Ⅳ型胶原酶模型的建立及其在中药活性成分筛选中的应用

目的建立Ⅳ型胶原酶筛选模型,并运用此模型对中药活性成分进行评价。方法利用Ⅳ型胶原酶特异性水解明胶释放的末端氨基与2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)发生显色,吸光度值可以衡量Ⅳ型胶原酶含量,优化Ⅳ型胶原酶浓度、琥珀酰凝胶浓度、显色剂用量及时间参数。结果确定了Ⅳ型胶原酶筛选模型的条件:5.0×10~(-5) g/L酶溶液、20 g/L琥珀酰凝胶溶液、60μl 0.05%TNBS、显色30 min,阳性药盐酸四环素在1.0 g/L下对该酶的抑制率是19.39%,并呈现一定的量效关系,表明成功建立该筛选模型。应用该模型筛选发现,阿魏酸和川芎嗪具有明显的抑制Ⅳ型胶原酶活性,而水杨酸和小檗碱则具有促进作用。结论Ⅳ型胶原酶的筛选模型成功建立并应用到中药活性成分筛选中,为快速评价中药活性成分及其作用机制提供了有益参考。     

小檗碱衍生物的合成及其抗血管生成活性研究

目的结构拼合是获得先导化合物的有效途径,以此为指导合成一系列新型小檗碱衍生物,并用Ⅳ型胶原酶和鸡胚尿囊膜(CAM)模型评价其活性和安全性。方法以小檗碱为母核,结合中药常见活性成分,运用"拼合原理",设计、合成小檗碱系列衍生物,并采用课题组前期建立的Ⅳ型胶原酶和CAM模型,快速评价小檗碱衍生物对Ⅳ型胶原酶的抑制作用和对新生胚胎血管生成的影响。结果设计并合成了4个新化合物,结构经1H-NMR、13C-NMR和HRMS确认,其中化合物CYQ-44、CYQ-48、CYQ-50对Ⅳ型胶原酶有剂量相关性抑制作用,且均高于阳性药盐酸四环素;与此同时,化合物CYQ-48、CYQ-对新生胚胎血管生成有一定抑制作用。结论成功合成了4个新型小檗碱衍生物,它们不仅对Ⅳ型胶原酶和新生血管具有抑制作用,而且安全指数高,进一步表明以结构拼合为指导可高效、简便获得具有中医药特点的先导化合物。     

阔苞菊化学成分研究

目的：研究阔苞菊Pluchea indica根的化学成分。方法：利用各种柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果：分离得到12个化合物,分别鉴定为：角鲨烯（squalene）、1-羟基-2,3,4,5-甲氧基（口山）酮（1-hydroxy-2,3,4,5-tetramethoxyxanthone）、丁香脂素（syringaresino）、咖啡酸（eaffeicacid）、间苯三酚（phloroglueinol）、3,5-二羟基苯甲酸（3,5-dihydroxy—benzoic acid）、原儿茶醛（protocatechuic aldehyde）、5-羟基香兰醛（5-hydroxy vanillin）、没食子酸（gallic acid）、丁香酸（syringate）、5α,8α-过氧麦角甾-（3,5,8,22E）-6,22-二烯-3β-醇[5α,8α—epidioxy-（3,5,8,22E）-ergosta-6,22-dien-3-ol]、腺苷（adenosine）。结论：以上化合物均为首次从该植物中分离得到,且其中的小分子酚酸类成分可能具有一定化学生态学意义。