左金丸抗幽门螺杆菌感染的分子网络调控机制研究

目的基于网络药理学和生物信息学方法探究左金丸抗幽门螺杆菌(Hp)感染的分子网络调控机制。方法通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索左金丸化学成分,筛选并预测其入血活性成分和作用靶点,检索疾病数据库中与Hp感染相关的作用靶点,构建左金丸成分靶点与疾病靶点的交互网络,获得左金丸抗Hp的特征性基因;通过DAVID6.8数据库对上述特征性基因进行GO功能富集和KEGG通路富集分析;利用Cytohubba筛选出左金丸抗Hp感染的关键靶点。结果通过TCMSP筛选、预测得到左金丸32个入血活性成分和197个作用靶点。GO分析共得到199条富集结果,其中生物过程包含炎症反应、RNA信号转录、信号传导等152条,细胞组分包含细胞核、细胞外基质、蛋白复合物等19条,分子功能包含细胞因子活性、DNA结合、ATP结合等28条。KEGG分析结果显示,Jak-STAT信号通路、T细胞受体信号通路、细胞周期信号通路、Wnt信号通路等65条通路与左金丸抗Hp感染密切相关。经Cytohubba筛选得到CXCL8、IL10、IL4、VEGFA、MMP9等10个关键基因。结论左金丸抗Hp感染具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点,可为其活性成分研究和抗Hp药效及机制研究提供依据。     

结合《内经》再析《伤寒论》“观其脉证”法

辨证论治是中医学的核心和特色,笔者结合《内经》对《伤寒论》"观其脉证"法进行解析。认为详观脉证是辨证的前提,临床面对患者应四诊合参,以脉为先、善抓主症、动态观察,同时注重个别症状。审证求因是辨证论治的关键环节,应依脉证辨阴阳、辨病邪类型、辨病位、辨虚实、辨实热。     

茵陈蒿汤对MKR鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的作用

目的 探讨茵陈蒿汤对MKR鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的作用机制。方法 8周龄MKR小鼠40只高脂喂养8周后,随机分为模型组、茵陈蒿汤原方剂量组（17.16 g·kg^-1）,茵陈蒿汤教材剂量组（4.68 g·kg^-1）,二甲双胍+辛伐他汀组［（65+2.6）×10^-3 g·kg^-1）］,同龄MKR鼠10只作为空白组,FVB鼠10只分别作为正常组。各组灌胃给药8周后,测定小鼠肝脏湿重,口服糖耐量（OGTT）,血清炎性因子白细胞介素-6（IL-6）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,血脂和肝功能的变化,透射电镜和苏木素-伊红（HE）染色对肝脏组织形态进行观察,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏组织Toll样受体4（TLR4）,髓样分化因子88（MyD88）,核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达变化。结果 与模型组比较,给药组小鼠肝湿重指数显著降低（P<0.01）,OGTT较模型组明显有所改善（P<0.05）,血清中IL-6,TNF-α含量显著降低（P<0.01）,形态学改变上,茵陈蒿汤对肝细胞结构有保护作用,减少肝细胞脂肪样变性;茵陈蒿汤可以明显下调T2DM合并NAFLD模型小鼠肝脏组织TLR4,MyD88,NF-κB蛋白含量（P<0.05）,且对于TLR4,NF-κB的下调,茵陈蒿汤原方剂量明显优于茵陈蒿汤剂量（P<0.05）。结论 茵陈蒿汤能降低炎症因子水平,肝组织TLR4,MyD88,NF-κB的表达水平,改善肝脏病理损伤,干预MKR鼠T2DM合并NAFLD疾病状态,具有一定保护肝功能,降低血脂以及延缓肝脏炎症反应的作用。     

雷公藤多苷治疗糖尿病肾病的系统评价再评价

目的 针对雷公藤多苷（TG）治疗糖尿病肾病（DKD）的系统评价/Meta分析进行系统评价再评价（伞形综述）,以期为TG治疗DKD提供更高质量的循证依据。方法 检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库和PubMed、Cochrane Library、Embase数据库中TG治疗DKD的系统评价/Meta分析,通过PRISMA 2020声明、AMSTAR 2量表、GRADE工具分别进行报告质量、方法学质量及证据质量评价,同时对纳入系统评价/Meta分析的定量结果进行综合分析。结果 共纳入18篇系统评价/Meta分析,PRISMA 2020声明评价结果显示,3篇文献报告较完整,13篇报告存在部分信息缺陷,2篇报告存在严重信息缺陷;AMSTAR 2量表评价结果显示,4篇文献方法学质量等级为低级,14篇文献方法学质量等级为极低级;GRADE工具评价结果显示,共106个结局指标,中级证据34个（占比为32.1%）、低级证据51个（占比为48.1%）,极低级证据21个（占比为19.8%）,无高级证据;各结局指标定量结果综合分析显示,TG对DKD总有效率、24 h尿蛋白定量、血清白蛋白均有确切...     

李东垣论治消渴学术思想浅析

李东垣为金元四大家之一,其论治消渴病的理、法、方、药自成一家。李氏在《内经》的基础上创立"阴火"理论,提出重视脾胃与元气、独创"升阳泻火"之法以及特色组方用药等影响至今,其论治思想与现代医学对糖尿病的认识具有一致性,对于糖尿病及其并发症的防治意义深远。     

左归降糖益肾方对糖尿病肾病MKR鼠肾组织TGF-β1及CTGFmRNA表达的影响

目的:探讨左归降糖益肾方对糖尿病肾病骨骼肌特异性胰岛素样生长因子-1受体缺失转基因鼠(MKR鼠)转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)基因mRNA表达的影响。方法:MKR鼠60只,按性别、空腹血糖、体重随机分为4组,即空白组,模型组,左归降糖益肾方组(28.8 g·kg-1),阳性药物组(格列喹酮0.003 9 g·kg-1与盐酸贝那普利0.001 3 g·kg-1),每组15只,同龄C57鼠10只作为正常组,除正常组与空白组外,其余各组高脂喂养联合单侧肾切除造成糖尿病肾病(DN)小鼠模型,造模后8周ig给予相应药物8周,留取尿标本,心脏采血处死各组小鼠。电化学法检测空腹血糖(FBG),常规生化法检测血清肌酐(SCr),尿素氮(BUN)含量,ELISA检测尿微量白蛋白含量;并取新鲜肾组织,RT-PCR检测肾组织TGF-β1及CTGF mRNA的表达水平;其余组织4%多聚甲醛固定24 h,HE及Masson染色观察肾组织病理变化。结果:与空白组比较,模型组小鼠FBG,SCr,BUN及尿微量白蛋白含量明显升高(P0.01);与模型比较,左归降糖益肾方能明显降低DN小鼠FBG,降低SCr,BUN及尿微量白蛋白含量(P0.01);下调TGF-β1mRNA及CTGF mRNA的表达水平(P0.05,P0.01),疗效等同于阳性药物组;与空白组比较,模型组肾组织肾小球体积缩小,肾小球萎缩,球囊腔增宽,球囊腔壁层细胞增多且异形化,左归降糖益肾方能明显改善肾组织病理损伤。结论:左归降糖益肾方可以通过下调TGF-β1mRNA及CTGF mRNA的表达水平,从而抑制肾组织纤维化的发生发展。     

左归降糖益肾方含药血浆对高糖培养小鼠足细胞凋亡及Caspase-12表达的影响

目的 探讨在高糖作用下,体外培养的小鼠足细胞凋亡及内质网应激凋亡因子Caspase-12 mRNA和蛋白表达水平的变化及左归降糖益肾方含药血浆的调控作用.方法 将体外培养的小鼠足细胞随机分为空白组(A组,25 mmol/L葡萄糖,10％空白血浆)、高糖组(B组,200 mmol/L葡萄糖,10％空白血浆)、左归降糖益肾方含药血浆组(C组,200 mmol/L葡萄糖,10％含药血浆),4-苯基丁酸含药血浆组(D组,200 mmol/L葡萄糖,10％含药血浆).培养48 h后,采用免疫荧光细胞化学法、流式细胞术检测足细胞凋亡情况;Western blot法、RT-PCR法分别检测Caspase-12蛋白或mRNA表达水平的变化.结果 与A组比较:在高糖状态下B组足细胞凋亡率、Caspase-12 mRNA和蛋白的表达水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与B组比较:C组、D组足细胞凋亡率,Caspase-12 mRNA和蛋白的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与C组比较:D组足细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P＜0.05);但Caspase-12 mRNA和蛋白的表达水平,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 Caspase-12表达上调,是足细胞凋亡的分子机制之一;10％左归降糖益肾方含药血浆可能通过降低Caspase-12的表达水平,从而保护足细胞.     

薯蓣丸联合龙血竭胶囊对MKR转基因2型糖尿病小鼠创面愈合的影响

目的通过薯蓣丸联合龙血竭胶囊对MKR转基因2型糖尿病小鼠创面进行干预,探讨薯蓣丸联合龙血竭胶囊对糖尿病创面愈合的影响。方法选取8周龄MKR小鼠80只,雌雄各半,按照小鼠的空腹血糖情况及体重随机分为5组:模型组、薯蓣丸+龙血竭组[薯蓣丸提取液(37.2 g/kg·d)]、薯蓣丸组、龙血竭组、二甲双胍组,每组16只小鼠。另设16只C57/BL6小鼠作为正常组。制造全层皮肤缺损的创面模型后分别给药14天,观察空腹血糖、创面愈合率、病理形态结构、晚期糖基化终末产物(AGE)及T细胞亚群(CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)含量。结果与模型组比较,给药14天时薯蓣丸+龙血竭组、薯蓣丸组、二甲双胍组空腹血糖降低(P0.01);给药3、7、10、14天时各给药组创面愈合率升高(P0.01)。与二甲双胍组比较,给药3、7、10、14天时薯蓣丸+龙血竭组创面愈合率升高(P0.01)。给药7天后,薯蓣丸+龙血竭组、薯蓣丸组、二甲双胍组、龙血竭组HE染色可见成纤维细胞,与模型组比较炎性细胞浸润减少;给药14天后,薯蓣丸+龙血竭组、薯蓣丸组、二甲双胍组、龙血竭组无明显炎性增生,炎症细胞较用药7天时明显减少。与模型组比较,给药7天时二甲双胍组、薯蓣丸+龙血竭组、龙血竭组、薯蓣丸组CD3~+、CD4~+百分比及CD4~+/CD8~+比值升高(P0.05,P0.01),CD8~+百分比降低(P0.01);给药14天时,薯蓣丸+龙血竭组、龙血竭组及二甲双胍组CD4~+/CD8~+比值升高,薯蓣丸+龙血竭组、龙血竭组、薯蓣丸组、二甲双胍组CD3~+、CD4~+、CD8~+百分比降低(P0.05,P0.01)。结论薯蓣丸联合龙血竭胶囊能促进糖尿病创面愈合,其机制可能与降低血糖、AGE,提高机体细胞免疫以及改善炎症反应有关。     

黄芪桂枝五物汤通过调节内质网应激对MKR小鼠糖尿病周围神经病变的作用

目的 探讨黄芪桂枝五物汤通过调控内质网应激c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路相关蛋白治疗糖尿病周围神经病变的作用机制。方法 8周龄骨骼肌特异性胰岛素样生长因子-1受体功能缺失小鼠（MKR小鼠）32只，雌雄各半，予高脂饲料喂养4周后，1%链脲佐菌素（STZ）连续腹腔注射5 d；血糖稳定后，每天将小鼠放入铺满冰袋的喂养笼，使其在冰上活动1 h，持续4周。将空腹血糖值≥11.1 mmol·L^-1的小鼠随机分为模型组、黄芪桂枝五物汤原方剂量组（30 g·kg^-1·d^-1）、黄芪桂枝五物汤方剂学剂量组（6.25 g·kg^-1·d^-1）、阳性药物（甲钴胺）组（0.17 mg·kg^-1·d^-1）。另设同龄MKR鼠8只作为空白组；FVB鼠8只作为正常组。各组灌胃药物4周后，测定小鼠空腹血糖（FBG）的变化，苏木素-伊红（HE）染色和透射电镜对坐骨神经组织形态进行观察，免疫组化法、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测坐骨神经组织内质网应激相关蛋白JNK、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）与肌醇需求激酶1α蛋白（IRE1α）的表达变化。结果 小鼠行为学与功能学检测显示，与正常组和空白组比较，模型组小鼠缩足舔足、甩尾时间显著缩短（P<0.01），坐骨神经传导速度显著降低（P<0.01）；与模型组比较，黄芪桂枝五物汤处理后，能够明显改善小鼠行为学与功能学检测指标（P<0.05，P<0.01）。免疫组化结果显示，与正常组和空白组比较，模型组小鼠JNK的表达明显升高（P<0.05）；与模型组比较，黄芪桂枝五物汤处理后，JNK的表达明显降低（P<0.05），但给药组之间差异无统计学意义。Western blot结果显示，与正常组和空白组比较，模型组小鼠坐骨神经IRE1α、p-JNK蛋白表达有不同程度的明显升高（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，黄芪桂枝五物汤可以相应下调模型小鼠坐骨神经IRE1α、p-JNK蛋白表达含量（P<0.05，P<0.01）；原方剂量组与教材剂量组比较，差异无统计学意义。结论 黄芪桂枝五物汤可改善坐骨神经功能、减轻坐骨神经组织损伤，其机制可能与黄芪桂枝五物汤抑制坐骨神经的内质网应激反应水平有关。     

左归降糖舒心方含药血浆对ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响

目的?探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响及其作用机制。方法?将巨噬细胞J774A.1随机分为正常组、模型组、牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）组、左归降糖舒心方含药血浆组、西药联合含药血浆组,每组5个复孔。除正常组外其余各组以ox-LDL（100?mg/L）处理构建巨噬细胞泡沫化模型。正常组和模型组正常培养,其余各组分别用10%相应含药血浆培养24?h。CCK-8法比较各组J774A.1细胞增殖情况,计算细胞抑制率;油红O染色检测细胞内脂质蓄积水平;Western blot检测双链RNA样内质网激酶（PEPK）、活化转录因子4（ATF4）、真核翻译起始因子2α（eIF2α）、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白（CHOP）及半胱氨酸蛋白酶蛋白-12（Caspase-12）的表达水平。结果?与正常组比较,模型组细胞抑制率增高,在ox-LDL浓度为100?mg/L时细胞抑制率为（50.06±0.09）%,有明显的脂质颗粒蓄积（P<0.01）。与模型组比较,各药物干预组细胞抑制率降低,可有效阻断ox-LDL的摄入及脂质堆积,其中左归降糖舒心方含药血浆组优于西药联合含药血浆组,与TUDCA组作用效应相当。ox-LDL可诱导细胞内质网应激相关蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP与Caspase-12表达上调。左归降糖舒心方含药血浆可显著抑制100?mg/L ox-LDL所致的p-PERK、p-eIF2α、ATF4的上调,降低内质网相关凋亡蛋白CHOP与Caspase-12的表达（P<0.01）,和TUDCA组作用相当(P＞0.05),其效果较西药联合含药血浆组明显（P<0.01）。结论?左归降糖舒心方含药血浆能有效改善ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化、细胞凋亡及内质网应激状态,其作用机制可能与调控内质网应激信号通路PERK/eIF2α/ATF4通路,降低细胞内CHOP与Caspase-12表达有关。