梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定

目的　构建梅毒螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)外膜蛋白Gpd基因的原核表达载体 ,检测其表达产物的免疫原性 ,并比较梅毒螺旋体各菌株Gpd基因序列的同源度。方法　从TpNichols株基因组模板中PCR扩增Gpd基因 ,与GenBank登录的序列做blast比较 ,定向克隆构建原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd ,转入大肠杆菌ril表达菌 ,SDS -PAGE分析重组蛋白的表达 ,Western -blot检测重组蛋白的免疫原性。结果　载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的Nichols株Gpd基因序列完全一致 ,同其他病原性密螺旋体菌株登陆序列比较同源度为 98%～ 1 0 0 %。SDS -PAGE检测诱导产物显示有一Mr约为 41kDa的特异蛋白带 ,免疫印迹技术检测其能与梅毒阳性标准血清反应。结论　Tp原核表达重组体pET2 8b( + ) -Gpd成功构建 ,且能够在ril表达菌中融合表达 ,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了一定的实验基础。     

人型支原体和解脲脲原体对氟喹诺酮类药物的敏感性研究

目的 探讨人型支原体和解脲脲原体对氟喹诺酮类药物的敏感性，指导临床合理用药。方法 采用微量肉汤稀释法测定人型支原体和解脲脲原体对6种氟喹诺酮类药物的敏感性。结果 司帕沙星和加替沙星对人型支原体和解脲脲原体具有良好的抑菌活性，其MIC50分别为0．03125、0．25mg／L和0．25、0．50mg／L。左氧氟沙星和氧氟沙星对两种支原体的MIC50均分别为1．0、2．0mg/L。诺氟沙星对两种支原体的活性较差，MICl卯分别为16．0、32．0mg／L。环丙沙星对人型支原体的MIC50为2．0mg／L，而对解脲脲原体的MIC50则为8．0mg／L。结论 氟喹诺酮类药物新品种司帕沙星、加替沙星和左氧氟沙星的抗Mh和抗Uu活性强于环丙沙星和氧氟沙星等老一代氟喹诺酮类药物，本结果可为选择氟喹诺酮类药物治疗泌尿生殖道支原体感染提供实验依据。     

PCR扩增梅毒螺旋体poIA基因及其在一期梅毒诊断中的应用

目的提高对梅毒诊断的灵敏性和特异性。方法运用PER扩增了梅毒螺旋体(Tp)的DNA多聚酶I基因(polA)的特异性片段,检测了该方法的特异性和灵敏性;用该方法检测了118例生殖器溃疡,同时用Tp PCR试剂盒和血清学方法平行检测同批病人的溃疡或血清标本。结果polA PCR只在扩增Tp时有特异性产物,灵敏性约为20个Tp拷贝;检测118例生殖器溃疡标本,用Tp PCR试剂盒为对照,polA PCR方法的特异性和灵敏性分别为96.8％和95.7％,两种PCR检验结果差异无显著性(x2=0.25,P>0.05);polA PCR方法与血清学方法对一期梅毒诊断结果差异有显著性(x2=4.45,P<0.05)。结论polA PCR方法高度敏感、特异,在一期梅毒诊断中优于血清学方法,可作为血清学方法的补充用于梅毒的诊断。     

湖南省衡阳地区STD患者病原体检测

目的 了解衡阳地区性传播疾病(STD)患者病原体感染情况。方法 对2420例可疑STD患者进行检测：淋病奈瑟菌(NG)、解脲脲原体(UU)、人型支原体(MH)采用培养法；沙眼衣原体(CT)、人乳头瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSV)核酸采用聚合酶链反应(PCR)法；梅毒螺旋体(TP)采用快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)和TP-PA法。结果 STD病原体阳性检出率为38．1％(922／2420)。在922例中UU占29．6％，CT20．8％，HPV17．8％，NG17．4％，MH6．3％，HSV4．2％，TP3．9％。结论 衡阳地区STD患者中UU感染率最高，CT和HPV次之，TP感染率最低。     

SARS病毒S蛋白部分片段B-细胞表位的多参数预测

目的预测SARS病毒S蛋白(spike glycoprotein)部分片段(aa No.400～600 & aa No.1 100～1 195)的B-细胞表位.方法应用多种参数和方法进行综合分析,包括跨膜分析、保守区分析、同源性比较、Hopp ＆ Woods亲水性参数、抗原性参数、可及性参数、β-转角、万氏法等综合预测方法.结果显示B-细胞识别的表位可能在436～456和1 136～1 146残基或其附近,这两个被预测的表位均含有β-转角和不规则卷曲结构.结论本研究为应用合成肽抗原制备抗SARS病毒S蛋白抗体、诊断非典型肺炎(severe acute respiratory syndrome, SARS)提供了依据.     

PCR扩增梅毒螺旋体polA基因及其在一期梅毒诊断中的应用

目的提高对梅毒诊断的灵敏性和特异性.方法运用PCR扩增了梅毒螺旋体(Tp)的DNA多聚酶I基因(polA)的特异性片段,检测了该方法的特异性和灵敏性;用该方法检测了118例生殖器溃疡,同时用Tp PCR试剂盒和血清学方法平行检测同批病人的溃疡或血清标本.结果polA PCR只在扩增Tp时有特异性产物,灵敏性约为20个Tp拷贝;检测118例生殖器溃疡标本,用Tp PCR试剂盒为对照,polA PCR方法的特异性和灵敏性分别为96.8%和95.7%,两种PCR检验结果差异无显著性(x2=o.25,P＞0.05);polA PCR方法与血清学方法对一期梅毒诊断结果差异有显著性(x2=4.45,P＜0.05).结论 polA PCR方法高度敏感、特异,在一期梅毒诊断中优于血清学方法,可作为血清学方法的补充用于梅毒的诊断.     

Expression and Purification of the Major Outer Membrane Protein of Chlamydia Trachomatis in Prokaryotic Cell

Chlamydiatrachomatis(C.trachomatis)isanobligate intracellularbacterialpathogen.Ocularinfectionwith C.trachomatisserovarsA,B,BaandCleadstotracho ma,aleadingcauseofpreventableblindnessinmanyde velopingcountries[1].Urogenital tractinfectionwithC. trachomat…     

Construction of the Eukaryotic Expression Vector for Outer Membrane Protein Tp92 from Treponema pallidum and Its Preliminary Study on the Immune Responses in New Zealand Rabbits

Treponema pallidum subsp. pallidum is the causative a gents of syphilis. Presently, the annual infection rate ofdomestic and international syphilis remains rather high [1,2]. Apart from the serious nature of the disease itself, anumber of studies sugg…     

8种氟喹诺酮药物体外抗淋球菌的活性研究

目的　为了解淋球菌对氟喹诺酮的耐药状况 ,指导临床合理用药及开发新一代氟喹诺酮药物提供实验依据。方法　临床标本分离的 80株淋病流行株 ,采用琼脂稀释法测定淋球菌对 8种氟喹诺酮药物的最小抑菌浓度 (MIC)及交叉耐药情况。结果　Y98- 11、Y98- 35、Y98- 36、Y98- 48对淋球菌均有很强活性 ,其MIC50均为 0 .0 16μg/ml,MIC90 均为 0 .0 62 5～ 0 .12 5μg/ml。而盐酸环丙沙星、氧氟沙星、左旋氧氟沙星、司帕沙星存在不同程度耐药 ,其MIC50 分别为 1μg/ml、1μg/ml、0 .5μg/ml、0 .2 5μg/ml,其MIC90 分别为 4 μg/ml、4 μg/ml、2μg/ml、1μg/ml;且耐环丙沙星的淋球菌株 ,对氧氟沙星、左旋氧氟沙星、司帕沙星有显著性交叉耐药 ( χ2 =18.37、8.60、6.92 ,P <0 .0 5)。结论　近年来 ,对氟喹诺酮敏感性下降或耐药的淋球菌在我国已出现 ,并存在交叉耐药 ,应引起人们的高度重视 ,但新一代的氟喹诺酮药物仍具有较好的抗菌效果     

解脲支原体的生长条件研究

目的　探讨解脲支原体 (Uu)在液体培养基中的最佳营养条件和在固体培养基上形成菌落的最佳气体条件。方法　采用不同的pH值、不同的酵母及小牛血清含量配制解脲支原体培养基 ,将法国Merieum生产的培养基作对比研究。结果　解脲支原体生长最适pH值为 6.0～ 6.5 ;10 %酵母提取液、10 %小牛血清能加速解脲支原体的生长 ,90 %N2 、5 %～ 10 %CO2 能促进解脲支原体菌落生长。结论　本研究为改进解脲支原体的培养质量、开发高效的支原体培养基及药敏检测板提供实验依据