| 小活络丸中小麦粉掺伪实时荧光PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 任秀,王菲菲,李静,白继超,张聿梅,马双成,崔生辉.小活络丸中小麦粉掺伪实时荧光PCR检测方法的建立[J].中国药事,2022,36(1):66-77. |
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| 作者姓名： | 任秀 王菲菲 李静 白继超 张聿梅 马双成 崔生辉 |
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| 作者单位： | 中国食品药品检定研究院,北京 100050 |
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| 摘 要： | 目的:通过实时荧光PCR-高分辨熔解曲线(HRM)联合分析技术,建立小活络丸(大蜜丸)中小麦粉掺伪快速、准确鉴别方法。方法:通过优化前处理方法,提取小活络丸样品的基因组;通过文献检索和生物信息学分析,得到小麦粉特异性引物;使用实时荧光PCR-HRM技术,对10批次小麦(粉)、16种其他禾本科植物及7种常见高淀粉食物样品进行特异性扩增,采用克隆测序对结果进行再确认;考察实时荧光PCR-HRM方法的检出限、精密度和重复性,同时对市售的小活络丸样品进行检测。结果:试验筛选获得了适用于本研究的特异性引物,建立了实时荧光PCR-HRM小活络丸掺伪小麦的检测方法;小活络丸样品掺伪小麦粉的检出限为0.01 g·g-1,试验精密度Ct值为26.63(RSD=2.15%),Tm值为89.53℃(RSD=0.05%);重复性Ct值为26.65(RSD=3.20%),Tm值为89.53℃(RSD=0.12%)。试验对市售的4个厂家9批次共计81份样品进行分析,确定了3批次来源于A厂家的小活络丸样品存在小麦粉掺伪的问题,将PCR扩增产物克隆测序,其结果为小麦(Triticum Aestivum L.)。结论:本研究建立了实时荧光PCR-HRM检测方法,可以快速判定小活络丸中小麦粉掺伪样品。
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| 关 键 词： | 小活络丸 小麦粉 实时荧光PCR 高分辨率熔解曲线 禾本科植物 |
The Establishment of Real-time PCR Detection Method for the Adulteration of Wheat Powder in Xiaohuoluo Wan |
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| Ren Xiu,Wang Feifei,Li Jing,Bai Jichao,Zhang Yumei,Ma Shuangcheng,Cui Shenghui.The Establishment of Real-time PCR Detection Method for the Adulteration of Wheat Powder in Xiaohuoluo Wan[J].Chinese Pharmaceutical Affairs,2022,36(1):66-77. |
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| Authors: | Ren Xiu Wang Feifei Li Jing Bai Jichao Zhang Yumei Ma Shuangcheng Cui Shenghui |
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| Institution: | National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050 , China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Xiaohuoluo Wan wheat powder real-time PCR high-resolution melting curve Gramineae plants |
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