| Ⅳ型胶原酶模型的建立及其在中药活性成分筛选中的应用 |
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| 作者姓名： | 薛南南 曹寅秋 房康 陈萌 张欣钰 王辉 吴高荣 贾晓慧 郭文博 王鹏龙 雷海民 |
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| 作者单位： | 北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488;北京中医药大学中药学院,北京,102488 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;北京中医药大学创新团队项目 |
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| 摘 要： | 目的建立Ⅳ型胶原酶筛选模型,并运用此模型对中药活性成分进行评价。方法利用Ⅳ型胶原酶特异性水解明胶释放的末端氨基与2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)发生显色,吸光度值可以衡量Ⅳ型胶原酶含量,优化Ⅳ型胶原酶浓度、琥珀酰凝胶浓度、显色剂用量及时间参数。结果确定了Ⅳ型胶原酶筛选模型的条件:5.0×10-5 g/L酶溶液、20 g/L琥珀酰凝胶溶液、60μl 0.05%TNBS、显色30 min,阳性药盐酸四环素在1.0 g/L下对该酶的抑制率是19.39%,并呈现一定的量效关系,表明成功建立该筛选模型。应用该模型筛选发现,阿魏酸和川芎嗪具有明显的抑制Ⅳ型胶原酶活性,而水杨酸和小檗碱则具有促进作用。结论Ⅳ型胶原酶的筛选模型成功建立并应用到中药活性成分筛选中,为快速评价中药活性成分及其作用机制提供了有益参考。
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| 关 键 词： | Ⅳ型胶原酶 筛选 模型 中药活性成分 |
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