黄芩苷改善肿瘤缺氧微环境抑制乳腺癌移植瘤的生长＊

目的 通过观察黄芩苷对乳腺癌组织毛细血管通透性（Capillary Vessel Permeability，CVP）、赖氨酰氧化酶（Lysyl Oxidase，LOX）及血清丙二醛（Malondialdehyde，MDA）等相关指标的影响，探讨黄芩苷可能的抗乳腺癌作用机制。方法 通过在裸鼠皮下接种MDA-MB-231乳腺癌细胞株建立乳腺癌移植瘤模型；实验分为模型组、黄芩苷组、阿霉素组、黄芩苷+阿霉素组。于接种第7日开始：黄芩苷组每天灌胃黄芩苷水溶液（100 mg·kg^-1），连续14天；阿霉素组每3天腹腔注射一次阿霉素（5mg·kg^-1），共用药5次；模型组每天灌胃生理盐水（10 mL·kg^-1），连续14天；黄芩苷+阿霉素组每天灌胃黄芩苷水溶液（100 mg·kg^-1），连续14天，并每3天腹腔注射一次阿霉素5 mg·kg^-1，共5次。给药期间监测移植瘤体积；紫外可见分光光度计620 nm下测OD值来反映黄芩苷对肿瘤毛细血管通透性的影响；硫代巴比妥酸（Thiobarbituric acid，TBA）比色法检测黄芩苷对裸鼠血清中丙二醛（MDA）的影响；免疫组化染色法检测乳腺癌组织中赖氨酰氧化酶（LOX）的表达情况。结果 ①与模型组比较，黄芩苷组、阿霉素组、黄芩苷+阿霉素组瘤体重量均明显减轻（P<0.05）；黄芩苷+阿霉素组瘤体重量较阿霉素组明显减轻（P<0.05）。②与模型组比较，黄芩苷组降低乳腺癌组织毛细血管的通透性，而阿霉素组则增加肿瘤组织中毛细血管的通透性，差异均具有统计学意义（P<0.05）。③黄芩苷组能够明显抑制荷瘤裸鼠血清MDA的表达，与模型组比较差异有显著统计学意义（P<0.01）；阿霉素组促进MDA的表达，与模型组比较差异有统计学意义；黄芩苷+阿霉素组促进MDA的表达，与模型组比较差异无统计学意义。④与模型组比较，黄芩苷组裸鼠乳腺癌组织LOX的表达显著下调（P<0.01），阿霉素组肿瘤组织中LOX表达增加（P<0.05）；黄芩苷+阿霉素组能下调裸鼠乳腺癌组织LOX的表达，与模型组比较差异无统计学意义。结论 黄芩苷能够明显抑制乳腺癌移植瘤的生长，其机制可能与黄芩苷降低肿瘤组织毛细血管的通透性，抑制裸鼠血清中丙二醛、乳腺癌组织中赖氨酰氧化酶的表达，从而改变肿瘤缺氧微环境有关。     

黄芩苷对肝星状细胞iNOS/PUMA信号通路的影响

目的研究黄芩苷通过iNOS/PUMA信号通路促进肝星状细胞凋亡的作用。方法MTT检测细胞增殖抑制率,Western Blot检测iNOS、PUMA蛋白表达,real-time PCR检测PUMA mRNA表达,一氧化氮检测试剂盒检测NO含量,iNOS抑制剂L-NAME预处理后检测细胞增殖抑制率和PUMA表达,Hoechst 33342核染色检测细胞凋亡。结果50 mM黄芩苷引起肝星状细胞活化诱导性死亡;黄芩苷促进肝星状细胞PUMA mRNA、蛋白表达;iNOS抑制剂L-NAME预处理后PUMA表达降低、细胞凋亡减少。结论黄芩苷能通过iNOS/PUMA信号通路促进肝星状细胞凋亡。     

Baicalin and geniposide inhibit the development of atherosclerosis by increasing Wnt1 and inhibiting dickkopf-related protein-1 expression

Background Our previous study showed that the combined Chinese herbs containing scutellaria baicalensis georgi and gardenia jasminoids ellis inhibited atherosclerosis. In this study, we sought to determine if baicalin and geniposide could inhibit atherosclerosis through Wnt1 and dickkopf-related protein-1 (DKK1). Methods The wild-type and ApoE^?/? mice were treated with baicalin, geniposide, and baicalin plus geniposide daily by gavage for 12 weeks. Blood lipid levels were measured with an automatic biochemistry analyzer. Aortic atherosclerotic lesion areas were analyzed with Image-ProPlus software. The mRNA and protein expression of DKK1, Wnt1 and nuclear factor-κB (NF-κB) were measured with RT-PCR and Western Blot. Serum levels of interleukin-12 (IL-12) were quantified with ELISA. Results The baicalin or geniposide monotherapy as well as combination therapy inhibited the development of atherosclerotic lesions, increased Wnt1 and decreased DKK1 expression and elevated the ratio of Wnt1/DKK1 compared with high-lipid diet group. However, only baicalin or geniposide monotherapy decreased NF-κB expression. Moreover, baicalin and geniposide mono- or combination therapy lowered IL-12 levels. Geniposide reduced both serum total cholesterol and low density lipoprotein levels, while baicalin either alone or in combination with geniposide did not affect serum lipid levels. In human, umbilical vein endothelial cells stimulated by oxidized low density lipoprotein, baicalin and geni?poside also increased Wnt1 and decreased DKK1 expression and elevated the ratio of Wnt1/DKK1. Conclusions Baicalin and geniposide exert inflammation-regulatory effects and may prevent atherosclerotic lesions through enhancing Wnt1 and inhibiting DKK1 expression.     

黄芩苷对DSS诱导结肠炎小鼠Th22细胞及IL-22的影响

目的：观察黄芩苷对炎症性肠病小鼠模型Th22细胞比例及IL-22浓度的影响,通过体内和体外实验探讨黄芩苷治疗该病的免疫学机制。方法: C57BL/6小鼠用3.5%葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate）建立结肠炎小鼠模型,随机分成空白对照组、模型组、黄芩苷组。应用流式细胞术和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测各组小鼠Th22细胞比例和外周血血清IL-22的表达;分离小鼠脾脏淋巴细胞,用含黄芩苷（0、10、20、40 μmol·L^-1）培养基培养48 h, 应用流式细胞术检测各组小鼠淋巴细胞中Th22细胞比例。结果：黄芩苷在体内外实验中均降低Th22细胞比例与IL-22的表达。结论：黄芩苷能够在体外和DSS诱导的结肠炎小鼠体内抑制Th22的分化及IL-22的表达,提示黄芩苷对Th22介导的炎症性疾病具有较好的治疗潜力。     

黄芩苷调控活化Toll样受体4/核因子-κB信号通路对复发性流产小鼠的影响

目的:探讨黄芩苷对复发性流产小鼠的影响及作用机制。方法:参照Clark经典模型构建复发性流产小鼠,并将成功构建好的小鼠随机分为模型组和实验组,每组10只;同时建立正常妊娠小鼠模型10只作为对照组。于妊娠第2天,实验组灌胃0.4 mL/mg黄芩苷,模型组和对照组灌胃等量0.9%氯化钠注射液,1次/d,连续干预7 d。酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中激素水平及母胎界面中炎性反应递质水平;免疫组织化学检测小鼠子宫组织巨噬细胞分布情况;蛋白免疫印迹法检测各组小鼠子宫组织活化Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB、髓样分化因子88(MyD88)蛋白表达情况。结果:对照组、模型组和实验组小鼠母胎界面中TNF-α/IL-4为(2.78±0.36),(4.89±0.58)和(3.39±0.34),血清中E 2为(25.16±3.69),(17.56±4.52),(22.36±4.16)ng/L。小鼠子宫组织中分化抗原14(CD14)蛋白相对表达量分别为(9.36±2.34),(68.12±13.52),(33.46±2.85)%,子宫组织中TLR4蛋白表达量为(0.23±0.02),(1.25±0.33),(0.45±0.12),核因子-κB蛋白表达量为(0.59±0.14),(1.52±0.36),(0.78±0.25),MyD88蛋白表达量为(0.63±0.24),(2.34±0.22),(1.26±0.31),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芩苷可提高复发性流产小鼠雌激素水平,降低母胎界面中炎性状态,与抑制子宫内膜巨噬细胞浸润,调控TLR4-核因子-κB信号通路活性有关。     

黄芩主要成分黄芩甙的测定及体外抑菌作用研究

目的 研究分析黄芩主要成分黄芩甙的测定方法及体外抑菌作用。方法 采用煎煮法、温浸法、超声波法、加碱温浸法、醇提法提取黄芩内的有效成分黄芩甙,对比黄芩甙提取率;采用滤纸片平板扩散法检测黄芩甙对不同菌群的抑菌活性;采用试管稀释法检测黄芩甙对不同菌群的最小抑菌浓度。结果 黄芩甙提取率由高到低的方法依次为加碱温浸法、醇提法、超声波法、煎煮法、温浸法;黄芩甙对不同细菌的抑菌活性由高到低依次为绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、嗜酸乳杆菌、沙门氏杆菌;黄芩甙对不同细菌的最小抑菌浓度由低到高依次为金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、嗜酸乳杆菌、沙门氏杆菌。结论 加碱温浸法是黄芩甙的最佳提取方法,黄芩甙对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌及大肠杆菌抑菌作用相对较强,对沙门氏杆菌抑菌作用相对较弱,具体作用机制有待进一步深入研究探讨。     

和肝利胆颗粒的质量标准研究

目的:建立和肝利胆颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对方中黄芩、五味子、茵陈、栀子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对黄芩中的黄芩苷进行含量测定:色谱柱为Welchrom C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(42∶58∶0.2,V/V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm。结果:TLC图中的斑点清晰、分离较好,阴性对照无干扰;黄芩苷的质量浓度在1⁴0μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均加样回收率为99.78%,RSD=2.68%(n=6)。结论:所建标准可用于和肝利胆颗粒的质量控制。     

黄芩苷保肝护肝作用的研究进展

黄芩苷作为传统中药黄芩的主要活性成分,有泻火解毒,清热燥湿,安胎,止血的功效.具有抗氧化,抗肿瘤,抗病毒,抗菌消炎,清除自由基,解热镇痛,调节免疫功能,保护心脑血管,保肝护肝等广泛的药理作用.本文旨在通过查阅国内外关于黄芩苷在肝保护方面的药理作用及其机制的相关文献,并进行综述,为黄芩苷临床进一步研究和开发提供帮助.     

HPLC法测定宫瘤清片中苦杏仁苷、黄芩苷的含量

目的：建立HPLC法测定宫瘤清片中苦杏仁苷、黄芩苷含量的方法。方法采用AgiLent 1100系列高效液相色谱仪,以AgiLent HC-C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）分离,体积流量1mL· min -1,柱温30℃。①苦杏仁苷：流动相为甲醇-水（20∶80）,检测波长210nm;②黄芩苷：流动相为甲醇-0.2％磷酸溶液（47∶53）,检测波长280nm。结果苦杏仁苷在18～180μg· mL -1范围内线性关系良好（r＝0.9996）,平均回收率为99.61％,RSD＝1.02％（n＝9）;黄芩苷在6.657～66.57μg· mL -1范围内线性关系良好（r＝0.9997）,平均回收率为101.49％,RSD＝1.11％（n＝9）。结论本方法操作简便,结果准确,重现性好,可作为宫瘤清片的质量控制方法。     

黄芩苷调节高脂饲养大鼠肝脏脂质代谢及其机制

近年来,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病率有逐年上升的趋势,但目前对NAFLD尚无有效的疗法,减少肝脏细胞内脂质含量有望减轻高脂饮食对肝脏的危害.有研究结果表明,黄芩苷对肝脏具有较好的保护作用,但其机制不明.腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是脂质调节的关键靶蛋白,参与脂肪酸、甘油三酯(TG)及胆固醇的调节.本研究主要探讨黄芩苷对高脂喂养大鼠肝脏脂质代谢的影响及AMPK信号通路是否参与该调控.