定振丸对帕金森病大鼠神经递质及黑质多巴胺能神经元氧化应激的改善作用

目的探讨定振丸对帕金森病大鼠儿茶酚胺类神经递质及黑质多巴胺能神经元氧化应激的改善作用。方法利用6-羟多巴胺建立帕金森病大鼠模型,大鼠随机分为假手术组,模型组,定振丸低、中、高剂量组(11.03、22.05、44.10 mg/kg)及阳性组(美多芭1.67 mg/kg),1次/d,连续灌胃给药15 d。ELISA法检测脑黑质中DA、DOPAC、HVA、5-HT水平;应用硫代巴比妥那比色法、邻苯三酚自氧化法和二硫代二硝基苯甲酸直接法分别检测脑黑质匀浆上清液中MDA、SOD及GSH-Px水平;免疫组化法检测TH阳性率;TUNEL染色检测多巴胺能神经元细胞凋亡率;Western blot法检测Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达。结果与模型组比较,定振丸组DA、DOPAC、HVA、5-HT、SOD、GSH-Px水平,TH阳性率及Bcl-2蛋白表达均升高(P<0.05);MDA水平、多巴胺能神经元凋亡率、Bax及caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。结论定振丸能改善帕金森大鼠儿茶酚胺类神经递质及黑质多巴胺能神经元氧化应激的作用,下调Bax、caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,从而促进TH表达、抑制多巴胺能神经元凋亡。     

左归丸含药血清调节Runx2激活ALP、OPN蛋白促进BMSCs增殖和分化的研究

目的 探讨左归丸（Zuoguiwan,ZGW）的补肾填精、益髓壮骨的作用,促进骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）的增殖和向成骨细胞方向分化。方法 制备ZGW含药血清,设置10% FBS DMEM组、成骨诱导液组、2.5%空白大鼠血清-成骨诱导液组、2.5% ZGW含药血清-成骨诱导液组。采用MTT法观察各组对BMSCs的增殖,使用碱性磷酸酶钙钴染色法检测BMSCs向成骨细胞方向的分化能力,碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）法检测细胞培养液中AKP的含量,Western blot检测BMSCs中Runt相关转录因子2（Runx2）、骨钙蛋白（osteocalcin,OPN）和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）蛋白的表达。结果 2.5% ZGW含药血清-成骨诱导液组能够促进BMSCs的快速增殖,较早地进入平台期,促进BMSCs中AKP的分泌,提高ALP含量,上调BMSCs细胞中Runx2、ALP和 OPN的蛋白表达水平。结论 ZGW抗骨质疏松的分子机制,可能与调节Runx2激活ALP、OPN蛋白表达,促进BMSCs增殖和向成骨细胞方向分化有关。     

腹腔注射中药环维黄杨星D后高血压脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白43mRNA的表达

背景：生长相关蛋白43是一种与轴突生长相关的蛋白，在促进神经发育、轴突再生、突触生长、结构与功能重建等方面起关键作用；研究发现中药环维黄杨星D对实验性脑缺血再灌注大鼠脑损伤有一定保护作用。目的：观察高血压脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白43 mRNA表达情况及中药环维黄杨星D的影响。设计：随机对照动物实验。单位：佛山市中医院，广东省中医院中心实验室。材料：环维黄杨星D是从中药黄杨宁中提取的生物碱单体，环维黄杨星D粉剂由南京小营药制药厂生产提供，国家中药保护品种号ZYB20796057。SD大鼠120只，清洁级雄性，鼠龄两三个月，体质量90～120g。方法：实验于2005-06／2006-03在佛山市中医院、广东省中医院中心实验室完成。①双肾双夹法建立易卒中型肾血管性高血压大鼠模型，120只大鼠随机分为不施任何处理的肾血管性高血压大鼠空白组20只、仅作手术创伤的假手术组20只、脑缺血再灌注模型组40只和环维黄杨星D治疗组40只。②线栓法复制一侧大脑中脉闭塞脑缺血-再灌注模型，环维黄杨星D治疗组在缺血2h再灌注后分别每天腹腔注射环维黄杨星D6．48mg/kg加生理盐水1．5mL，2次／d；对照组中的各小组则同步腹腔注射生理盐水2mL／次，用法同治疗组；各组每天两次注射时间相隔7h。各组分别在缺血再灌注第1，7，14，30d处死。③制作脑片，用原位杂交检测不同时间点各组大鼠脑生长相关蛋白43 mRNA表达。主要观察指标：①脑缺血再灌注2h后，缺血区周围生长相关蛋白43 mRNA表达情况。②脑缺血再灌注2h后海马区生长相关蛋白43 mRNA表达。结果：120只大鼠全部进入结果分析。①生长相关蛋白43 mRNA免疫原位杂交结果：各组大鼠脑内海马结构，可以检测到表达较弱的生长相关蛋白43 mRNA的阳性细胞，脑缺血再灌注后血肿周围缺血半暗区表达丘脑生长相关蛋白43 mRNA的阳性表达细胞。②脑缺血再灌注后血肿周围生长相关蛋白43 mRNA表达情况：在空白组、假手术组未见阳性细胞；缺血再灌注后模型组1d出现血肿周围缺血半暗区生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞，7d明显增多，14d逐渐减少，30d仍有表达但明显减少，各时问点表达差异有显著性（P〈0．01）；环维黄杨星D治疗组血肿周围生长相关蛋白43 mRNA阳性表达细胞在各时间点较模型组多，差异有显著性（P〈0．05）。③脑缺血再灌注后大鼠海马区生长相关蛋白43 mRNA表达情况：空白组与假手术组比较差异无显著性；模型组自造模后，1d可见海马区较多的生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞，7d达到高峰，14d后逐渐下降．30d表达明显减少，但仍较假手术组明显多；环维黄杨星D治疗组海马区生长相关蛋白43 mRNA阳性细胞在各个时间点均比模型组多，差异有显著性（P〈0．01）。结论：环维黄杨星D上调实验性脑缺血再灌注大鼠脑生长相关蛋白43 mRNA的表达，可能与促进轴突的再生有关。     

脑缺血再灌注损伤大鼠脑内神经肽Y的动态变化

目的观察神经肽Y(neuropeptideY,NPY)在脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织内的动态变化。方法应用环形银夹钳夹SD大鼠的双侧肾动脉,制成易卒中型肾血管性高血压大鼠模型(RHRSP)。在此基础上采用线栓法制成一侧大脑中脉闭塞(MCAO)脑缺血再灌注模型,运用放射免疫法测定缺血6h后再灌注6h、72h1、68h大鼠脑内NPY的动态变化。结果缺血后再灌6h脑内NPY含量〔(108.22±11.48)ng/g〕较正常组〔(78.98±12.53)ng/g〕和假手术组〔(80.52±10.78)ng/g〕明显升高(P<0.01);72h后上升至高峰〔(152.80±11.31)ng/g〕,168h开始下降〔(132.21±10.20)ng/g〕,但仍高于正常组水平,P<0.01。结论NPY参与了脑缺血再灌注神经损伤的发生、发展的病理过程,是引起脑缺血再灌注损伤的可能原因之一。     

谭峰教授缺血性中风早期运用活血化瘀药治疗经验

缺血性中风是临床危急重症,具有发病率高、死亡率高、致残率高等特点。谭峰教授认为瘀为中风病发生发展的重要病机,治疗上以"早期活血化瘀"为基本治法,临床疗效显著。本文阐述了吾师谭峰教授论治中风的经验。     

半夏厚朴汤对顺铂所致水貂呕吐模型的作用及机制研究

目的 探讨半夏厚朴汤（BXHPT）对顺铂所致水貂呕吐模型的治疗作用以及对P物质（SP）/NK1R信号的影响。方法 36只水貂随机分为正常对照组,模型组,昂丹司琼组,BXHPT低、中、高剂量组（200、400、800 mg/kg）,各组分别给予相应的药物连续7 d,后采用顺铂腹腔注射构建呕吐模型,测定水貂的干呕和呕吐次数,ELISA法检测水貂大脑最后区SP的含量,Western blot法测定大脑最后区NK1R、p-ERK1/2、ERK1/2的蛋白水平。结果 模型组水貂干呕、呕吐次数,大脑最后区SP水平,NK1R,p-ERK1/2蛋白水平均明显高于正常对照组（P<0.05）。而BXHPT组水貂干呕、呕吐次数,大脑最后区SP水平,NK1R,p-ERK1/2蛋白水平均明显低于模型组（P<0.05）。结论 BXHPT可以治疗顺铂导致的水貂的呕吐,其机制可能与降低水貂大脑最后区SP/NK1R信号活化有关。      

弓形虫三磷酸核苷水解酶基因克隆、表达与鉴定

目的 对刚地弓形虫三磷酸核苷水解酶基因（NTPase）进行克隆、表达和鉴定。 方法 采用PCR扩增刚地弓形虫RH株的NTPase基因，克隆入pGEM?-T Easy载体，经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒pBAD-HisB，并转入大肠埃希菌(E.coli)BL21（DE3）中进行诱导表达。用镍-次氮基三乙酸亲和层析柱纯化重组质粒pBAD-HisB-NTPase表达产生的含组氨酸的重组蛋白，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析蛋白表达产物。 结果 PCR扩增得到特异的刚地弓形虫NTPase-Ⅱ基因序列，经测序鉴定无基因突变。SDS-PAGE结果表明NTPase-Ⅱ基因在E.coli BL21（DE3）中获得高效表达，其融合蛋白相对分子质量（Mr）约70 000，与理论值相近。Western blotting分析结果显示，纯化的重组蛋白可被弓形虫感染的鼠血清及鼠抗重组蛋白血清识别。 结论 所克隆表达的弓形虫NTPase-Ⅱ重组蛋白具有良好的抗原性。     

青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫童虫体内外杀虫效果观察

目的观察青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫童虫的杀虫效果。方法卫氏并殖吸虫囊蚴腹腔注射法感染大鼠,10d后按不同剂量服用青蒿琥酯,首次剂量加倍,连用6d。30d后剖解大鼠,观察青蒿琥酯减虫率;并与吡喹酮作比较;正常对照组童虫做体外培养,观察童虫在药液中的活动情况。结果服药后,青蒿琥酯低、中、高三个剂量组、吡喹酮组及对照组童虫检出率分别为26.1%、16.9%、15.9%、2.25%、83.6%,童虫重量减轻,体形减小(P<0.05);体外培养,病理组织切片表明:用药组童虫体棘都有改变。结论青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫童虫有一定的杀灭效果。     

弓形虫研究的过去、现在与未来

弓形虫为顶复动物门寄生原虫,呈世界性广泛分布,可感染所有温血动物,并在宿主免疫功能低下或受抑制时导致严重的疾患,其极高的流行性和致病的机会性已越来越引起人们的关注。本文回顾了弓形虫研究的历史,综述了目前弓形虫研究的热点并提出了在今后研究中需要解决的问题。     

熄风通络颗粒对前循环脑梗死患者外周血可溶性白细胞分化抗原40配体表达的影响

目的 观察熄风通络颗粒对风痰瘀阻型急性前循环脑梗死(AACI)患者外周血可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)表达的影响.方法 68例发病72h内的风痰瘀阻型AACI患者被随机分为治疗组(熄风通络颗粒+基础治疗,35例)和对照组(基础治疗,33例),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组治疗前和治疗后7d血sCD40L水平;同时用Barthel指数(MBI)、急性脑卒中评定表(NIHSS)评分法评价两组治疗前和治疗后14d神经功能缺损程度的变化.并以23例健康体检者sCD40L值作为正常参照值.结果 治疗组与对照组患者血清sCD40L水平(μg/L)治疗前(7.463±2.899,7.854±3.652),治疗后7d(5.273±1.698、7.349±2.113)均显著高于健康对照组(1.746±1.012,均P<0.05),治疗后7d治疗组sCD40L水平显著低于对照组(P<0.05);大梗死灶组sCD40L水平(10.312±1.975)明显高于中小梗死灶组(6.843±2.984,P<0.05).治疗后14d,治疗组NIHSS评分(分:3.428±1.034)较对照组(5.897±1.653)明显降低(P<0.05),治疗组MBI(87.356±12.429)则较对照组(69.139±14.572)明显增高(P<0.05).治疗组显著进步率(54.3%)明显高于对照组(33.30%,P相似文献