注射用核糖核酸Ⅱ联合贺普丁治疗乙型肝炎的探讨

目的:研究分析核糖核酸Ⅱ注射液与贺普丁联合用于乙型肝炎(乙肝)的治疗效果。方法:择取接受治疗的112例乙肝患者,通过抽签法则将其分成两组,一组56例患者采用核糖核酸Ⅱ注射液进行治疗设为对照组;一组56例患者采用核糖核酸Ⅱ注射液与乙肝联合治疗设为研究组。结果:研究组患者肝功能复常率、HBV-DNA阴转率以及HBe Ag阴转率均明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:核糖核酸Ⅱ注射液与贺普丁联合治疗乙肝获得了显著成效,能够对乙肝病毒发挥有效的抑制作用。     

人肠道病毒71型及柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的真核表达

目的：克隆人肠道病毒71型（EV71）及柯萨奇病毒A组16型（CA16）的VP1蛋白编码基因，构建相应真核表达质粒在体外进行重组表达，检测其细胞内定位，为EV71及CA16的疫苗研究提供基础。方法：通过PCR扩增分别获取EV71及CA16的VP1编码序列，插入pcFlag载体，分别构建EV71及CA16 VP1与FLAG标签融合的真核表达质粒；瞬时转染人胚肾293T细胞及横纹肌肉瘤RD细胞，Western blot法检测融合蛋白的表达，免疫荧光检测融合蛋白的细胞内定位情况。结果：测序表明两种来源VP1蛋白的重组表达质粒构建正确；分别转染两种不同的细胞后，均可通过Western blot检测到相应蛋白表达；免疫荧光检测显示两种毒株的VP1均表达在细胞质中。结论：外源融合表达EV71或CA16 VP1蛋白的真核表达质粒构建成功；所构建质粒分别转染细胞后，均可在细胞质内检测到VP1融合蛋白的表达。     

常用快速手消毒剂对两种肠道病毒的灭活效果研究

目的了解常用快速手消毒剂对两种肠道病毒PV-I、Echo11的灭活效果,以指导手卫生的方式。方法采用悬液定量灭活试验方法,检测常用的13种快速手消毒剂对脊髓灰质炎病毒PV-I、肠道病毒Echo11病毒作用1 min的灭活效果。结果快速手消毒剂A(有效氯370 mg/L)和B(乙醇75%～85%、三氯羟基二苯醚0. 4%～0.5%)作用1 min,对PV-I和Echo11的灭活对数值均≥4. 00;快速手消毒剂C(聚六亚甲基双胍0. 45%～0. 55%、乙醇63%～77%)作用1 min,只对Echo11的灭活对数值≥4.00;其余快速手消毒剂对PV-I和Echo11的灭活对数值均<4.00。结论 PV-I作为消毒剂病毒灭活实验中的指示毒株,对快速手消毒剂的抗力比Echo11强。检测的13种消毒剂中,对PV-I、Echo11有灭活作用的快速手消毒剂占比分别为15.4%和23.1%,在临床中过度依赖快速手消毒剂阻断肠道病毒通过手的传播是有风险的,在流行季节或明确有肠道病毒污染的情况下,应选择皂液流动水洗手作为手卫生的方式。     

附子理中汤对非酒精性脂肪性肝炎大鼠内毒素及其受体的影响

目的：探究附子理中汤对非酒精性脂肪性肝炎大鼠内毒素及其受体的影响。方法：将75只SD雄性大鼠随机分为3组，分别为正常组，模型组，附子理中汤观察组。采用腹主动脉取血法，收集血液后离心取上清，通过双抗体夹心法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和鲎合成基质显色法检测内毒素表达水平；免疫组织化学法检测肝组织内CD14表达水平，并利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Toll样受体-4(TLR-4)与TNF-α mRNA表达水平。结果：与正常组比较，模型组TNF-α水平显著提高，且在第12~24周内持续维持较高水平；附子理中汤观察组TNF-α水平较模型组显著降低，但仍高于正常组；正常组大鼠肝脏TNF-α mRNA未见其表达，模型组TLR4和TNF-α mRNA表达量均显著升高。与模型组比较，附子理中汤观察组TLR4和TNF-α mRNA显著低于模型组，但仍高于正常组TLR4和TNF-α mRNA表达；正常组只有少量细胞能够表达CD14。与正常组比较，模型组大鼠肝组织在第12~24周内，CD14表达的阳性细胞数持续升高，在24周时略有降低，而附子理中汤观察组CD14表达的阳性细胞数与模型组比较显著减少。结论：附子理中汤可降低非酒精性脂肪性肝炎大鼠内毒素及其受体表达。     

70例小儿手足口病疗效观察

<正>小儿手足口病是一种肠道病毒感染性疾病,其主要临床表现为足底、口腔、手掌部位出现水疱,是一种自限性疾病。本病好发于春夏交接之时,主要患病人群为5岁以下的婴幼儿,多数患儿在治疗后效果较为显著,但也有少数患儿在治疗中并发脑膜炎、心肌炎等并发症。成年人感染此种病毒后往往不会发病,但是会成为病毒的携带和传染者。对我院2013年3月~10月间收治的70例手足口病患儿的治疗方式进行分     

益生菌联合肠内营养对急性胰腺炎患者肠道菌群及外周血miR-155的影响

目的 探讨益生菌联合肠内营养对急性胰腺炎患者肠道菌群及外周血miR-155的影响。 方法 选取2016年6月至2018年12月河北医科大学第二医院消化内科收治的92例急性胰腺炎患者作为研究对象，根据随机数字表法分为观察组（n=46）和对照组（n=46），对照组在常规治疗基础上给予肠内营养治疗，观察组在对照组基础上给予双歧杆菌乳杆菌三联活菌片，观察两组患者治疗前后肠道菌群、炎性介质及血清miR-155变化，比较两组患者治疗后胃肠道功能恢复情况。结果 治疗后，观察组双歧杆菌、乳酸杆菌增加数量，肠球菌、大肠埃希菌减少数量，血清CRP、IL-6、IL-17、TNF-α、miR-155降低水平均显著高于对照组（P<0.05）；观察组患者胃肠生活质量量表（GIQLI）评分高于对照组，腹胀消失时间、腹痛消失时间、肠鸣音恢复时间、血清淀粉酶恢复正常时间均少于对照组（P<0.05）。结论 益生菌联合肠内营养治疗急性胰腺炎可调节肠道菌群平衡，降低血清miR-155水平，缓解炎性反应，促进肠道功能恢复。     

人端粒酶RNA的cDNA探针制备及其对胃粘膜细胞端粒酶RNA表达的检测

目的 建立人端粒酶RNA表达的检测方法。方法 制备人端粒酶RNA，(human telomeraseRNA，hTR)的cDNA探针，分别应用RNA斑点杂交与端粒重复序列扩增法(TRAP)分析检测不同胃粘膜的端粒酶RNA的表达与端粒酶活性。结果 人端粒酶RNA的cDNA探针制备成功。18例活检胃癌组织及45例手术胃癌组织RNA斑点杂交检测的阳性率均为l00％，相应TRAP分析的阳性率分别为88．89％、86．67％，低于RNA斑点杂交(P＜0．05)。同时RNA斑点杂交结果提示在非癌胃组织中随着肠化程度增高人端粒酶RNA表达也增强。结论 RNA斑点杂交检测人端粒酶RNA，具有高度的敏感性和特异性，弥补了TRAP分析敏感性不足的缺点。     

慢性低氧大鼠肺动脉内皮素mRNA的表达及定位

目的：探讨慢性低氧大鼠肺动脉内皮素－1基因表达及分布。方法：采用生物素标记cRNA探针，对Wistar大鼠肺动脉进行原位杂交。结果：低氧1周组及低氧2周组大鼠大部分肺动脉内皮细胞ET－1mRNA表达呈阳性信号，而对照组大鼠仅极少数阳性信号（P＜0．01）；低氧1周组大鼠部分显示强阳性信号。低氧1周组及低氧2周组大鼠部分肺动脉平滑肌细胞呈现ET-1mRNA表达阳性信号，而对照组大鼠则无阳性信号表达（P＜0．01及0．05）。结论：慢性低氧对大鼠肺动脉ET－1分泌的影响是在基因转录水平进行，且主要细胞定位在肺动脉内皮细胞，此外还包括肺动脉平滑肌细胞。     

RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

目的：通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸（siRNA）表达载体，鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE．1基因表达的干涉作用。方法：化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链，克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，重组构建核糖核酸干扰（RNAi）质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜，检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达，以了解siRNA的干涉效果。结果：重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析，表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点，且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测，2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论：载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi，为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用，分析基因功能，展开肿瘤基因治疗奠定了基础。