痛情绪相关神经递质及神经环路研究进展＊

痛情绪是指因疼痛引发的情绪和情感体验，是疾病过程中最常见的一种情绪。痛情绪相关神经机制非常复杂，但主要与单胺类神经递质、神经肽和某些神经环路有关，笔者将结合目前研究现状分别从以上两方面展开，就痛情绪相关单胺类神经递质和神经肽在受体分类、脑区通路、共疾病以及各神经递质之间的联系和痛情绪相关神经环路中各个蛋白的作用机制等方面进行探讨。     

黄连解毒汤对Aβ1-42诱导AD大鼠学习记忆能力及胆碱能系统的影响

目的 探讨黄连解毒汤对β-淀粉样蛋白（Aβ）_1-42诱导阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆能力和胆碱能系统的影响。方法 选用60只雄性SD大鼠，分为正常组，模型组，石杉碱甲组（2.1×10^-5 g·kg^-1），黄连解毒汤高、中、低剂量组（6，3，1.5 g·kg^-1）。运用Aβ_1-42海马注射复制AD大鼠模型，术后连续灌胃治疗4周，进行Morris水迷宫实验。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠海马病理改变，腹主动脉取血，酶联免疫吸附测定（ELISA）检测大鼠血清、海马中乙酰胆碱（ACh），乙酰胆碱酯酶（AchE），胆碱乙酰转移酶（ChAT）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测海马α7nAChR mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组动物脑组织皮质区神经元坏死、海马区锥体细胞或颗粒细胞坏死、排列紊乱和炎性细胞浸润等病理改变明显，大鼠逃避潜伏期延长、逃逸平台次数降低、有效区域停留时间、有效区域游泳路径均减少（P<0.05，P<0.01），血清中ACh，ChAT浓度降低（P<0.01），海马中ACh，AchE，ChAT含量，α7nAChR蛋白，α7nAChR mRNA表达降低（P<0.01）；与模型组比较，黄连解毒汤中剂量组逃避潜伏期变短（P<0.05），逃逸平台次数、有效区域游泳路径、有效区域停留时间增加（P<0.05，P<0.01），血清ACh，ChAT含量和海马AchE，ChAT，α7nAChR mRNA表达上升（P<0.05），海马α7nAChR蛋白表达升高明显（P<0.01）；高剂量组有效区域有效区域停留时间延长（P<0.01）；逃逸平台次数增加，血清ACh，ChAT含量和海马ACh，AchE，α7nAChR蛋白，α7nAChR mRNA表达上升（P<0.05）。结论 黄连解毒汤可显著改善Aβ_1-42诱导AD大鼠学习记忆能力，其作用机制可能与改善Aβ_1-42所导致的胆碱能系统损伤，增强胆碱能系统功能有关。     

益坤饮对卵巢去势大鼠血压的影响及其作用机制研究

目的：以延髓头端腹外侧（RVLM）区氧化应激情况为切入点，分析益坤饮下调卵巢去势（OVX）大鼠血压的作用机制。方法：取35只SD大鼠，随机选择7只作为假手术组行假手术（仅入腹，不切除卵巢），剩余28只行卵巢去势手术。将造模成功的大鼠随机分为模型组、阳性药物组和益坤饮高、低剂量组，每组7只。阳性药物组每日灌胃给予替勃龙0.25mg/kg，益坤饮低、高剂量组每日分别按3.4g/kg、6.8g/kg灌胃中药浓缩液，假手术组与模型组灌胃等量生理盐水，各组均连续给药30d。末次给药12h后，通过股动脉检测各组大鼠血压。留取大鼠24h尿液，使用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测去甲肾上腺素（NE）含量。处死大鼠，取RVLM组织，检测活性氧簇（ROS）水平（荧光读数），使用ELISA法检测组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量；使用蛋白质印迹法（WesternBlot法）检测各组大鼠RVLM组织活性氧代谢酶，即烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）蛋白表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠收缩压、舒张压均显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，各给药组大鼠收缩压均显著降低（P＜0.05，P＜0.01），其中阳性药物降压作用最强，高剂量益坤饮次之。与假手术组比较，模型组大鼠RVLM组织ROS、MDA、NOX4水平均显著增高（P＜0.01），SOD含量显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，阳性药物组、益坤饮高剂量组大鼠RVLM组织ROS、MDA、NOX4水平均显著降低（P＜0.01），SOD含量显著升高（P＜0.01）；阳性药物组、益坤饮高剂量组上述指标组间比较差异无统计学意义（P＞0.05），改善均显著优于益坤饮低剂量组（P＜0.01）。与模型组比较，益坤饮低剂量组大鼠RVLM组织ROS、NOX4水平显著降低（P＜0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠尿NE含量显著升高（P＜0.01）；与模型组比较，阳性药物组与益坤饮高剂量组尿NE含量均显著降低（P＜0.01），且改善均显著优于益坤饮低剂量组（P＜0.01）。结论：OVX大鼠存在中枢氧化应激增强，交感神经亢进情况。益坤饮能够调节OVX大鼠RVLM区氧化应激情况，降低OVX大鼠交感亢进从而控制血压波动。     

盐酸氨基葡萄糖联合青藤碱治疗膝骨关节炎的有效性与安全性

目的评价盐酸氨基葡萄糖联合青藤碱治疗膝骨关节炎的有效性与安全性。方法选取膝骨关节炎患者98例,随机分为对照组和观察组,各49例,对照组予盐酸氨基葡萄糖治疗,观察组在对照组基础上加用青藤碱治疗,4周1疗程,总疗程12周。结果治疗12周后,观察组临床总有效率明显优于对照组(P0.05);观察组中医证候总有效率优于对照组(P0.05);观察组关节触痛、20 m步行痛、WOMAC总积分均低于对照组(P0.05);观察组治疗后TNF-a、IL-1β、IL-6水平亦低于对照组(P0.05);观察组药物不良反应总发生率略高于对照组(P0.05),2组均无严重不良反应。结论盐酸氨基葡萄糖联合青藤碱治疗膝骨关节炎,可明显改善临床症状,控制炎症反应,且安全性良好。     

1例通过药学问诊提出乌头碱中毒诊断可能的药学分析

乌头碱中毒无确切的实验室检查数据诊断,往往是通过询问病史结合临床表现来诊断。临床药师在对1例疑似急性心肌梗死引起心率失常的患者进行药学查房及用药教育时,通过对患者既往用药的评估,提出了患者乌头碱中毒诊断的可能,帮助临床鉴别诊断。通过药学问诊,临床药师参与到治疗团队中,对整个治疗起到了积极作用。     

原阿片碱对人肝星状细胞HSC-LX2增殖的抑制作用及机制研究

目的:考察原阿片碱对人肝星状细胞HSC-LX2增殖的抑制作用,并对其机制进行初步探讨。方法:采用MTT法测定25、50、100、200、400、500μmol/L原阿片碱作用24 h对HSC-LX2细胞增殖的影响,计算细胞增殖抑制率。另取HSC-LX2细胞分为对照组(含5%胎牛血清的1640培养基)和原阿片碱低、中、高浓度组(100、200、400μmol/L),作用24 h后,流式细胞术测定细胞凋亡率;荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)mRNA的相对表达量,Western blot法测定细胞中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-2蛋白的相对表达量。结果:25、50、100、200、400、500μmol/L原阿片碱对HSC-LX2细胞的增殖抑制率分别为0、6.9%、18.7%、34.2%、48.9%、53.9%。与对照组比较,原阿片碱低、中、高浓度组细胞中CollagenⅠ、TIMP-1 mRNA相对表达量和α-SMA蛋白相对表达量均显著降低,MMP-2蛋白相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);原阿片碱中、高浓度组细胞的凋亡率和MMP-2 mRNA相对表达量显著升高,α-SMA、CollagenⅢmRNA相对表达量和CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白相对表达量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:原阿片碱可抑制HSC-LX2细胞增殖,诱导其凋亡,可降低α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、TIMP-1表达,升高MMP-2表达有关。     

蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌BxPC-3细胞增殖抑制作用及其对Hh信号通路影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用,以及通过观察PAMD对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号通路中Shh、Ptch1 mRNA和蛋白表达的影响,进一步讨论PAMD抗胰腺癌的作用机制及其作用靶点。方法:对人胰腺癌BxPC-3细胞进行体外培养,以不同终浓度的PAMD培养液进行干预,对照组用正常培养液培养,进行以下实验:(1)利用台盼蓝染色测定各组中BxPC-3细胞生长周期;(2)运用MTT法检测各组BxPC-3细胞增殖情况;(3)利用RT-PCR、Western Blot技术检测各组BxPC-3细胞中Shh、Ptch1mRNA及蛋白的表达。结果:(1)各给药组与对照组相比,癌细胞生长缓慢;(2)PAMD高、低剂量组及5-FU组细胞的增殖抑制率分别为72.35%、44.62%、56.07%;(3)与对照组相比,Shh、Ptch1 mRNA的表达均下降,差异显著(P0.01),具有统计学意义。结论:PAMD对人胰腺癌BxPC-3细胞有增殖抑制作用,对Hedgehog信号通路关键位点的表达有一定的抑制作用。由此推断,PAMD对胰腺癌的抗癌作用机制可能与Hedgehog信号通路有关。     

知柏龙胆片质量标准的研究

目的建立知柏龙胆片(黄柏、知母、熟地黄等)的质量标准。方法 TLC法定性鉴别龟甲、知母,HPLC法测定盐酸小檗碱、龙胆苦苷含有量。结果 TLC斑点清晰,重复性好。盐酸小檗碱、龙胆苦苷分别在2.152～215.2μg/mL (r=1)、5.040～201.6μg/mL (r=1)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为102.85%(RSD=1.82%)、98.40%(RSD=2.17%)。结论该方法简便可行,重复性好,可用于知柏龙胆片的质量控制。     

经颅直流电刺激对应激性高血压大鼠下丘脑去甲肾上腺素释放的影响

目的:探讨经颅直流电刺激(tDCS)治疗高血压的中枢神经系统机制。方法:雄性SD大鼠(180～200 g)随机分为对照组和应激性高血压模型组,通过给予模型组大鼠噪声和足底电击刺激制作应激性高血压大鼠模型,采用尾部套管法检测血压,运用碳纤维电极检测技术测定大鼠电刺激蓝斑核,下丘脑内去甲肾上腺素(NE)的释放量,进一步观察麻醉状态下tDCS(正极置于左侧前额叶皮质,负极置于右侧前肢)对NE释放量的影响。结果:高血压模型组大鼠造模后血压升高(P<0.05)。tDCS(tDCS 2 mA/20 min,每天2次,连续5 d)使模型组1大鼠血压下降(P<0.05),而接受假tDCS(tDCS 0 mA/20 min,每天2次,连续5 d)的模型组2大鼠血压没有下降(P>0.05)。长时程tDCS(2 mA/20 min,每天2次,连续5 d),或者在体tDCS(2 mA/20 min)都可使高血压模型组大鼠下丘脑NE的释放信号幅度减小(P<0.05)。结论:tDCS可缓解应激性高血压模型大鼠的血压升高,这种作用与tDCS减少蓝斑到下丘脑投射系统NE的分泌有关。     

养血清脑颗粒联合石杉碱甲治疗血管性痴呆的效果

目的分析养血清脑颗粒联合石杉碱甲治疗血管性痴呆(VD)的效果。方法选取2018年1月至2019年1月永城市人民医院收治的86例VD患者,按照随机数表法分为两组,各43例。对照组接受石杉碱甲治疗,研究组接受养血清脑颗粒联合石杉碱甲治疗。比较两组疗效、治疗前后简易智能精神状态检查量表(MMSE)评分与健康调查简表(SF-36)评分。结果治疗8周后,研究组总有效率(93.02%)高于对照组(74.42%)(P<0.05);研究组MMSE、SF-36评分较对照组高(P<0.05)。结论养血清脑颗粒联合石杉碱甲治疗VD,能显著提高治疗效果,改善认知功能,提高生活质量。