岩藻黄质对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素抵抗的影响

研究岩藻黄质对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素抵抗的作用及其分子机制。将50只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组(10只)、高脂组(40只),高脂组经高脂饲料喂养12周形成肥胖胰岛素抵抗模型,将其随机分为模型组、岩藻黄质0.2%剂量组、岩藻黄质0.4%剂量组和二甲双胍组,每组10只,连续喂养含有相应药物饲料6周后,测定各组小鼠体质量和附睾脂肪质量;检测血清中空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色法观察各组小鼠肝脏病理变化;Western blot法检测肝脏组织中胰岛素受体底物1(IRS-1)/磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和过氧化物酶体增殖剂激活受体-γ(PPARγ)/胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)/脂肪酸合成酶(FAS)通路相关蛋白的表达。结果显示,与模型组相比,各给药组小鼠的体质量、附睾脂肪质量以及FBG,FINS,TC,TG,LDL-C,HOMA-IR水平,肝组织中PPARγ,SREBP-1和FAS蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),同时HDL-C水平及肝组织中p-IRS-1,IRS-1,PI3K,p-Akt的蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),且肝组织病理形态明显改善。结果表明,岩藻黄质可明显减轻肥胖小鼠的肥胖及糖脂紊乱,并改善胰岛素抵抗,其作用可能与调控IRS-1/PI3K/Akt和PPARγ/SREBP-1/FAS通路有关。     

高效液相色谱法测定海胆黄中岩藻黄质与岩藻黄醇

目的 建立高效液相色谱法同时测定海胆黄中岩藻黄质及岩藻黄醇的方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil ODS C18(4.6 mm×250 mm,５μｍ),流动相为甲醇-水(90:10) ,检测波长为449 nm,流速１mL.min^－１,进样量10 μＬ。结果 岩藻黄质与岩藻黄醇在此色谱条件下获得良好分离, 岩藻黄质在0.88～56 μg/mL范围内呈良好线性 (y = 102.75x + 4.4072,r = 0.9999, 平均加样回收率为97.76%, RSD 1.88%),岩藻黄醇在0.88～56 μg/mL范围内呈良好线性 (y = 92.906x + 2.2318,r = 0.9999,平均加样回收率为95.28%, RSD 1.85%)。结论 本方法准确、可靠, 可用于海胆等生物样品中岩藻黄质及岩藻黄醇的含量测定。     

干姜中3种姜酚类成分提取工艺研究

目的：建立干姜中姜酚的提取工艺。方法：采用超声辅助提取法考察乙醇浓度、提取时间、料液比3个因素对6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚总提取率的影响,并利用响应面法优选姜酚最佳提取工艺。结果：优化后最佳提取条件设定为乙醇浓度为61%,提取时间为41 min,料液比为1∶34(g/mL)。结论：本方法简便,具备可行性,可用于干姜中姜酚提取物的提取、分离及纯化。     

岩藻甾醇标准样品的研制

目的 根据GB/T 15000.3—2008《标准样品工作导则（3）标准样品：定值的一般原则和统计方法》,经国家标准化管理委员会批准立项,研制岩藻甾醇标准样品。方法 选择海带为原料,通过95%乙醇提取、减压浓缩、反复柱色谱分离、石油醚-乙酸乙酯重结晶、残余溶剂去除等制备和纯化过程,获得高纯度岩藻甾醇单体,采用元素分析、红外光谱、质谱、核磁共振和X射线衍射等技术对其进行结构鉴定。运用高效液相色谱-蒸发光散射检测法进行均匀性检验、稳定性检验和8家实验室联合定值检验。结果 该样品在95%置信区间的样品均匀性良好,在2~4 ℃条件下24个月内稳定性良好,定值测定结果确定其纯度99.54%,扩展不确定度0.16%,达到了国家标准样品的技术要求,通过了国家标准化管理委员会组织的验收。结论 成功研制了岩藻甾醇国家标准样品,该样品可用于岩藻甾醇含量测定、检测方法评定、相关产品的检测与质量控制。     

海带多酚的提取分离纯化工艺研究

目的 建立海带多酚的提取及纯化工艺。方法 以乙醇浓度、提取时间、提取温度和料液比进行单因素试验,并在单因素试验基础上采用4因素3水平进行正交试验优化提取工艺,同时采用树脂进行纯化工艺优化。结果 确定最佳提取工艺为：采用85%乙醇为溶剂,以料液比1︰65,在65 ℃下搅拌提取1 h。在提取海带粗多酚后采用大孔吸附树脂进行分离纯化研究,筛选出最佳的大孔吸附树脂SZ-3,优化最佳层析条件,获得高纯度海带多酚（80%）。结论 本方法简便可行,可用于海带多酚的提取与纯化。     

铜藻岩藻多糖匀浆提取工艺及抗氧化活性分析

目的 优化铜藻岩藻多糖的匀浆提取工艺,并测定其抗氧化活性。方法 以岩藻多糖的提取率为指标,基于单因素试验的基础上,采用响应面法对铜藻中岩藻多糖的提取工艺进行优化,并对其抗氧化活性进行验证。结果 最佳提取工艺条件为提取时间6 min、提取温度94℃、液料比34 mL·g^-1和提取次数2次。在此条件下,多糖的提取率为14.76%。抗氧化活性研究结果表明,铜藻岩藻多糖在质量浓度为0.2～10.0 mg·mL^-1范围内有一定的抗氧化活性,对DPPH自由基、ABTS⁺自由基清除率的IC₅₀分别为0.22、0.41 mg·mL^-1。结论 该提取工艺高效,可为铜藻岩藻多糖的制备及应用提供理论依据。     

2株海洋来源真菌共培养产物的研究

摘要：目的 对2株海洋来源真菌Stachybotrys sp. 3A00409与Aspergillus sclerotiorum MXH-17的共培养产物进行化学成分和生物活性研究。方法 采用溶剂萃取、柱色谱层析及半制备HPLC等方法对2株真菌共培养发酵产物的差异部分进行靶向化学分离,通过理化性质及波谱学方法并参阅文献进行化合物结构鉴定,并初步评价其细胞毒和抑菌活性。结果 以大米静置共培养作为目标培养模式进行大量发酵,经过目标化合物靶向分离,得到6个单体化合物,结构鉴定为二聚萘并-?-吡喃酮类化合物Asperpyrone A（1）、Fonsecinone A（2）、Asperpyrone C（3）、Aurasperone A（4）、Dianhydro-aurasperone C（5）和异色酮类化合物(7S, 8S)-sclerotinin A （6）。抑菌实验结果显示化合物1对大肠杆菌Escherichia coli表现出弱的抑菌活性,MIC为39.7 μmol/L。结论 共培养刺激微生物代谢产物产生是提高微生物化学多样性的潜在有力工具,本研究从海洋来源真菌Stachybotrys sp. 3A00409与Aspergillus sclerotiorum MXH-17的共培养产物中分离得到了单菌培养中未发现过的5个二聚萘并-?-吡喃酮类和1个异色酮类化合物。