反相高效液相色谱法测定楤木属植物中黄酮类和香豆精的含量

目的：对木属植物中草本和木本两个自然群进行化学分类学的研究。方法：应用反相高效液相色谱法测定木属植物中４种化学成分［ｎｅｏｌｉｇｕｉｒｉｔｉｎ（Ｉ）,５,８ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｃｏｕｍａｒｉｎ（ＩＩ）,ｉｓｏｌｉｑｕｒｉｔｏｓｉｄｅ（ＩＩ）,８［（２″,３″）ｐｒｅｎｙｌ］４′ｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ７ＯβＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（２→１）αＬｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ（ＩＶ）］,对本属１１种植物中该４种成分进行了定量分析。色谱柱固定相为ＳｕｐｅｌｃｏＳＩＬＬＣ１８;流动相为４０％甲醇—甲醇梯度洗脱,根据４种成分紫外吸收波长的不同而改变检测波长;流速１０ｍｌ·ｍｉｎ－１;４种成分的线性范围分别为（０５６００～００１７５）μｇ,（０３７６０～００１１８）μｇ,（０２８７５～０００９０）μｇ和（０３０９０～０００９７）μｇ,回收率分别为９８９２％,９８２７％,９４７８％和９７４１％。结果：木本自然群中香豆精成分含量较高。结论：香豆精为木本自然群区别于草本自然群的特征成分之一     

关于中成药水蜜丸制剂掺伪米粉监管方法的研究

目的： 为了解决中成药水蜜丸掺伪米粉无检测方法的问题,引入普通PCR方法和荧光探针PCR 方法并制定相应新标准,以完善中成药掺伪检测的监管体系。方法：以通宣理肺丸为例,着重介绍引入PCR方法在完善中成药米粉掺伪检测体系中发挥的新作用。方法通过优化样品前处理和DNA提取过程,采用生物信息学分析和试验验证对检索得到的引物和探针特异性进行评估,并对2种方法的特异性、检出限、精密度和重复性进行考察和比较,对市售样品进行筛查。结果：试验通过评估DNA分子提取质量,选定了天根DNA提取试剂盒;建立了普通PCR方法和荧光探针PCR方法,并获得了适合于本研究的特异性引物和探针;2种PCR方法的检出限均为1 g·Kg^-1;普通PCR方法精密度和重复性良好,荧光探针PCR方法的精密度RSD为1.56%(Ct值=29.74),重复性RSD为1.98%(Ct值=29.88)。 试验对3个厂家9批次样品进行筛选,结果表明6批次A厂家的样品掺入了米粉。PCR产物经过克隆测序后,与NCBI数据库比对,确认为水稻(Oryza sativa L.)。根据不同PCR检测方法的特点,通过参考其他行业标准,首次制定了中成药掺伪米粉的PCR检验检测标准。结论：建立了水蜜丸中普通PCR和荧光探针PCR掺伪检测方法并制定相应检测标准,通过新方法和新标准的建立,弥补了掺伪检测在监管中的漏洞,完善了中成药监管的标准化体系。     

HPLC-MS同时测定益母草制剂中盐酸水苏碱与盐酸益母草碱的含量

建立益母草制剂中盐酸水苏碱与盐酸益母草碱的含量测定方法。采用LC-MS同时测定盐酸水苏碱与盐酸益母草碱的含量。使用Waters XBridge Amide色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,流速1.0 m L·min-1,分流比为1∶4。质谱条件为ESI离子源,正离子模式,选择性离子扫描(SIM)下对盐酸水苏碱(m/z 144.0)和盐酸益母草碱(m/z312.0)进行测定。盐酸水苏碱浓度在0.562 8~281.4μg·L-1线性关系良好(r=0.999 8)。盐酸益母草碱浓度在0.521 2~260.6μg·L-1性关系良好(r=0.999 8)。该方法准确、简便、可靠,可作为益母草制剂的含量测定方法。     

赤芝子实体中灵芝酸类成分的研究

自赤芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ．］子实体的二氯甲烷提取物中分离得到一个新的四环三萜化合物，命名为灵芝酸ＤＭ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＤＭ，Ｉ）。根据光谱（ＵＶ，ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ２ＤＮＭＲ）分析，确定其结构为Ｉ式。同时还分离得到二个已知的灵芝酸类化合物，即灵芝酸Ａ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＡ，Ｉ）和灵芝酸Ｃ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＣ，ＩＩ）。     

反相高效液相色谱法测定楤木属植物中二萜酸、三萜酸和三萜皂苷的含量

为进一步探讨楤木属草本自然群、木本自然群中植物的有效成分的差异,本文首次建立了楤木属植物中6种化学成分的反相高效液相色谱法,对本属11种植物中该6种成分进行了定量分析。色谱柱为SupelcoSIL－LC－18,流动相为甲醇—1%乙酸—四氢呋喃(500∶110∶1);检测波长为205nm,流速1.2ml·min^-1,6种成分的线性范围分别为0.135～2.160μg,0.163～2.610μg,0.123～1.962μg,0.068～1.080μg,0.135～2.160μg,0.135～2.160μg,回收率分别为89.64%,86.88%,91.34%,93.31%,87.72%和92.08%。结果提示:二萜类成分是草本自然群区别于木本自然群的特征成分,为进一步将木属中草本和木本两个自然群划分为两个独立的亚属提供了化学分类学的依据。     

Triterpenoids from the Fruiting Body of Ganoderma lucidum

自赤芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ］的二氯甲烷溶解部分分离得到一个新的三萜内酯化合物，命名为灵芝内酯（ｇａｎｏｌａｃｔｏｎｅ）。根据光谱（ＵＶ，ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ和２ＤＮＭＲ）解析，确定其结构为１式。同时还从赤芝子实体中分到三个已知化合物，即灵芝醇Ａ（ｇａｎｏｄｅｒｉｏｌＡ，２），灵芝醇Ｂ（ｇａｎｏｄｅｒｉｏｌＢ，３）和灵芝三醇（ｇａｎｏｄｅｒｍａｔｒｉｏｌ４）。     

反相高效液相色谱法测定赤芝中灵芝酸的含量

 目的 研究不同地区栽培赤芝及好生赤芝灵芝酸类成分的含量差异。方法 应用反相高效液相色讲法分离测定了赤芝中4种化学成分[灵芝酸A(Ⅰ),灵芝酸C(Ⅱ),灵芝酸D(Ⅲ),灵芝酸E(Ⅳ)],对不同地区2种好生赤芝和不同地区4种栽培赤芝子实体中该4种成分定量分析。色谱柱YWG-C〈sub〉18〈/sub〉(250 mm×4.6 mm,10 μm),甲醇水-乙酸(49.5:49.5:1)为流动相,流速1.0 ml·min〈sup〉-1〈/sup〉,柱温为室温,检侧波长250 nm;4种成分的线性范围分别为(0.098～3.138)μg,(0.091～2.913)μg,(0.089～2.850)μg和(0.089～2.850)μg,回收率分别为93.93%,96.83%,93.0l%,90.40%。结果 栽培赤芝和野生赤芝子实体中4种灵芝酸成分的总含1分别为0.799～3.555 mg·g〈sup〉-1〈/sup〉和1.619～2.360 mg·g〈sup〉-1〈/sup〉。结论不同地区栽培赤芝之间和不同地区野生赤芝之间灵芝酸含量差异较大;裁培赤芝中灵芝酸含1不低于野生赤芝中灵芝酸含量。本法可作为控制灵芝生药质量的一种很好方法。     

小活络丸中小麦粉掺伪实时荧光PCR检测方法的建立

目的:通过实时荧光PCR-高分辨熔解曲线(HRM)联合分析技术,建立小活络丸(大蜜丸)中小麦粉掺伪快速、准确鉴别方法。方法:通过优化前处理方法,提取小活络丸样品的基因组;通过文献检索和生物信息学分析,得到小麦粉特异性引物;使用实时荧光PCR-HRM技术,对10批次小麦(粉)、16种其他禾本科植物及7种常见高淀粉食物样品进行特异性扩增,采用克隆测序对结果进行再确认;考察实时荧光PCR-HRM方法的检出限、精密度和重复性,同时对市售的小活络丸样品进行检测。结果:试验筛选获得了适用于本研究的特异性引物,建立了实时荧光PCR-HRM小活络丸掺伪小麦的检测方法;小活络丸样品掺伪小麦粉的检出限为0.01 g·g^-1,试验精密度C_t值为26.63(RSD=2.15%),T_m值为89.53℃(RSD=0.05%);重复性Ct值为26.65(RSD=3.20%),T_m值为89.53℃(RSD=0.12%)。试验对市售的4个厂家9批次共计81份样品进行分析,确定了3批次来源于A厂家的小活络丸样品存在小麦粉掺伪的问题,将PCR扩增产物克隆测序,其结果为小麦(Triticum Aestivum L.)。结论:本研究建立了实时荧光PCR-HRM检测方法,可以快速判定小活络丸中小麦粉掺伪样品。     

黄芪药材HPLC特征图谱研究(1)皂苷类成分

目的:建立黄芪中皂苷类成分的液相色谱特征图谱。方法:通过比较碱化处理前后皂苷类成分的变化,进一步证明碱性条件可以促使黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ转化为黄芪皂苷Ⅳ,并确定黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为特征成分。结果:4个特征成分分离良好。结论:本方法简便易行,所选特征成分可用于黄芪中皂苷类成分的检查。     

黄芪中氨基酸、黄酮类成分的特征薄层图谱鉴别

目的 建立黄芪中氨基酸、异黄酮类成分的薄层特征图谱检查方法.方法 归纳总结《中国药典》2005年版、中药成方制剂标准及新药转正标准等相应标准中涉及黄芪中氨基酸、异黄酮类成分的检查法,试验筛选比较,最终确定特征薄层图谱.结果 两类成分的特征成分分离良好.结论 本方法简便易行,可用于黄芪中氨基酸、异黄酮类成分的检查.