灰树花菌丝体抗肿瘤糖肽GFPS1b结构的研究

以体外抑制肿瘤细胞增殖的活性作为筛选导向，从灰树花深层发酵培养菌丝体中提取、分离纯化得到一酸性糖酞GFPS1b．HPGPC法测得其重均相对分子质量为21000．蛋白质质量分数16．60％，糖质量分数为81．32％。利用化学方法（单糖组成分析、部分酸水解、甲基化分析）和仪器方法（GC、GC—MS、红外吸收光谱、核磁共振）分析GFPS1b的糖链结构，结果表明其单糖组成主要有G1c、Ga1、Ara和少量的糖醛酸，其糖链主链由两个α-D—G1c（1→3）、α-D—Ga1（1→4）、α-D—G1c（1→3，6）和α-D—Ga1（1→6）组成的，其中葡萄糖基的6位发生取代，取代侧链主要为α-L—Ara-（1—4）-α-D—Glc（1→。可以认为GFPS1b为一新糖肽。     

灰树花多糖咀嚼片中多糖含量测定

目的：建立简单易行的多糖含量测定方法,测定灰树花多糖咀嚼片中多糖的含量。方法：采用硫酸-蒽酮法,618nm测定,葡萄糖作对照。结果：线性关系为Y=0.1259X＋0.1248（R2=0.9991）,线性范围为0.0232~0.1392mg/ml,回收率99.6%,制剂中多糖含量73.0%。结论：该方法简单易行,能用于灰树花多糖咀嚼片中多糖的含量测定。     

注射用灰树花倍他葡聚糖的高效液相色谱指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法建立注射用灰树花倍他葡聚糖的指纹图谱。方法采用Shodex OH pak SB-804HQ色谱柱,以0.2 mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相,流速0.5 mL/min,柱温35℃,以示差折光检测器(RID)进行检测,建立反映药材、中间体和注射剂多糖活性成分的指纹图谱(1);采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈为流动相A,水(含0.05%磷酸)为流动相B,进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,以二极管阵列检测器(DAD)在波长254 nm处进行检测,建立反映药材其它成分指纹特性的指纹图谱(2)。结果10批灰树花发酵菌丝体药材、中间体和注射剂的相似度均在95%以上,多糖活性成分在药材、中间体和注射剂之间表现出良好的相关性,方法学考察结果也符合要求。结论建立的指纹图谱既体现了多糖活性成分的相关性,又体现了药材其它组分的指纹特征,可用于灰树花药材鉴定和注射剂的质量控制。     

灰树花β-葡聚糖的遗传毒性试验

灰树花(Grifola frondosa)为药食两用真菌,属担子菌和多孔菌属.研究证明,灰树花多糖具有抑制肿瘤、免疫调节、抗病毒、调节血糖和血脂水平、改善脂肪代谢等多种生物活性[1].     

灰树花中血管紧张素转换酶抑制剂的分离纯化

血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂被应用为降血压的药物已有20余年的历史[1,2]。此类药物可分为2类:肽类抑制剂和非肽类抑制剂。市面上应用较为广泛的是非肽类抑制剂,主要指合成法制备的ACE抑制剂。这类抑制剂成药较早,并且发展很快,药效强劲,降压效果明显,但此类药副作用明显,常见有首剂低血压症、肾功能损害、高血钾症、咳嗽、血管神经性水肿、皮疹、味觉障碍[3,4]等。随着生物技术的发展和对药物安全性的重视的加强,ACE抑制剂的     

营养条件对灰树花产胞外多糖产量的影响

灰树花是一种营养丰富的食、药两用真菌 .灰树花胞外多糖是一种具有生理活性的真菌多糖 .作者研究了营养条件对灰树花产胞外多糖的影响 ,确定了合理的初始碳源、氮源、无机离子、生长因子的质量浓度 .进一步的正交试验表明 ,灰树花产胞外多糖较佳的培养基组合为 :葡萄糖 4 0g/L ,蛋白胨 5g/L、磷酸二氢钾 4 g/L ,硫酸镁 2 g/L、玉米浆 2 0 g/L .     

灰树花多糖对四氯化碳致急性肝损伤的保护作用

目的探讨灰树花多糖(Polysaccharide of Grifola Frondosa,PGF)对四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)急性肝损伤的保护作用。方法 72只昆明种小鼠随机分为8组:正常对照组、CCl4损伤组、PGF保护组(4.5、9、18、36、72、144mg/kg),每组9只。CCl4腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型。观察肝组织病理学改变;测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,肝组织匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量及凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达。结果与CCl4损伤组比较,PGF保护组肝组织病理改变明显减轻;血清ALT、AST活性明显降低(P0.05);肝组织匀浆SOD含量明显升高(P0.05);MDA含量明显降低(P0.05);凋亡相关蛋白bcl-2的表达量明显增加、bax的表达量明显降低。综合各指标以72mg/kg保护组效果最佳。结论PGF对CCl4急性肝损伤有明显保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化,清除自由基,调节凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达有关。     

灰树花提取物对脾虚小鼠腹腔巨噬细胞和脾细胞的影响

目的:探讨灰树花提取物对脾虚小鼠的免疫调节机制。方法:健康雄性清洁级昆明小鼠30只随机分为6组,即空白对照组、脾虚组、阳性对照组(香菇多糖,2 mg·kg-1)、灰树花提取物低剂量组(5 mg·kg-1),灰树花提取物中剂量组(10 mg·kg-1)、灰树花提取物高剂量组(20 mg·kg-1),每组5只,滤菌后ip 10 d,第11天处死动物。检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红、产生一氧化氮(NO)能力(Griess法),以及MTT法检测淋巴细胞转化率、自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性。结果:高剂量灰树花提取物可明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力(P<0.05)和产生NO能力(P<0.01);高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏B细胞增殖能力(P<0.01);中、高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏T细胞增殖能力(P<0.05和P<0.01)灰树花提取物中、高剂量组小鼠脾脏NK细胞杀伤能力均明显高于脾虚组(P<0.01)。结论:灰树花提取物可以通过提高巨噬细胞吞噬能力和产生NO能力、以及淋巴细胞转化率、NK细胞杀伤活性的途径提高脾虚小鼠的免疫功能。     

流动相对灰树花多糖相对分子质量测定影响的考察

目的:考察流动相对高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定灰树花多糖（GFP）相对分子质量（Mr）的影响因素。方法:采用HPGPC法分别以不同的流动相、盐浓度、pH测定GFP的Mr,并对测定结果进行分析。结果:分别以纯水、0.02%NaN₃、0.1mol·L^-1NaNO₃和0.1 mol·L^-1NaCl溶液为流动相进行测定,重均相对分子质量（WAMr）分别为822410、177520、29112、25066道尔顿,不同的流动相GFP的Mr有明显不同,以0.02%NaN₃较为理想;在低盐浓度(0～0.025mol·L^-1)下,Mr变化明显,在0.1～0.2mol·L^-1硫酸钠溶液中趋于平稳;在pH 3～6时,Mr随pH增加而急剧增加,在pH 6～9范围内变化不明显。结论:不同流动相、盐浓度、pH对GFP的Mr测定结果有明显影响。     

灰树花多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用

目的：观察灰树花多糖（GFP）对糖尿病小鼠（DM）的血糖调节作用。方法：将四氧嘧啶按180mg／kgb．wt．剂量腹腔内1次性注射制作糖尿病小鼠模型。实验组分别按750、250、125rng／kgb．wt．三个剂量每天灌服GFP,正常对照组和实验对照组每日灌服相应体积的水,实验周期均为40d。尾静脉采血测小鼠血糖值及糖耐量实验。结果：喂养40d后,250mg／kg．b．wt．剂量组与实验对照组比较,血糖水平和血糖曲线下面积均明显降低（P〈0.05）,750和125mg／kgb．wt．剂量组与实验对照组比较无明显降低（P〉0.05）。结论：灰树花多糖具有降低实验性糖尿病小鼠血糖的作用。