肾间质纤维化组织来源成纤维细胞血管紧张素Ⅱ1A受体的表达及其生物学意义

用单侧输尿管梗阻的方法诱导小鼠肾间质纤维化，并从中成功地培养出了成纤维细胞。对成纤维细胞血管紧张素Ⅱ１Ａ（ＡＴ１Ａ）受体的表达与细胞增殖和分泌细胞外基质的关系进行了研究。结果发现，从肾间质纤维化组织中培养出的成纤维细胞，细胞增殖和产生纤维连接蛋白及层粘连蛋白的能力明显高于从正常肾间质中培养的成纤维细胞。在单侧输尿管梗阻小鼠的血浆和肾组织中血管紧张素Ⅱ的活性显著升高。从肾间质纤维化组织中培养出的成纤维细胞，ＡＴ１Ａ受体的表达在蛋白质和分子水平上均有明显增高。表明，在肾间质纤维化过程中肾素－血管紧张素系统被激活，对刺激成纤维细胞增殖和产生细胞外基质起着重要作用。     

肾小球系膜细胞的分离和培养

目的分离、培养和鉴定正常人肾小球系膜细胞。方法筛网滤过分离正常人肾小球系膜细胞,同时采用免疫荧光技术,利用异硫氰酸荧光素(FITC)间接标记单克隆抗体:抗Ⅷ因子相关抗原抗体、抗结蛋白抗体、抗角蛋白抗体、抗细胞角蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体对系膜细胞特有的中间微丝进行鉴定。并采用同期培养的同一来源的肾小球内皮细胞作对照。结果抗Ⅷ因子相关抗原、抗角蛋白和抗细胞角蛋白抗体表达均为阴性,而抗结蛋白抗体、抗Ⅳ型胶原抗体、抗纤维连接蛋白抗体、抗层粘连蛋白抗体为阳性,说明培养的细胞为系膜细胞。结论该种方法分离培养的细胞经过免疫荧光染色鉴定为肾小球系膜细胞。     

正、反义组织金属蛋白酶抑制剂1基因转染对肾小球系膜细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的 探讨正、反义组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP－1）对肾小球系膜细胞凋亡的影响。方法 利用前期工作中克隆出的人TIMP－1全长cDNA,分别构建出表达正义及反义TIMP－1的重组真核表达载体pcDNA3-TIMP-1(PTs),pcDNA3-ATIMP-1(PTas),并将上述重组质粒转染至大鼠的肾小球系膜细胞中,Northern杂交检测正、反义TIMP－1的表达。无血清诱导大鼠系膜细胞凋亡,利用DNA缺口末端标记（TUNEL）分析、DNA电泳技术在无血清后的不同时间点检测细胞凋亡,RT－PCR的方法检测凋亡相关基因的表达。结果 转染PTas的大鼠系膜细胞可以高效表达反义TIMP－1,无于血清诱导12h开始发生凋亡;无外源基因转染及空载体转染的大鼠系膜细胞在无血清48h发生凋亡;而转染正义TIMP－1的大鼠系膜细胞可高效表达正义TIMP－1,在无血清4d时才发生凋亡。TIMP－1的高表达或低表达可引起大鼠系膜细胞bax的下调或上调,但并不影响bcl-2的表达。结论 TIMP－1可以抑制无血清诱导的大鼠系膜细胞的凋亡,反义TIMP－1对之则有促进作用。这提示TIMP－1在肾脏除了抑制细胞外基质的作用外还具有新的功能。     

健脾益肾方对尿毒症患者IL-1、IL-2、IL-6水平影响的临床观察

目的：观察健脾益肾方对尿毒症患者白介素-1（IL-1）、白介素-2（IL-2）、白介素．6（IL-6）水平的影响。方法：将55例符合血液透析指征的中医辨证脾肾阳虚的尿毒症患者随机分为2组。治疗组给予血透加健脾益肾方治疗；对照组给予单纯血透治疗；观察各组治疗前后分别观察临床症状评分、检测各组治疗前后IL-1、IL-2、IL-6、TNFα等细胞因子水平的变化。结果：治疗组总有效率85．71％。对照组总有效率62．96％。两组疗效有显著性差异（P〈0．01）。治疗组治疗后3个月，IL-1、IL-6显著下降，IL-2则有显著上升。对照组治疗前后对比则无显著性差异。结论：口服健脾益肾方可减轻尿毒症脾肾阳虚患者临床症状，有效提高IL-2水平，下调异常增高的IL-1、IL-6的水平，对尿毒症患者免疫功能具有调节作用。     

健脾益肾方对5／6肾切除大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:探讨健脾益肾方治疗慢性肾衰竭(CRF)及其抗肾纤维化的作用机制.方法:将Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组(N组),模型组(M组),健脾益肾方低剂量治疗组(L组)、高剂量治疗组(H组),除N组外均行5/6肾切除手术复制CRF动物模型.治疗组给予健脾益肾方灌胃.于第8周后用全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr);RT-PCR法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达.结果:各组大鼠肾脏均有TGF-β1 mRNA表达,N组有较弱表达,M组、L组大鼠肾组织表达较N组显著增加(P＜0.01),H组表达较N组增加,但差异无显著性(P＞0.05);L组及H组表达较M组明显减少(P＜0.01);H组表达较L组均显著减少(P＜0.01).结论:健脾益肾方可能通过抑制大鼠肾组织TGF-β1的表达,延缓肾纤维化的进展,达到治疗和延缓CRF进展的目的.     

抑制整合素连接激酶(ILK)表达对大鼠肾小球系膜细胞细胞问隙连接蛋白43表达的影响

目的 研究抑制整合素连接激酶(ILK)表达对大鼠肾小球系膜细胞(RMC)细胞问隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响.方法 将大鼠肾小球系膜细胞分为RMC组(n=6)、ILK-con siRNA转染组(n=6)和ILK-siRNA转染组(n=6).合成抑制ILK基因的siRNA,待细胞长至60%融合后,ILK-siRNA转染组和ILK-con sLRNA转染组分别用脂质体转染ILK-siRNA或ILK-con siRNA,RMC组仅加入脂质体,24h后收集细胞,提取总蛋白和总RNA,用RT-PCR和Western blotting观察ILK和Cx43 mRNA和蛋白的表达.转染后继续培养24、48、72h,MTT法检测细胞活力.结果 与RMC组和ILK-con siRNA转染组比较,ILK-siRNA组ILK mR-NA和蛋白的表达均下降30%～50%(P<0.05,P<0.01),Cx43 mRNA水平增加30%～40%(P<0.05),Cx43蛋白水平增加60%～70%(P<0.01).应用ILK-siRNA转染系膜细胞后24、48、72h,细胞活力均显著高于RMC组和ILK-con siRNA转染组(P<0.05,P<0.01).结论 抑制ILK途径可上调肾小球系膜细胞Cx43的表达,增强细胞活力;Cx43的调节可能是部分通过ILK途径实现的.     

肺炎

什么是肺炎　肺炎为感染性疾病 ,会影响肺内支气管和肺泡功能 ,使呼吸困难。原因多为病毒或细菌感染。症状和体征为发热、咳嗽、呼吸困难、头痛、乏力 ,甚至肺内可闻及罗音。如果出现这些症状 ,应立即报告医生。若出现嘴唇、指甲青紫 ,请向急救中心呼救。检查　首先 ,医生要作听诊检查 ,然后拍摄 X片 ,查痰液和血常规。该做些什么才会对病情有利　 ( 1 )足够的睡眠 ,增强机体抵抗力 ;( 2 )每小时要咳嗽和深呼吸几次以便排除肺内的粘稠分泌物 ;( 3)擤鼻涕后及饭前便后要用肥皂洗手或使用酒精湿巾消毒 ;( 4 )戒烟 ;( 5)每天至少喝 8杯水 (一…     

血管紧张素Ⅱ对肾小球系膜细胞PAI-1 基因表达的调节作用及其机制

为探讨血管紧张素Ⅱ与系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物－1（PAI－1）基因表达的关系，从健康成人肾（肾移植配型不合）培养肾小球系膜细胞，经过10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol/L浓度的血管紧张素Ⅱ刺激后，分别检测系膜细胞血管紧张素ⅡAT1和AT2受体基因表达以及PAI－1基因表达，并测定培养上清中纤溶酶原激活物的活性。结果发现，在血管紧张素Ⅱ刺激下，系膜细胞AT1受体mRNA表达明显增强，而AT2受体的基因表达不论是在正常状态下，还是在血管紧张素Ⅱ刺激后均未检测到；血管紧张素Ⅱ诱导48h后，系膜细胞PAI－1的基因表达显著增强，并呈现浓度依赖性，而培养上清中纤溶酶原激活物的活性则下降。说明血管紧张素Ⅱ能显著促进系膜细胞PAI－1基因的表达，其作用可能是通过AT1受体介导的。     

高位颈椎损伤的影像学诊断

通常把环枢关节至第三颈椎称为高位颈椎。高位颈椎损伤分为骨折和脱位，常合并不同程度的脊髓损伤，并发症多，死亡率高，只有早期明确损伤部位和程度，才能为临床的正确及时治疗提供依据。但由于特殊解剖关系，常规X线检查很难达到这一目的，CT和MRI可以准确显示损伤部位和程度，为临床制定治疗计划提供可靠依据。1损伤类型[1~3]损伤分为骨折和脱位两种类型。骨折包括寰椎骨折和枢椎骨折。寰椎骨折又分为前弓、后弓、爆裂及侧块骨折四型。枢椎骨折分为齿状突、椎体、关节突间及棘突凤折四型。脱应分为寰枕关节脱位、寰枢关节脱位、C2~3…