀伤肿瘤细胞的影响

目的 研究不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导外周血单个核细胞(PBMC)增殖和杀伤肿瘤细胞的影响.方法 野生型NCI-H446细胞(Cw)和被3种IL-15基因分别转染的3种NCI-H446细胞(Cmp:被IL-15成熟肽基因转染;Cp:被原型IL-15基因转染;Csp:被信号肽换为IL-2信号肽的改型IL-15基因转染),用丝裂霉素(M)处理后(分别名为MCw、MCmp、MCp和MCsp)作为刺激细胞刺激健康志愿者的PBMC.对这些被刺激的PBMC,分别名为MCw-PBMC、MCmp-PBMC、MCp-PBMC和MC-sp-PBMC.台盼蓝拒染法计数细胞数,流式细胞术测定CD4 细胞和CD8 细胞百分率.在MCmp-PBMC,MCp-PBMC和MCsp-PBMC中,选择其细胞数和CD4 细胞和/或CD8 细胞百分率统计学上明显高于MCw-PBMC的作为效应细胞,MTT法测定它们对Cw的杀伤.结果 与MCw-PBMC相比,MCp-PBMC在细胞数、CD4 细胞和CD8 细胞百分率及对Cw的杀伤上,均显著提高(P＜0.05).结论 原型IL-15基因转染能提高NCI-H446细胞诱导PBMC增殖和杀伤野生型NCI-H446细胞的能力.     

复合微生物菌群处理垃圾渗滤液影响因素分析

目的研究渗滤液浓度、pH、投菌量和处理时间等因素对复合菌群处理渗滤液中有机物和氨氮效果的影响。方法以沈阳大莘填埋场渗滤液作为研究对象,构建处理渗滤液的高效复合菌群,以耗氧量(CODCr)和NH3-N为评价指标,测定复合菌群处理渗滤液的结果。结果该复合菌群适宜pH范围为6.5~8.5;最高可耐受CODCr为11 520 mg/L的渗滤液,在此浓度条件下最佳投菌量是5×105cfu/ml,且投菌量应与渗滤液浓度相适应;一般情况下处理2 d可达到较好效果,且延长处理时间有助于有机物和氨氮的去除。结论所构建复合菌群对渗滤液中有机物和氨氮有较好降解能力。     

舍曲林联合小剂量米氮平治疗抑郁症伴失眠患者的研究

目的:舍曲林联合小剂量米氮平对抑郁症伴失眠患者的疗效观察。方法:将80例抑郁症伴失眠的患者随机分为观察组和对照组,每组各40例。观察组患者在舍曲林治疗的同时给予米氮平7.5~15 mg晚服。对照组患者只服用舍曲林治疗。两组患者分别在治疗前、治疗后2、4、8周末应用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)减分率及睡眠因子分评定疗效。用副反应量表(TESS)评定治疗过程中的不良反应。结果:观察组患者有效率为90%,明显高于对照组的60%,差异有显著性(P<0.01)。两组患者的睡眠因子分减分率明显差异(P<0.01)。治疗前后,两组患者的TESS评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论:舍曲林联合小剂量米氮平治疗抑郁症伴失眠患者的疗效显著,不良反应少,安全性高。     

一氧化氮在大鼠胰腺缺血/再灌注中的变化及作用

目的:探讨一氧化氮(NO)在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的变化及作用.方法:雄性Wistar大鼠随机分成3组:A、B组胰腺缺血30 min后,再灌注2,4,6,12,24h.B组再灌注前使用诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂,A组仅给与生理盐水.C组仅行假手术.进行大鼠血清中NO水平和淀粉酶活性检测,胰腺组织形态学观察和免疫组化分析.结果:再灌注4 h后,A组iNOS表达于胰腺组织,B组无表达.此时A组NO水平达到高峰,淀粉酶活性开始升高,均高于B组(P＜0.01).再灌注6 h后,A组显微镜下观察到胰腺损伤的表现,B组未见.C组无iNOS表达,血清NO水平和淀粉酶活性均在正常范围.结论:随着再灌注时间的延长,iNOS表达于胰腺组织,NO在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的有害作用占主导地位.