微滴式数字PCR和实时荧光定量PCR对新型冠状病毒肺炎患者不同时间血便尿中核酸检测结果初步探讨

目的 分析微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的核酸检测结果,比较两种方法检测各类样本的差异性,为改进新型冠状病毒核酸检测方案提供数据支持。 方法 利用ddPCR和qPCR技术对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者发病不同时间的全血、尿液、粪便共22份标本进行新型冠状病毒核酸检测。 结果 两种方法对人保守区域基因扩增结果一致:全血标本信号最强,尿液次之,粪便最少;ddPCR在1份全血,1份尿液,5份粪便中检出ORF-1ab和N基因的阳性微滴,qPCR仅在3份粪便中检出上述基因,漏检的3个标本基因拷贝数平均浓度为128 copies/ml;ddPCR在发病<5、5~15、>15 d的各类标本中都有检出,qPCR检出以中晚期为主;重症病例用ddPCR均可测到阳性微滴,qPCR检测的各类标本均为阴性;轻症病例的各类标本中qPCR只有粪便核酸检测阳性,ddPCR检出率高于qPCR。 结论 ddPCR可以有效克服qPCR 灵敏度不足的难题,是对qPCR 的有益补充,尤其是针对病毒载量比较低的血液、尿液和可疑的粪便或肛拭子标本,适用于早期感染的判断及患者治愈后出院诊断。     

69份苦玄参种质SSR遗传多样性及品质性状相关标记分析

目的:采用简单重复序列(SSR)分子标记技术对广西苦玄参主产区69份苦玄参种质样本进行遗传多样性及亲缘关系分析,并筛选与苦玄参苷含量相关联的优良种质基因。为苦玄参种质资源评价、遗传进化分析及分子标记辅助育种等提供依据。方法:基于转录组测序技术,开发20对引物进行批量扩增。利用各标记位点的遗传多态信息,分析69份苦玄参种质的遗传多样性及亲缘关系,并通过一元线性和多元逐步回归分析,筛选与苦玄参苷含量相关联的分子标记。结果:20对SSR引物共扩增出76个等位基因,平均每个位点观测等位基因3.8个,高于有效等位基因数(1.9692个),稀有等位基因率为38.2%,等位基因分布不均匀。等位基因多态率范围为0~59%,平均38.24%,各位点多态率差异较大。各位点多态信息含量(PIC)变化范围为0~0.6211,平均0.3780;Shannon多态性信息指数变化范围为0~1.2401,平均0.7590;Nei’s基因多样性指数(Nei)变化范围为0~0.6823,平均0.4409;以上3个指标最高的为P21,最低为P7,各位点遗传多样性存在较大差异。各位点平均观测杂合度为0.3824,低于平均期望杂合度(0.4425),表现为杂合子缺失;平均遗传分化系数Fst为0.3659;基因流Nm平均值为0.4332,种质遗传分化较大,基因流较小。一元线性回归分析和多元逐步回归分析结果表明,与苦玄参苷IA和IB相关的位点各有5个,其中仅有1个位点与2个成分的含量均相关。结论:20个SSR标记位点遗传多样性存在较大的差异,供试69份种质遗传分化大,基因流较小;从供试20个SSR标记中筛选出9个与苦玄参苷含量相关联的标记位点,试验结果可为苦玄参遗传进化分析及良种选育和繁育等提供依据。     

反复粪便培养金黄色葡萄球菌阳性老年患者口服万古霉素效果评价

目的 通过探讨肠道非急性感染期反复粪便培养金黄色葡萄球菌阳性的老年患者口服万古霉素的效果，为此类患者提供一种潜在的治疗方案。方法 前瞻性分析吉林大学第一医院干部病房2015 年9 月～2018 年12 月收治的186 例肠道非急性感染期反复粪便培养金黄色葡萄球菌阳性的老年患者。根据是否口服万古霉素治疗分为万古组和对照组。收集两组患者的一般临床资料，比较两组患者试验前后万古霉素血药浓度、血常规、降钙素原（PCT）、C 反应蛋白（CRP），试验期间粪便培养结果、体温、抗生素使用情况。结果 试验治疗期间，万古组便培养转阴率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；万古组发热率（29.75%）低于对照组的34.77%，差异有高度统计学意义（P＜0.01）；万古组抗生素使用率（4.49%）低于对照组的19.23%，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。试验前两组白细胞、中性粒细胞计数、中性粒细胞比例、PCT、CRP 比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；试验后万古组白细胞、中性粒细胞计数、中性粒细胞比例、CRP 低于对照组，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。试验后万古组白细胞、中性粒细胞计数、中性粒细胞比例、CRP 低于试验前，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。结论 口服万古霉素可能提高肠道非急性感染期反复粪便培养金黄色葡萄球菌阳性的老年患者粪便转阴率，减少发热及抗生素的应用，降低炎症细胞水平，可能是此类患者一种潜在的临床治疗方案。     

介绍一种新型粪便标本容器

目的 研究开发一种使用便捷、安全的粪便标本容器.方法 对研制的新型粪便标本容器进行了取样,标本混匀,加样涂片,细胞、寄生虫卵形态学镜检,潜血试验,标本中细菌杀灭情况的实验,同时与常规标本盒放置的标本进行对照试验.结果 对粪便标本取样方便;对细胞及寄生虫卵的检出无影响,标本放置48小时后镜检,标本中细胞成份保持良好,无破坏现象;对化学法、单克隆金标法潜血试验无影响;标本在容器中放置30分钟后,取样进行细菌培养,培养6天无细菌生长.结论 该新型粪便标本容器使用方便,对标本保存期长,对细胞形态学镜检及潜血试验结果无影响,能有效地杀灭标本中的致病菌,防止实验室感染及环境污染的发生.     

同一患者体内同时发现3种肠道寄生虫

在门诊一份粪便常规检查的标本中,同时检出了蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵,从而确定此患者体内同时寄生有3种肠道寄生虫,现报道如下.……     

常用中药材性状鉴别术语释

中药材的真伪优劣是我们基层医院从事中药工作人员尤为关注的问题,因为它直接关系到临床疗效和中医药的声誉。因此,中药材的鉴别则十分重要。但对基层医院药房及制剂所需采购的中药材多不可能经常广泛地使用、借助于先进仪器设备的检测鉴定方法,面对现实只能采用最朴实的性状鉴别法。然而,又多以其历代汇集下来的专用名词术语为性状鉴别指南。每每用之,颇有收益。现将几种常用中药材在性状鉴别中所涉及的专用术语列举出来,供同道参考。     

南五味子伪品火棘果的鉴别

~~南五味子伪品火棘果的鉴别@李静$杭州市中医院!浙江杭州310007 @胡晓炜$杭州市药品检验所!浙江杭州310014 @宋旭峰$杭州市药品检验所!浙江杭州310014     

人参农家类型主要经济性状的遗传特性研究

通过对人参农家类型子代11个主要经济性状的比较试验,发现类型间有7个性状的差异达到显著水平,特别是单产、单根重、根粗等性状的差异达极显著水平。同时,利用5个主要产量性状进行了遗传分析,表明人参不同农家类型的产量和产量构成因素有较高的遗传力;单根重、根粗、茎粗与单产呈极显著正相关关系,各产量因素与产量均有较大的选择改良潜力;单根重+根粗+茎粗构成的选择指数方程,遗传进度最快,是对人参成龄植株选择的理想方案。通过选择指数方程对人参各农家类型进行了多性状综合评价,结果二马牙的选择指数最高,大马牙次之,圆芦居间,长脖类型最小。     

鹿茸蜡片及伪制品的鉴别

目的:探讨简便、易行、快速检定市售伪制鹿茸蜡片的方法.方法:采用性状、TLC及数码摄影图谱分析真伪鉴别的方法.结果:伪制品性状与真品有相似之处,真品的切面隐约可见层状纹理;其薄层色谱在与对照药材及甘氨酸对照品相应位置有相同颜色的斑点.伪制品不同点为多数"茸皮"可见两端拼接的缝,内面颜色一致,或花斑状、不规则碎块聚集状,不同的伪制品其颜色不同,无层状纹理,有油渍感;其薄层色谱在与对照药材及甘氨酸对照品相应位置处无相同颜色斑点.结论:用性状和TLC比较分析的方法可达到鉴别目的.     

丙型肝炎

载脂蛋白B基因多态性及血脂水平与慢性丙型肝炎的相关性；HCV核心蛋白在酵母双杂交系统中的表达及自激活作用检测；HCVRNA在外周血单个核细胞中的复制与丙肝慢性化及复发的关系；丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞生物学性状的影响