关于推进《法医毒理学》教学改革的几点建议

法医毒理学是法医学中重要的一门课程,作为法医学教育的重要组成部分,提高其教学质量对培养合格的法医学人才具有重要意义。它具有内容多、应用性强、学科交叉、更新快等特点。为提升《法医毒理学》的教学,应从着重培养中毒诊断思路、学生自主学习意识、教材及时更新并引进新的研究应用方法这几个方面探索改进。     

毛发分析的临床及法医学应用研究

近年来随着检测技术的发展,检测敏感性、特异性大为增强,毛发分析的研究领域不断扩展,已广泛应用于法医学、临床毒理学及工作场所的药物检测。最新研究表明毛发分析在临床应用方面可辅助临床诊断,用于患者用药顺应性研究等;法医学方面主要关注：THC-COOH在毛发样本中的确定,药物导致犯罪的毛发检测,对映性选择毛发试验程序等。     

关于推进《法医毒理学》教学改革的几点建议

法医毒理学是法医学专业的核心课程之一,作为法医学教育的重要组成部分,提高其教学质量对培养合格的法医学人才具有重要意义.结合教学实践及经验,对如何进一步提高法医毒理学教学质量进行了探讨,并提出了推进法医毒理学教学改革的几点建议.     

Role of reactive oxygen species in triptolide-induced apoptosis of renal tubular cells and renal injury in rats

This study investigated the role of reactive oxygen species(ROS) in the pathogenesis of triptolide-induced renal injury in vivo.Rats were randomly divided into 4 groups(n=5 in each):triptolide group in which the rats were intraperitoneally injected with triptolide solution at a dose of 1 mg/kg of body weight on day 8;control group in which the rats received a single intraperitoneal injection of 0.9% physiological saline on day 8;vitamin C group in which the rats were pretreated with vitamin C by gavage at a dose of 250 mg/kg of body weight per day for 7 days before the same treatment as the control group on day 8;triptolide+vitamin C group in which the rats were first subjected to an oral administration of vitamin C at a dose of 250 mg/kg of body weight per day for 7 days,and then to the same treatment as the triptolide group on day 8.All the rats were sacrificed on day 10.Blood samples were collected for detection of plasma creatinine(Pcr) and plasma urea nitrogen(PUN) concentrations.Both kidneys were removed.The histological changes were measured by haematoxylin-eosin(HE) staining.The production of ROS was determined by detecting the fluorescent intensity of the oxida-tion-sensitive probe rhodamine 123 in renal tissue.Renal malondialdehyde(MDA) content was meas-ured to evaluate lipid peroxidation level in renal tissue.TUNEL staining was performed to assess apop-tosis of renal tubular cells.Renal expression of apoptosis-related proteins Bcl-2,Bax,Bid,Bad,Fas and FasL,as well as corresponding encoding genes were assessed by Western Blotting and real-time PCR.The results showed that triptolide treatment promoted the generation of a great amount of ROS,up-regulated the expression of Bax,Bid,Bad,Fas and FasL at both protein and mRNA levels,as well as the ratio of Bax to Bcl-2,and caused the apoptosis of renal tubular cells and renal injury.However,pretreatment with an antioxidant,vitamin C,significantly reduced the generation of ROS and effectively inhibited the triptolide-induced apoptosis of renal tubular cells and renal injury.It was concluded that ROS plays a critical role in triptolide-induced apoptosis of renal tubular cells and renal injury.The protective administration of vitamin C may help alleviate triptolide-induced renal injury and nephrotoxicity.     

细胞凋亡在雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤中的作用及其发生机制

目的观察雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤情况,研究细胞凋亡在雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤中的作用及其发生机制。方法大鼠分别单次ip给予雷公藤甲素1、2 mg/kg,给药后48 h心脏采血,检测血浆尿素氮(BUN)与肌酐(Scr)水平;肾脏HE染色,光镜下观察肾组织形态学改变;应用原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测肾组织细胞凋亡情况;利用免疫组织化学染色法结合计算机图像分析技术检测肾组织内凋亡相关蛋白的表达情况,并利用RT-PCR技术测定肾组织内凋亡相关蛋白调控基因的表达。结果雷公藤甲素2个剂量组均可见大量肾小管上皮细胞凋亡,且高剂量的作用显著大于低剂量,细胞凋亡与肾功能改变相关;肾组织中Bax、Bid、Bad、Fas以及FasL蛋白表达明显增多,且呈剂量依赖性,而Bcl-2的表达未见明显改变。结论一次性ip大剂量雷公藤甲素会在短时间(48 h)内造成严重的肾损伤,肾小管上皮细胞凋亡是雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤的重要组织学基础之一,且Bcl-2家族以及Fas/FasL在雷公藤甲素诱导的肾小管上皮细胞凋亡的过程中起重要作用。     

雷公藤甲素诱发大鼠急性肾损伤的机制

目的:观察雷公藤甲素对大鼠肾脏的急性毒性作用,并探讨其发生机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为1个对照组和2个实验组,对2个实验组大鼠给予腹腔注射剂量分别为1,2 mg· kg-1的雷公藤甲素,对照组大鼠则给予相当量的空白对照液.注射后48 h将所有大鼠处死,采集心脏血液并取出双侧肾脏,检测血清尿素氮(BUN)与肌酐(Cr)含量,观察HE染色切片上肾组织形态学改变情况;应用原位末端标记法(TUNEL)检测肾组织细胞凋亡情况;测定肾组织内SOD,GSH-Px活性以及MDA含量.结果:一次性大剂量注射雷公藤甲素可在短时间内对大鼠肾脏造成严重损伤,剂量越大越显著;经雷公藤甲素处理后,肾组织中SOD与GSH-Px活性明显降低,而MDA含量则明显升高,且均与肾脏的损伤程度密切相关.结论:肾脏是雷公藤甲素急性毒性作用重要的靶器官,氧化应激在雷公藤甲素对肾脏造成的毒性损害中发挥了重要作用.     

应激抑制神经再生：糖皮质激素及其受体参与的作用？

背景及目的—应激抑制神经再生的效应众所周知,但确切的机制仍不清楚,由于糖皮质激素受体在脑内广泛分布,应激释放的糖皮质激素主要通过与糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合而发挥系列生物学效应,因此研究脑缺血后神经再生的激活、增殖、迁移及分布与脑内GR变化间的联系,或将揭示新生神经细胞受糖皮质激素水平调控的可能机制。方法—选取9-10周龄成年wistar大鼠,使用线栓法致其大脑中动脉闭塞0.5小时,脑缺血损伤诱导成功后重复腹膜下注射细胞增殖特异性标记5-溴脱氧尿苷（5-bromodeoxyuridine,BrdU）。灌流大鼠前取其心血制成血清标本用于皮质酮定量分析。使用ABC免疫组织化学方法,鼠脑切片行GR以及新生神经细胞的双标免疫染色。结果—脑缺血后大鼠应激激素皮质酮水平逐渐升高,术后第3周时皮质酮水平达到最高峰,其后逐步回落;GR+细胞数量术后逐渐减少,而血管内皮增生及神经生发等脑缺血后再生修复改变亦呈动态变化,BrdU及Nestin﹢细胞数量在术后第1、2周显著增加,DCX﹢细胞较多,由海马至皮层的迁移现象明显;至第3周起BrdU及Nestin﹢细胞数量明显减少且仅散布在室管膜周边,第4周时BrdU﹢细胞仍少见,仅缺血侧海马及纹状体DCX反应较明显。假手术组大鼠应激激素皮质酮水平术后即明显升高,其后呈现出逐渐降低的趋势,术后第3周,其水平逐渐稳定。术后第1、2周,各脑区GR﹢细胞正常分布,主要神经生发区可见一定数量的BrdU+、Nestin+及DCX+细胞存在;第3周时各脑区包括海马GR﹢细胞数量减少,仅皮层可见个别DCX﹢细胞,BrdU﹢细胞极少。结论—脑缺血后大鼠应激激素皮质酮水平逐渐升高,GR+细胞数量逐渐减少,而血管内皮增生及神经生发等脑缺血后再生修复改变与其相联系而呈动态变化,表现为皮质酮水平升高,GR+细胞数量减少,神经再生受抑制。假手术对照组大鼠并无血管内皮增生等损伤后改变,而皮质酮水平虽然快速升高,但GR数量及分布似乎并未受到影响,至少没有受到立即的直接影响,而主要神经生发区存在一定数量的神经干细胞及其迁移现象,这提示在正常状况下,或许存在某些机制能调节或者抑制皮质酮水平对糖皮质激素受体及神经再生的直接影响。     

细胞凋亡在雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤中的作用及其发生机制

目的 观察雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤情况,研究细胞凋亡在雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤中的作用及其发生机制。方法 大鼠分别单次ip给予雷公藤甲素1、2 mg/kg,给药后48 h心脏采血,检测血浆尿素氮（BUN）与肌酐（Scr）水平;肾脏HE染色,光镜下观察肾组织形态学改变;应用原位末端转移酶标记法（TUNEL）检测肾组织细胞凋亡情况;利用免疫组织化学染色法结合计算机图像分析技术检测肾组织内凋亡相关蛋白的表达情况,并利用RT-PCR技术测定肾组织内凋亡相关蛋白调控基因的表达。结果 雷公藤甲素2个剂量组均可见大量肾小管上皮细胞凋亡,且高剂量的作用显著大于低剂量,细胞凋亡与肾功能改变相关;肾组织中Bax、Bid、Bad、Fas以及FasL蛋白表达明显增多,且呈剂量依赖性,而Bcl-2的表达未见明显改变。结论 一次性ip大剂量雷公藤甲素会在短时间（48 h）内造成严重的肾损伤,肾小管上皮细胞凋亡是雷公藤甲素所致大鼠急性肾损伤的重要组织学基础之一,且Bcl-2家族以及Fas/FasL在雷公藤甲素诱导的肾小管上皮细胞凋亡的过程中起重要作用。