基于UHPLC-MS/MS的药用植物内源性激素含量检测方法及黄花蒿不同器官激素的测定

目的 激素是调控植物活性次生代谢产物合成途径的核心调控因子，内源激素结构多样、含量极低，检测难度高，缺乏高效、准确的检测方法。本研究利用超高效液相色谱串联质谱（UHPLC-MS/MS）技术构建了对黄花蒿中茉莉酸、细胞分裂素、赤霉素、生长素、脱落酸等多类植物内源性激素高效定量检测方法。方法 使用Agilent Poroshell 120 EC-C18（2.7 μm， 3.0×150 mm）色谱柱，流动相为0.05%甲酸水-乙腈溶液，梯度洗脱，采用多反应监测模式验证方法可行性，并对黄花蒿不同器官中植物激素进行定量分析。结果 本方法中检测的16种植物激素均呈良好线性，加样回收率、精密度和稳定性均符合植物样品的测定要求。利用此方法测定青蒿不同器官的激素含量，结果表明脱落酸、茉莉酸、茉莉酸甲酯均在叶中含量较高，赤霉素和生长素在根部含量高，细胞分裂素在叶和茎中含量高。结论 青蒿不同器官的激素测定结果可进一步印证脱落酸、茉莉酸、茉莉酸甲酯在调控青蒿素合成中起着重要作用的相关报道，同时表明该方法检测性良好。本文构建的植物内源性激素的检测方法为进一步探究植物生长发育、抵御外界胁迫的相关机制及次生代谢产物的合成等方面提供了手段。     

维生素D受体基因的多态性与检测方法

近年研究发现,维生素D缺乏除与骨软化相关外,还与高血压、糖尿病、代谢综合征等多种疾病相关。维生素D在体内经肝脏和肾脏两次羟基化后作用于其受体而发挥生理作用。笔者通过查阅国内外相关文献,介绍维生素D与疾病的关系及维生素D受体基因多态性研究现状,阐述检测维生素D常用方法的优缺点,提出检测维生素D的最佳方法及其受体基因多态性检测的重要性,从而指导临床医生合理用药。     

西替伪麻缓释片中盐酸伪麻黄碱的人体药动学研究

目的建立人血浆中伪麻黄碱浓度的LC-MS／MS测定方法,并用该法研究西替伪麻缓释片在健康人体内的药动学。方法采用LC-MS／MS测定人血浆中不同时间点伪麻黄碱的浓度,以盐酸金刚烷胺为内标,血浆样品用乙腈沉淀蛋白,色谱柱为AgilentZorbaxSB-C18（150mm×2．1mm,3．5μm）,流动相为甲醇-0.1％甲酸水溶液（40：60）,流速0．3ml／min,柱温30℃。结果伪麻黄碱的线性范围为2．5～1000．0ng／ml（r=0．9952）,最低定量检测浓度达2．5ng／ml（S／N〉10）,提取回收率〉78％,日内和日间RSD〈15％。结论本法操作简单,选择性好,灵敏度高,适用于伪麻黄碱的药动学研究。     

口腔溃疡膜有效成分提取方法的考察及含量测定

目的 考察不同溶剂对口腔溃疡膜中有效成分地塞米松磷酸钠和克霉唑的提取率,优化有效成分含量测定方法。方法 采用不同提取溶剂(甲醇、水、70%甲醇)对口腔溃疡膜中的有效成分进行提取,用HPLC法进行含量测定,得到最佳提取方法。结果 纯水对口腔溃疡膜中地塞米松磷酸钠和克霉唑有最好的提取效果。地塞米松磷酸钠在0.482~16.328 μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为（103.97±1.02）%;克霉唑在5.014 5~200.580 0 μg/ml范围内呈良好的线性关系（r=0.999 8）,平均回收率为（104.23±0.63）%。结论 本研究建立的纯水提取方法操作简单,提取效率高,含量测定方法操作简便,准确性、重复性好。     

昆仙胶囊临床应用的研究进展

昆仙胶囊为纯中药复方制剂,由昆明山海棠、淫羊藿、菟丝子和枸杞子四味中药配伍组成,具有祛风除湿、补肾通络的功效,是近年国际上公认的治疗类风湿关节炎较为有效的慢作用药物,主治类风湿关节炎证属风湿痹阻兼肾虚证。临床上昆仙胶囊主要用于治疗类风湿关节炎、强直性脊柱炎、狼疮性肾炎、肾病综合征、慢性肾脏病、过敏性紫癜等疾病。现综述了昆仙胶囊的临床应用及不良反应,为进一步临床合理应用提供参考。     

新脑灵颗粒的质量标准研究

目的建立新脑灵颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对该处方中的延胡索、白芷、厚朴、甘草、当归、川芎、五味子和菊花进行鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定丹酚酸B的含量,色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.5%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~5min,24%B;5~6min,24%~19%B;6~25min,19%~20%B);流速:1.0ml/min;柱温:25℃;检测波长:286nm;进样量:10μl。结果 TLC图中特征斑点清晰,专属性强。丹酚酸B在20~1 280μg/ml范围内线性关系良好,其回归方程为Y=13.304 X-117.50(r=0.999 9,n=7),平均回收率96.17%(RSD=1.10%)。结论该方法简便可行、准确可靠、重复性好,可用于新脑灵颗粒的质量控制。     

清热败毒颗粒剂的质量标准研究

目的 建立清热败毒颗粒剂的质量标准。方法 采用薄层色谱法（TLC）鉴别处方中的板蓝根、连翘、紫花地丁和甘草,采用高效液相色谱法（HPLC）测定绿原酸的含量,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相为乙腈（A）与含0.2%甲酸的水溶液（B）,梯度洗脱：0~12 min,11%~12%A;流速：1.0 ml/min;柱温：30 ℃;检测波长：327 nm;进样量：20 μl。结果 薄层鉴别色谱中特征斑点明显,专属性强。绿原酸在6.19~396.00 μg/ml浓度范围内呈良好线性关系,其回归方程为Y=60.239 4X+9.096 3（r>0.999 9）,回收率为99.66%（RSD=2.82%）。结论 该法简便、稳定可靠、重复性好,为控制清热败毒颗粒的质量标准提供了可借鉴的依据。     

知母皂苷及其苷元的药理作用研究进展

知母皂苷及其苷元是临床常用中药材知母的最主要活性成分,具有广泛的生物活性和药理作用。研究表明,知母皂苷及其苷元具有防治老年痴呆症、保护脑缺血损伤、抗凝血、抗氧化、抗肿瘤、抗骨质疏松、抗炎、降血压、降血糖及降血脂等药理活性。本文对知母皂苷及其苷元的上述药理作用研究进展进行综述,为进一步开发利用提供参考。     

知母皂苷B-II在比格犬体内的药代动力学研究

目的建立比格犬血浆中知母皂苷B-Ⅱ的LC-MS/MS测定方法,并应用于知母皂苷B-Ⅱ的药代动力学研究。方法液相色谱分离采用ODS柱(150 mm×2.1 mm,5μm),以乙腈-0.05%甲酸溶液(35∶65)为流动相,质谱检测采用ESI离子源,MRM负离子模式。将6只比格犬随机分成2组,单剂量交叉静注或口服知母皂苷B-Ⅱ,剂量分别为2,30 mg.kg-1,定时采集血样,测定比格犬体内的血药浓度,并计算药代动力学参数。结果比格犬静注和口服知母皂苷B-Ⅱ后的主要药代动力学参数如下:Cmax分别为(21507±7307)、(313±149)ng.mL-1;AUC0-t分别为(19177±5692)、(1879±738)ng.h.mL-1;AUC0-∞分别为(19770±5879)、(2153±695)ng.h.mL-1;t1/2分别为(7.81±2.61)、(6.01±5.28)h;MRT0-t分别为(2.89±0.39)、(6.27±1.80)h;MRT0-∞分别为(3.88±0.39)、(8.59±3.18)h。结论该法可用于比格犬血浆中知母皂苷B-Ⅱ的检测及其体内药代动力学研究,比格犬口服知母皂苷B-Ⅱ后的绝对生物利用度为(0.72±0.29)%。     

昆仙胶囊HPLC特征指纹图谱和多成分定量测定研究

目的 建立昆仙胶囊HPLC特征指纹图谱结合多成分含量测定的方法，为其质量控制提供参考。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，体积流量为0.8 mL/min，柱温33℃，检测波长270 nm。以朝藿定A为参照峰，建立15批昆仙胶囊特征指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012A版）、聚类分析及偏最小二乘法-判别分析方法进行评价，同时测定金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷以及宝藿苷I的含量。结果 建立了昆仙胶囊特征指纹图谱，共标定了21个共有峰，并通过对照品指认了其中的15个成分，各批次样品的相似度均大于0.9。金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷I在各自范围内线性关系良好（r>0.999），15批昆仙胶囊样品中上述6个成分的质量分数分别为2.817～7.527、7.287～9.103、8.730～18.675、33.377～70.371、35.297～50.291、4.059～9.079 mg/g。结论 建立了昆仙胶囊特征指纹图谱结合多成分同时测定的方法，简便、准确、重现性好，可用于昆仙胶囊的质量控制。