儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是世界范围内引起5岁以下儿童急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infections,ALRTI)最重要的病毒病原[1]。RSV感染是造成婴幼儿病毒性呼吸道感染住院的首要因素,严重危害儿童健康,尤其对早产儿、患有先天性心脏病或原发免疫缺陷的婴幼儿造成的疾病更重。目前,尚无RSV疫苗及有效的抗病毒药物用于RSV的治疗,唯一可用于RSV预防的人源化特异性抗体帕利珠单抗(Palivizumab)尚未引进国内临床应用。临床上在RSV的流行、致病机制、诊断、治疗及预防等方面尚存在一些不足,为进一步规范儿童RSV感染的诊断、治疗及预防,以国内外RSV最新研究进展为参考,特制定此专家共识。     

近来北京市某些医院院内感染性腹泻与Noro病毒相关

2006年11月上中旬,北京市某些综合医院内老年病科和心脏外科术后的一些住院患者先后发生腹泻、呕吐,因患者症状相似,疑为院内感染;细菌学检测的结果基本可以排除细菌感染,希望进一步做病毒病原学检测。笔者根据这些医院反映的有关情况制定了检测方案。当时考虑到三种可能:①时值轮状病毒的流行季节,目前儿科腹泻住院患儿的轮状病毒检测阳性率达70%～80%,而上述医院发生的腹泻病例均为老年人和心脏术后机体抵抗力     

A组轮状病毒广州地方株VP7基因序列的比较分析

目的 了解我国轮状病毒G1型广州地方株与标准株及北京G1型地方株VP7基因序列的差异，为我国轮状病毒疫苗的研制提供资料。方法 通过逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)获得了轮状病毒广州地方株R97—196 VP7全基因的cDNA片段，将其克隆入T—A克隆质粒pUCm—T中，构建成重组质粒pUCmT—VP7，对克隆的VP7基因进行序列测定。结果 该地方株的基因核苷酸全长为1062nt，读码框架和以往的研究一致，和北京G1型地方株173的VP7氨基酸序列具有高度同源性(98％)，而与不同血清型标准株间则变异较大(73％—81％)，氨基酸序列中存在的一些高变区和保守功能区与已报道的研究结果一致。从进化角度分析，与轮状病毒标准株Wa株，相距较远。结论 轮状病毒广州地方株R97—196 VP7基因片段属G1型，轮状病毒VP7基因的变异与地域有一定关系。     

冬春季儿童、婴幼儿哮喘急性发作的呼吸道病毒病原学特征及临床研究

目的 了解北京地区冬春季儿童、婴幼儿哮喘急性发作时的呼吸道常见病毒——呼吸道合胞病毒（RSV）、流感病毒（IFA1、IFA3、IFB）、副流感病毒（PIF1、PIF3）、腺病毒（ADV）的感染情况及与临床症状和嗜酸细胞的关系。方法 对2000年11月至2001年3月及2001年11月至2002年3月，来首都儿科研究所哮喘中心就诊的哮喘急性发作的患儿176名，采用病毒分离及间接免疫荧光法，对鼻咽分泌物（nasopharyngeal secretions，NPS）中七种病毒抗原进行监测，并同时记录临床症状和用药情况及进行鼻咽分泌物和外周血中嗜酸细胞计数。结果 176例哮喘急性发作患儿NPS中，79例检测出病毒，阳性率为44．9％。其中RSV 66例，感染率为37．5％、IF7例（4．0％）、ADV6例（3．4％）及PIF4例（2．3％）。RSV占79例病毒感染患儿的83．5％；4例患儿同时测定出RSV和其他病毒混合感染。这些病毒在哮喘急性发作的患儿中检出率与年龄呈反比，小年龄组的患儿病毒感染多；检出病毒的患儿病情重，伴发热的患儿显著多于未检查出病毒的患儿。病毒感染与非感染组的NPS中嗜酸细胞数目检测无明显差别；但血中嗜酸细胞的数目，病毒检出阳性的患儿，较病毒测定阴性的患儿明显减少（t=2．676，P〈0．001）。结论 北京地区冬季近半数哮喘急性发作的患儿呼吸道病毒检测阳性，其中RSV是婴幼儿哮喘发作的主要感染病毒，引起较严重的临床症状；病毒检出阳性的患儿，血中嗜酸细胞的数目明显减少。     

北京新发现的人偏肺病毒N蛋白编码基因的序列分析

目的　了解新近从北京地区发现的人类偏肺病毒 (humanmetapneumovirus ,HMPV)N蛋白编码基因的特征。方法　从经RT PCR检测HMPV阳性的临床鼻咽洗液标本中进行HMPVN蛋白全基因扩增、克隆至pUCm T载体中并进行测序 ,与GenBank中的多株HMPVN蛋白基因序列进行比较和进化树分析。结果　经扩增并测序 ,标本BJ1816和BJ1887N蛋白基因全长为 1185bp ,编码 394个氨基酸。BJ1816N蛋白基因与国际上第一株HMPV分离株NDL0 0 1和GenBank中其它的多株HMPV的核苷酸和氨基酸同源性分别为 86 .2 %～ 99.0 %和 96 .2 %～ 99.7%。BJ1887N蛋白基因与以上进行比较的各株HMPV的核苷酸和氨基酸同源性分别为 86 .6 %～ 97.0 %和 96 .4 %～ 99.5 %。BJ1816和BJ1887之间N基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为 86 .6 %和 96 .4 %。提示BJ1816和BJ1887分属于HMPV的两个不同的基因进化簇。结论　从基因水平进一步证明新近发现的婴幼儿肺炎的新病原确为HMPV ,提示北京地区婴幼儿中同时存在两个不同进化簇 (即基因型 )的HMPV感染。     

间接荧光法测定特异性IgM在呼吸道合胞病毒感染早期快速诊断中的应用

呼吸道合胞病毒(RSV)为婴幼儿严重下呼吸道感染的重要病原。常规的病原诊断方法是取病人鼻、咽拭子或鼻咽部吸出物作病毒分离和/或取病人双份血清作抗体测定。由于RSV易灭活,分离阳性率低,分离鉴定所需时间长,与双份血清抗体测定一样,仅能提供回顾性诊断。国外目前所用RSV早期快速诊断的方法是用直接或间接免疫荧光法检测咽部脱落细胞     

三例儿童SARS临床特点及诊治分析

20 0 3年 4月 2 4日— 2 0 0 3年 5月 7日 ,本所收治传染性非典型肺炎疑似患儿 6例 ,通过专家组会诊 ,病原学检测 ,最终确诊 3例 ,报告如下。例 1　女 ,9岁。主因 :发热 4d、咳嗽 3d ,2 0 0 3年 4月 2 7日入院。入院前4d始发热 ,次日出现咳嗽 ,无痰 ,精神紧张 ,食欲尚可 ,二便正常。院外头孢噻肟钠及地塞米松治疗 2d ,无效。住在市郊 ,2个月前父亲死于脑出血 ,患儿处于恐惧状态。入院时 :T 40℃ ,P 92次 /min ,R 30次 /min。神清 ,呼吸平稳 ,发热病容。咽充血 ,双扁桃体Ⅰ度肿大、充血。双肺呼吸音粗 ,未闻及细湿音。心音有力 ,腹部平软…     

应用逆转录聚合酶链反应鉴别呼吸道合胞病毒亚型

目的为了使鉴别呼吸道合胞病毒（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｃｙｔｉａｌｖｉｒｕｓ，ＲＳＶ）Ａ、Ｂ亚型的方法更为简单、特异、有效。方法根据ＲＳＶＧ蛋白编码基因的核苷酸序列设计一套引物，其中Ｐ１为亚型间通用的引物，Ｐ２和Ｐ３分别为Ａ、Ｂ亚型特异性引物。将这些引物用于同一逆转录聚合酶链（ＲＴＰＣＲ）反应，Ａ、Ｂ亚型株的扩增产物分别为２７７ｂｐ和８６３ｂｐ，根据ＰＣＲ产物的大小即可鉴别所测毒株的亚型。用这一方法对ＲＳＶ原型株和９株我国分离株进行亚型鉴定。结果分离株８株为Ａ亚型，１株为Ｂ亚型，分型结果与单克隆抗体检测和基因序列分析完全相符。结论ＲＴＰＣＲ方法鉴别呼吸道合胞病毒亚型具有快速、简便、敏感、特异等特点，适用于ＲＳＶ临床标本的亚型分型及流行病学研究     

儿童病毒性脑炎62例临床及病毒病原学分析

目的　探讨不同年龄组儿童病毒性脑炎临床表现差异及脑脊液病毒病原学特点。方法　选取首都儿科研究所2 0 0 2年 1月至 2 0 0 3年 2月收治的 6 2例病毒性脑炎患儿 ,根据年龄分为A组 ( <3岁 )、B组 ( 3～ 6岁 )、C组 ( >6岁 ) 3组。 ( 1)分析不同年龄组临床表现特点。 ( 2 )应用多重引物PCR方法对脑脊液进行病毒病原学检测 ,包括肠道病毒 (EV)、疱疹病毒 (HSV)Ⅰ、Ⅱ型、EB病毒、巨细胞病毒 (CMV) 5种。结果　 ( 1) 3组患儿均有发热、嗜睡、烦躁、淡漠等症状 ;其他伴随症状 :A、B两组患儿中 2 4例 ( 6 2 5 % )伴有惊厥 ,C组中 2 2例 ( 95 7% )伴随头痛。 ( 2 )脑脊液病毒病原检测阳性者 39例 ( 6 2 9% ) ,其中EV 18例 ( 4 6 2 % ) ,HSVⅡ型 9例 ( 2 3 1% ) ,CMV、EB病毒各 6例 (各 15 4 % ) ,HSVⅠ型未检出。结论　 ( 1)除发热、嗜睡以外不同年龄组病毒性脑炎患儿伴随症状不同。 ( 2 )应用多重引物PCR方法早期检测脑脊液病毒病原阳性率较高     

巢式PCR诊断儿科患者鼻病毒感染的探讨

目的了解儿科急性呼吸道感染的病毒病原,建立快速、敏感、特异的检测鼻病毒（HRV）的方法.方法根据已发表的HRV的核苷酸序列设计巢式PCR引物,并用多种呼吸道病毒的标准毒株确定方法的特异性.收集2002年11月至2003年10月的急性呼吸道感染患儿标本771例,应用巢式PCR方法检测标本中有无HRV基因片段.结果特异性检测结果显示仅HRV cDNA有预期大小的片段扩增.771例标本中HRV总检出例数为148例（148/771）,占19.2%;HRV阳性检出率在咽炎患儿中达到53.3%（8/15）,喉炎患儿43.8%（7/16）,支气管炎患儿为28.7%（29/101）,其他如急性扁桃体炎、急性肺炎等患儿也有较高的HRV阳性检出率.在2002年11月以及2003年8-10月HRV检测阳性率较高（21.6%～32.6%）,尤其在2003年9月份HRV检测阳性率最高,达到32.6%;2003年3-7月HRV阳性标本所占百分率较平稳,在16.0%～19.1%之间.结论建立的巢式RT-PCR可以检测到儿科呼吸道感染患儿标本中的鼻病毒基因片段;HRV是北京婴幼儿急性呼吸道感染的重要病毒病原之一.