内毒素对小鼠血管内皮细胞p38MAPK蛋白磷酸化的影响

目的 探讨LPS刺激后对小鼠内皮细胞内p38MAPK磷酸化水平变化的影响。方法 采用小鼠肺内皮细胞原代细胞培养，western blotting检测p38信号通路在LPS诱导的小鼠内皮细胞炎症中的活化程度。结果 小鼠内皮细胞p38MAPK磷酸化水平与LPS刺激有明显的时间及剂量依赖关系。结论 p381MAPK信号通路参与LPS诱导的小鼠肺内皮细胞炎症反应过程，并可能中起重要作用。     

脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞基因表达谱分析

目的　利用基因芯片技术分析脂多糖 (LPS)活化的小鼠腹腔巨噬细胞基因表达谱 ,以更全面地了解LPS诱导的巨噬细胞反应。方法　以未刺激的和用 1mg/LLPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞制备3 3 P标记的cDNA探针 ,分别与含有 1176个已知基因的小鼠cDNA芯片杂交。结果　活化组和未刺激组间的 2倍差异表达基因为 118个 ,3倍差异表达基因为 6 9个 ,其中 4 4个上调 ,2 5个下调。转录因子、细胞内信号调节蛋白、炎症细胞因子和细胞凋亡相关基因的转录发生明显的调节变化。结论提供了LPS活化的巨噬细胞综合基因表达信息 ,并筛选出一些新的可能与LPS活化相关的基因。     

利用非胰岛细胞进行1型糖尿病基因治疗的研究进展

1型糖尿病是由于胰腺 β 细胞特异的自身免疫破坏 ,使胰岛素的产生减少所造成的。目的在于进行胰岛素替代的基因治疗战略目前主要有 :①刺激 β 细胞生长 ;②诱导 β 细胞分化和再生 ;③移植基因工程改造的胰岛或 β 细胞 ;④利用基因工程技术使非 β 细胞产生胰岛素。对于 1型糖尿病 ,由于 β 细胞的自身免疫破坏作用持续存在 ,依赖于 β 细胞的增殖和再生的治疗方法可能效果有限。而利用基因工程技术将胰岛素基因转入非 β 细胞 ,发展 β 细胞替代物 ,可避免 β 细胞特异的自免疫攻击。以非 β 细胞为靶细胞的胰岛素基因治疗应很好的实现…     

肝硬化环境下黏附分子表达对肝癌转移的影响

目的 探讨肝硬化环境对肝癌肝内、外转移的影响.方法 健康雄性BALB/c小鼠,采用CCl4诱导建立肝硬化小鼠模型并设正常对照组.分别在肝硬化组及对照组的肝脏左叶上原位种植小鼠肝癌细胞,术后1、2、3周收取标本.通过大体及病理切片观察肿瘤的生长及转移行为.检测了肝脏组织中血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达情况.结果 术后观察发现,肝硬化基础上的肝癌更容易出现肝内转移(14/19)与远处转移(4/19),与对照组相比(5/17,1/17)差异具有统计学意义(P＜0.05).同时肝硬化组黏附类分子较对照组表达明显上调(P＜0.01).钙黏附素表达则无明显差异.结论 肝硬化环境更利于肝癌发生肝内、外转移.这种转移行为可能与肝硬化组织中各种黏附因子表达增高有关.     

利用激光扫描共聚焦显微镜测定APA微囊通透性

目的：海藻酸钠多聚赖氨酸海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊能够成功地延长同种或异种移植组织或细胞的存活时间,而微囊膜的通透性是决定囊内细胞存活和微囊免疫隔离效果的关键因素。本实验用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）以测定ＡＰＡ微囊膜的通透性。方法：采用ＦＩＴＣ标记的不同分子量的葡聚糖（ＦＤ）和ＩｇＧ与微囊共孵育,观察形成的激光共聚焦图像。结果：平均分子量为７１和１６７ｋＤａ的ＦＤ及分子量为１５０ｋＤａ的ＩｇＧ均不能扩散进入微囊内,而平均分子量为１２和２０ｋＤａ的ＦＤ则可自由扩散进微囊内,平均分子量为４０ｋＤａ的ＦＤ可部分扩散进微囊内。提示微囊膜的截割分子量在４０～７１ｋＤａ之间。利用ＬＳＣＭ的时间扫描功能可动态观察ＦＤ１２向单个微囊内的扩散情况,表明较小直径微囊内ＦＤ１２增加的速度明显快于直径较大的微囊。包囊细胞和含血清的培养液对微囊膜的分子截割范围和ＦＤ１２向微囊内的扩散速度无明显影响。结论：我们制备的ＡＰＡ微囊既可允许小分子的营养物通过,以满足微囊内细胞的生存需要,又能截割７１ｋＤａ以上的大分子物质,起到免疫隔离作用。利用ＬＳＣＭ技术可简便易行地测定微囊通透性     

内毒素活化巨噬细胞早期和晚期基因表达的cDNA芯片分析

目的　利用 c DNA芯片技术分析内毒素活化的小鼠腹腔巨噬细胞早期和晚期基因表达 ,以更全面了解内毒素在感染、创伤反应中通过巨噬细胞介导的炎症和免疫反应。方法　以未刺激的和用 1mg/ L脂多糖 ( L PS)分别刺激 2 h(早期 )和 2 4 h(晚期 )的小鼠腹腔巨噬细胞制备 33P标记的 c DNA探针 ,并分别与小鼠 c DNA表达芯片 (含 1176个已知基因 )杂交。结果　巨噬细胞活化早期的 3倍差异表达基因为 6 9个 ,其中4 4个上调 ,2 5个下调 ;巨噬细胞活化晚期的 3倍差异表达基因中有 11个上调 ,2 6个下调 ;只有 8个基因同时出现于活化早期和晚期的差异表达基因中。许多转录因子、细胞内信号转导调节蛋白、炎症细胞因子和细胞凋亡相关基因的表达均发生了明显的调节变化。发现 BTB和 CNC同源 1( BACH1)、早期生长反应蛋白 2( EGR2 )、E4 7反应蛋白 1( EIP1)、Ngfi A结合蛋白 2 ( NAB2 )、成髓细胞白血病癌基因样蛋白 ( MYBL2 )、神经纤维癌蛋白基因 1( NF1)、睫状神经营养因子 ( CNTF)和 Sema4 A等一些以前未曾报道与 L PS诱导的巨噬细胞活化相关的基因。结论　采用 c DNA芯片技术了解内毒素诱导的巨噬细胞活化早期和晚期的综合基因表达信息 ,有助于更好地了解感染、创伤后细菌内毒素诱导的炎症免疫反应     

肝十二指肠韧带内注射利多卡因减轻大鼠肝脏的热缺血/再灌注损伤

肝脏的缺血预适应(Ischemicpreconditioning ,IP)能有效地减轻肝脏缺血/再灌注(ischemia/reprefusion ,I/R)损伤,但其在临床的使用尚受到限制[1] 。李晓立等[2 ] 的初步研究表明,肝脏I/R损伤前,肝十二指肠韧带内注射普鲁卡因预处理能明显减轻肝脏I/R后早期的微循环障碍,可能是一种更方便临床使用的减轻肝脏I/R损伤的方法。本实验采用肝十二指肠韧带内注射利多卡因的方法,进一步探讨该方法对肝脏I/R损伤的影响及其减轻I/R损伤的有效性。材料和方法一、实验方法及分组5 8只雄性SD大鼠(2 5 0～30 0g) ,随机分成4组。腹腔内注射6 %水合氯…     

第一肝门阻断对大鼠硬化肝组织超微结构的影响

目的 探讨第一肝门阻断（Pringle阻断）对硬化肝组织及其超微结构的影响.方法 将四氯化碳诱导的肝硬化模型大鼠分为假手术（sham operation,SO）对照组和Pringle阻断（portal triad clamping,PTC）组,PTC组阻断45 min、复流6h取下腔静脉血和肝组织标本,检测血中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）水平及肝组织中三磷酸腺苷（adenosinetriphosphate,ATP）含量,制作组织病理切片及电镜切片,观察组织损伤及肝超微结构的改变.结果 血液中ALT水平∶SO组（1 17.8±58.0） IU/L,PTC组（1 147.0±297.0） IU/L,PTC组高于SO组（P＜0.05）;肝组织中ATP的含量∶SO组（3.80±0.75）μmol/g,PTC组（1.10±0.26）μmol/g,PTC组低于SO组（P＜0.05）;超微结构观察SO组肝细胞线粒体轻微肿胀,而PTC组肝细胞线粒体明显肿胀,线粒体膜损伤破裂,线粒体嵴疏松溶解,肝细胞核固缩,光镜下见肝细胞片状坏死.结论 大鼠硬化肝组织中肝细胞对于Pringle阻断引起的缺血损伤更为敏感,对于硬化肝应尽量缩短PrinCe阻断时间.     

肝脏支配神经及其对肝脏循环的调节(文献综述)

肝脏支配神经对肝脏功能起着多方面的调节作用 ,其中对循环的调节具有重要的意义 ,然而却存在不少争议。本文将综述这方面的研究进展。