鼻咽癌放疗抵抗相关microRNA差异表达谱的建立

目的:研究鼻咽癌放疗抵抗相关microRNA差异表达谱的建立。方法:选取10例初次治疗鼻咽癌的患者作为研究对象,将所有研究对象的放疗前的血浆标本,收集患者放疗前以及放疗3个月后鼻咽部MR图像并量化鼻咽癌的放疗敏感性,并测定放疗敏感及抗拒患者血浆中microRNA差异。探讨鼻咽癌患者血浆miRNA和放疗敏感性的关系,筛选能够预测放疗敏感性的血浆microRNA标记物。结果:通过比较发现差异表达microRNA192个,在这192个microRNA中,上调有107个,下调有85个,差异具有统计学意义(P<0.05),其中明显差异的microRNA有50个,Fold-Change>1.00(P<0.05)。14个下调的microRNA所对应的靶基因富集在4条信号传导通路:肿瘤相关通路,嘌呤代谢途径,Wnt信号通路以及轴突导向通路,差异有统计学意义(P<0.05);上调的microRNA没有较为显著富集的传导通路。结论:通过对放疗敏感和抗拒鼻咽癌患者血浆中miRNA的表达谱进行比较研究,经过筛选、验证,确定放疗敏感相关差异血浆miRNA,为鼻咽癌的临床个体化治疗提供依据。     

应用光学相干层析成像技术对脾胃湿热证大鼠舌象的量化分析研究

目的应用光学相干层析成像设备对脾胃湿热证大鼠的舌苔及舌质进行在体的显微层析成像与舌象指标的量化研究,探讨脾胃湿热证模型舌象在显微检测方面的变化规律以及光学相干层析成像于舌诊应用中的价值。方法采用复合因素复制脾胃湿热证大鼠模型,应用自行装置的光学相干层析成像设备,以LabVIEW编写软件操作平台,进行大鼠舌上表面的在体显微成像检测,并对舌苔的相关参数进行量化处理分析。结果从大鼠舌表面显微成像中能够清楚地分辨出舌苔层、舌苔舌体连接层与舌体层结构,与组织学检测大鼠舌显微结构结果显示具有一定的相似性;脾胃湿热证大鼠的舌象各部位的舌苔厚度明显高于正常对照组(P<0.01),而舌体部津液则明显低于正常对照组(P<0.01)。结论脾胃湿热证模型的舌象在显微检测上具有特征性的改变,光学相干层析成像技术在大鼠舌象中能进行成像研究,并可能实现一定的量化研究。     

艾灸对人体红外热像及生理信号的即刻效应

目的研究艾灸对人体红外热像、心率、皮肤电导、血氧饱和度的即刻效应。方法选取46例在校大学生,对其双侧劳宫穴、神阙穴、22例足三里及22例涌泉穴依次进行艾灸,检测艾灸前后心率、皮肤电导、血氧饱和度,并采集其中41例受试者身体各部位艾灸前后红外热像数据。结果除鼻部、口部、胸部左侧、胸部右侧外,受试者其他部位艾灸前后红外热像数据比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。艾灸后皮肤电导、血氧饱和度、心率与艾灸前比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论艾灸可即刻改善血液循环且对机体具有双向调节作用。     

双氢青蒿素对小鼠T细胞的免疫抑制作用

目的:研究双氢青蒿素(DHA)在体外对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的影响,探讨其可能的免疫作用机制。方法:加入不同浓度DHA,以多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)诱导T细胞活化增殖,用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色法分析T细胞增殖情况;利用流式细胞术(FCM)结合双色免疫荧光染色技术检测CD3+T细胞早、中、晚期活化标志CD69、CD25、CD71表达情况;用Fluo-4/AM荧光钙离子探针技术检测细胞内钙离子([Ca2+]i)浓度的变化;以碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期分布;运用流式细胞术(FCM)结合三色荧光染色技术检测CD4+CD25highTreg早期活化抗原CD69表达情况。结果:CFDA-SE染色结果显示,DHA能有效抑制ConA诱导的T细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性;DHA对ConA刺激的CD3+T细胞CD69、CD25的表达有促进作用,而对CD71的表达有抑制作用,均呈剂量依赖性;DHA单独作用不能引起T细胞[Ca2+]i的升高,在ConA的刺激下能引起[Ca2+]i浓度升高;PI染色流式分析结果显示,DHA阻滞细胞于G0/G1期,阻止细胞进入S期和G2/M期;DHA能够下调CD4+CD25highTreg细胞CD69的表达。结论:DHA对小鼠淋巴细胞的增殖有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。     

利用FRET技术实时检测Bid蛋白在TNF-α诱导PC12细胞凋亡过程中的作用

目的 在活细胞中实时检测TNF-α诱导PC12细胞凋亡过程中Bid蛋白的作用并探讨PC12细胞凋亡的信号通路.方法 利用基于荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)原理设计的荧光探针pFRET-Bid( YFP-Bid-CFP)转染PC12细胞后,在激光共聚焦显微镜下实时检测Bid蛋白的切割情况,并采用专用软件进行数据分析.结果 TNF-α诱导细胞凋亡的过程中,在短时间内(3 h)就凋亡的细胞中观测不到bid的切割,而在8h后凋亡的细胞中却观测到了hid的切割.结论 通过分析实验结果推测不同时间凋亡的细胞经过的信号通路是不同的,一个是不通过线粒体的较快途径,一个是需要通过线粒体的较慢途径.     

艾灸对健康人脉搏波速度影响的初步研究

目的:探讨艾灸对健康人脉搏波速度(Pulse Wave Velocity,PWV)的影响。方法:受试者为34名男性学生,开展随机交叉对照实验。艾灸处理对受试者神阙、气海及两侧足三里直接温和灸各15 min;对照处理为空白对照。设计PWV检测系统,测量人体左右两侧肱-桡PWV、桡-中指PWV和桡-小指PWV;同时用红外热像仪测量人体左右两侧手指、手心和手腕的温度;观察艾灸对以上指标的影响。结果:艾灸后右肱-桡PWV和右桡-中指PWV上升显著(P<0.05),而对照处理前后无统计学差异;艾灸后和对照后手部温度均有所下降,但艾灸后下降更加明显;PWV与温度呈负相关。结论:PWV可显示艾灸对人体的影响,提示PWV在艾灸的疗效观察中有很好的应用前景。     

紫外辐射引起DNA损伤的修复*

学术背景：紫外线辐射可造成机体表皮细胞DNA损伤,亦可诱发表皮细胞酶活性进行损害DNA的修复系统的启动。 目的：概述近年来关于紫外辐射引起DNA损伤的修复机制研究成果。 检索策略：应用计算机检索PubMed中1991-01/2007-08关于DNA损伤修复和DNA紫外线损伤的文章,在标题和摘要中以“UV-induced DNA damage and DNA repair”为检索词进行检索, 限定文章语言种类为“English”。选择文章内容与DNA损伤修复和DNA紫外线损伤有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。 文献评价：初检得到561篇文献,根据纳入标准选择关于紫外辐射引起DNA损伤及其修复的42篇文章进行综述。 资料综合：环境污染使得紫外辐射增强,而紫外线辐射对机体表皮细胞的DNA具有损害作用,可导致环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物的形成。紫外光可激活光解酶来识别并黏附于环丁烷嘧啶二聚体,进行光酶性修复;还可以在受损的DNA中激活紫外线修复酶,启动剪切修复。光酶性DNA修复主要存在于原核生物或植物体中,紫外线修复酶系统则主要存在于细菌体内,高等生物体中由于缺乏光解酶,修复方式以核酸切除修复为主。 结论： 紫外辐射导致DNA损伤的产物以环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物为主。在多数生物体中,光复活作用用来清除环丁烷嘧啶二聚体产物,而核苷酸切除修复途径则用于6-4光产物的修复。人类DNA的损伤修复主要依赖于核苷酸切除修复途径。     

PUMA增强依托泊苷诱导宫颈癌细胞凋亡

目的探讨PUMA蛋白在依托泊苷诱导的宫颈癌细胞凋亡中的作用。方法采用MTT方法检测依托泊苷对宫颈癌细胞系SiHa细胞活力的影响。通过Annexin-v／PI双染检测和光学显微镜形态观察检测依托泊苷对宫颈癌SiHa细胞凋亡的影响。通过转染siRNA干扰PUMA的表达,检测低表达PUMA后,宫颈癌细胞对依托泊苷的敏感性。通过免疫印迹方法检测PUMA干扰后PUMA的表达水平。结果依托泊苷显著抑制宫颈癌细胞的活力和诱导其凋亡,且随着浓度和时间的增加而细胞活力依次减少而凋亡率依次升高,且光学显微镜下有明显的细胞皱缩等凋亡形态。当转染PUMA的siRNA后．依托泊苷诱导的细胞凋亡显著减少。结论PUMA在依托泊苷诱导宫颈癌细胞凋亡中起了重要作用,它能够增强宫颈癌细胞对依托泊苷的敏感性。     

ALA-PDT对K562、HL60细胞株破坏的实验研究

探讨基于氨乙酰丙酸介导的光动力作用(ALA-PDT)对白血病细胞株HL60和K562细胞的杀伤模式及其可能机制。在ALA-PDT处理细胞的优化条件下,用透射电镜对处理细胞进行超微结构观察,选择AnnexinV-FITC/PI双标法明确ALA-PDT对两种白血病细胞的杀伤模式,PI染色流式细胞仪分析ALA-PDT后细胞周期的变化,以Fluo-3/AM为钙离子指示剂采用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化。透射电镜观察发现PDT后即刻的细胞呈现典型的凋亡小体,24h后大部分发生坏死;双标法检测显示PDT后即刻及24h后细胞的死亡模式分别以凋亡和凋亡后坏死为主。光动力作用后即刻和作用后2h,K562细胞S期所占的比例分别为57.67%±1.13%和84.77%±6.20%,HL60细胞S期所占的比例分别为74.6%±7.27%和84.60%±1.74%;两种细胞内钙离子浓度的均明显升高。在最佳试验条件下,凋亡是ALA-PDT杀伤白血病细胞K562和HL60细胞的最初模式,而凋亡后坏死为其主要模式,ALA-PDT使白血病细胞株阻滞于S期,在白血病细胞株死亡的过程中,细胞内钙离子浓度的增加可能起着重要的作用。     

低强度激光疗法作用机制的新进展

自1967年开始低强度激光疗法就被世人所知,并且作为一种有效的治疗手段广泛应用于神经科、牙科、眼科及再生医学等方面。本文整理、归纳了近年来有关低强度激光实验研究和临床应用的文献,对低强度激光疗法在治疗炎症、促进伤口愈合、组织再生及缓解肌肉疲劳等方面的细胞分子机制的新进展进行概述。结果发现低强度激光能通过调节细胞因子的分泌、基因的表达、蛋白质合成等达到治疗的目的。了解低强度激光疗法的细胞分子机制对临床应用低强度激光治疗疾病至关重要。