人羊膜上皮干细胞治疗早产儿支气管肺发育不良的研究现状

随着围生医学的进步,早产儿尤其是极早产儿和超早产儿生存率大大提高,但是随之而来的支气管肺发育不良(BPD)越来越成为临床迫切需要解决的一大难题。干细胞可用于早产儿BPD治疗,可通过减少炎症、降低肺纤维化及抗氧化应激损伤等修复受损组织,特别是人羊膜上皮干细胞(hAESC),具有自我更新、多向分化潜能、无致瘤性、低免疫原性、无医学伦理纠纷、强大旁分泌作用及免疫调节作用等显著优势,可改善患儿心、肺功能,而成为目前早产儿BPD治疗的研究热点。笔者拟就hAESC治疗早产儿BPD的作用机制及其优势与挑战等的最新研究现状进行阐述。     

去细胞羊膜载体复合自体子宫内膜干细胞治疗重度宫腔粘连1例报道

宫腔粘连又称Asherman综合征,是由于宫腔手术操作、宫腔内感染等原因导致子宫内膜肌层被破坏,从而出现以月经异常、不孕、反复流产等为临床表现的综合征。人工周期、节育器、球囊等传统治疗方法效果欠理想。本文报道了1例重度宫腔粘连患者使用了负载着自体子宫内膜干细胞与去细胞羊膜载体的宫内节育器(IUD)后,经体外受精-胚胎移植,成功获得临床妊娠。本病例提示,去细胞羊膜载体复合自体子宫内膜干细胞可以有效预防宫腔粘连复发,帮助子宫内膜重建和修复。     

胎膜早破孕妇血清炎性标志物变化､生殖道感染情况及羊膜腔感染危险因素分析

目的研究胎膜早破(PROM)孕妇血清炎症标志物水平变化?生殖道感染情况及引起羊膜腔感染的可能相关因素,并分析引起PROM的危险因素。方法将2017年6月至2020年6月台州市中心医院收治的113例PROM患者纳入观察组,同期正常妊娠并分娩的120例孕产妇纳入对照组。比较两组血清炎性标志物[血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)?C反应蛋白(CRP)]及下生殖道感染情况,并行单因素及多因素Logistic回归分析影响PROM的独立危险因素;分析PROM孕产妇的羊膜腔感染情况,分析血清炎性标志物?生殖道感染与羊膜腔感染的关系。结果观察组血清炎性标志物VCAM-1?CRP水平及下生殖道感染率均显著高于对照组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,下生殖道感染?血清VCAM-1水平?血清CRP水平及双胎妊娠均是影响PROM的独立危险因素;统计发现,PROM合并羊膜腔感染者共31例,其血清VCAM-1水平?血清CRP水平及下生殖道感染率均显著高于非羊膜腔感染者(P<0.05)。结论下生殖道感染?血清炎性标志物水平升高及双胎妊娠是PROM发生的独立危险因素,且下生殖道感染及炎性标志物水平升高还可能是影响羊膜腔感染发生的因素之一。     

不同TGF-β表达量的hAMSCs尾静脉移植对异种周围神经移植小鼠坐骨神经功能的影响

目的探讨不同转化生长因子-β(TGF-β)表达量的人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)尾静脉移植对异种周围神经移植小鼠坐骨神经功能的恢复作用。方法从健康剖宫产产妇志愿捐献的新鲜羊膜中分离出hAMSCs,并进行纯化及鉴定。构建上调和下调TGF-β表达的慢病毒质粒,并转染纯化的hAMSCs,构建出稳定的上调或下调TGF-β表达的hAMSCs。分离并剪去C57BL/6小鼠的部分坐骨神经,将SD大鼠的坐骨神经分离剪取并移植至小鼠的坐骨神经缺损处,构建出异种周围神经移植小鼠模型。将模型小鼠按随机数字表分为对照组、未修饰的hAMSCs治疗组、高表达TGF-β的hAMSCs治疗组、低表达TGF-β的hAMSCs治疗组,每组10只。各组于造模前1 d分别经尾静脉注射磷酸盐缓冲液或相应的hAMSCs重悬液进行移植治疗。于治疗后第14天时采用DigGait步态分析系统评估各组小鼠的坐骨神经功能恢复情况。结果治疗后第14天时,高表达TGF-β的hAMSCs治疗组小鼠的坐骨神经功能指数(-25.820±0.286)明显高于低表达TGF-β的hAMSCs治疗组(-33.413±0.920)和未修饰的hAMSCs治疗组(-30.755±0.421),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高表达TGF-β的hAMSCs尾静脉移植能够更有效地改善异种周围神经移植小鼠的坐骨神经功能,其可能成为周围神经损伤治疗的新突破口。     

人羊膜间充质干细胞膜片的构建及其成软骨诱导的实验研究

目的:探讨应用一种简单的方法构建人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,HAMSCs)膜片,并研究其向成软骨细胞分化的潜能,探索利用HAMSCs膜片构建组织工程软骨的可行性。方法:取产妇胎盘通过酶消化法获得HAMSCs,通过流式细胞术鉴定其表型特征;通过免疫荧光检测细胞波形蛋白和CK-19的表达。取第3代HAMSCs通过CCK-8检测细胞增殖活性;取第3代HAMSCs加入成膜片培养基培养以构建HAMSCs膜片;取第3代HAMSCs加入成膜片培养基培养7天,再换用成软骨诱导培养基培养以构建成软骨诱导的HAMSCs膜片。通过流式细胞术检测成膜片诱导后HAMSCs表型分子的表达;扫描电镜(SEM)观察细胞形态和细胞外基质的分泌。RT-PCR定量分析成软骨分化相关基因(SOX9、ACAN、COLⅡ)的表达;HE染色观察细胞形态、分布;甲苯胺蓝和番红染色检测蛋白聚糖的分泌,Ⅱ型胶原免疫组化检测Ⅱ型胶原的表达。结果:流式细胞术结果表明HAMSCs表达间充质干细胞(MSCs)表型。免疫荧光检测结果示:波形蛋白阳性表达,CK-19阴性表达。CCK-8检测结果示:细胞生长曲线呈S型,第3天进入对数生长期,第7天达到顶峰。HAMSCs成膜片诱导后流式结果表明干细胞特性分子CD44、CD73、CD90、CD105仍高表达。SEM结果示:HAMSCs膜片呈复层结构,梭形的细胞分泌大量细胞外基质,细胞被细胞外基质所包埋并逐渐融合。RT-PCR结果显示:与HAMSCs膜片组相比,成软骨诱导的膜片组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA的表达量显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果示:成软骨诱导的HAMSCs膜片可见分布均匀的类圆形细胞并被大量细胞外基质包围;甲苯胺蓝染色结果显示:椭圆形细胞分泌大量细胞胞外基质,成铺路石样排列;番红染色结果示:成软骨诱导的膜片有大量蛋白聚糖分泌;Ⅱ型胶原免疫组化结果示:成软骨诱导的膜片高表达Ⅱ型胶原。结论:本实验应用一种简单的方法在普通培养皿上成功构建了HAMSCs膜片,体外研究证实HAMSCs膜片具有良好的成软骨分化潜能。因此,HAMSCs膜片可以作为软骨组织工程的种子细胞之一,HAMSCs膜片的应用将为软骨缺损修复提供一种新思路。     

羊膜在眼科临床工作中的应用进展

羊膜属于人胎盘中最内层的膜,早先用于产前诊断,也有用于皮肤移植、皮肤烧伤及溃疡的治疗,可使受损表层皮肤上皮化的速度明显增加。后又用于人工再造阴道、硬脑膜缺损修补、肠皮肤瘘等,均已获得显著疗效。自从发现在损伤的兔角膜上行羊膜移植可使40%的角膜透明性及上皮表型恢复后,羊膜在眼科领域的地位日益显著。随着羊膜的生物学特性和组织学特性被层层揭开,这种"神奇的膜"在眼科领域已被广泛应用。     

宫腔粘连术后辅助治疗的研究进展

宫腔粘连(IUA)指由于各种因素导致子宫内膜基底层的损伤,导致宫腔肌壁相互粘连。临床表现主要为月经量减少或闭经,影响女性生殖健康,可导致不孕和复发性流产。IUA的治疗原则是以手术为主的综合治疗。IUA早期诊断困难、手术风险较大、术后复发率高,治疗方案选择一直是临床治疗难点。近年来,越来越多的学者开展了关于IUA术后辅助治疗的研究,取得了一定进展。本文就IUA术后辅助治疗的研究做一综述,为临床治疗提供一定的思路。